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公开(公告)号：CN112175982B
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN202011047620.2
申请日：2020-09-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/77 , C12N1/21 , C12N15/52 , C12P13/02 , A23L29/269 , A61K8/88 , A61K47/34 , A61Q19/00 , C12R1/15
Abstract: 本发明公开了一种γ‑PGA聚合酶基因重组菌株及其构建方法与应用，是一种从糖质原料一步法发酵合成γ–聚谷氨酸的生产工艺，属于合成生物学和发酵工程领域。本发明将天然生产菌地衣芽孢杆菌的γ‑聚谷氨酸合成酶的基因簇capBCA克隆至一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中进行外源表达，在此基础上，利用不同强度的RBS调控元件调控合成酶基因簇各基因的表达水平获得的重组菌株Cg 1/10BCA、Cg B1/10CA和Cg BC1/10A所生产的γ‑PGA分子量为295.47～28018kDa。本发明成功地构建了聚谷氨酸的外源合成途径，实现理性控制γ‑PGA分子量的目的，节省了原料和过程控制成本，提高了经济效益，拓展了聚谷氨酸的应用范围，具有很好的工业应用价值和前景。
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公开(公告)号：CN113234764A
公开(公告)日：2021-08-10
申请号：CN202110546485.4
申请日：2021-05-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种γ‑聚谷氨酸的异源表达方法，是一种从糖质原料一步法发酵合成不同D/L单体比的γ–PGA的生产工艺，以一株高产L‑Glu的C.glutamicum F343为底盘表达来自于地衣芽孢杆菌的γ–PGA合成酶的基因簇capBCA，合成了以L‑Glu为主(98.06)的γ–PGA。再通过外源添加不同浓度的D‑Glu，合成了γ–D‑PGA占比为2％‑33％的γ–PGA。结果显示，在48h时γ‑PGA的产量达到最高为5.33g/L。此外本发明对产自F343重组菌的γ‑聚谷氨酸的分子量进行了测定，结果显示，其重均分子量是产自地衣芽孢杆菌的天然γ‑聚谷氨酸的重均分子量的1.16倍。本发明成功地构建了聚谷氨酸的外源合成途径，节省了原料和过程控制成本，提高了经济效益，具有很好的工业应用价值和前景。
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公开(公告)号：CN114369561B
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202210026910.1
申请日：2022-01-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种调控CapBCA单体表达水平的菌株及在聚谷氨酸生产中的应用，本发明将天然生产菌地衣芽孢杆菌的γ‑聚谷氨酸合成酶的基因簇capBCA克隆至一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中进行外源表达，在此基础上，利用不同数量的lacO调控合成酶基因簇各基因的表达水平，获得的重组菌株所生产的γ‑PGA产量为3.63～5.84g/L，产率为0.15～0.27g/L/OD600。还发现单独提高CapB和CapC的表达强度，及适度表达CapA均有利于γ‑PGA的合成，而且CapC对于γ‑PGA的合成发挥着至关重要的作用，其表达水平对γ‑PGA产量的影响贡献度可达68.24％。结果有助于深入了解γ‑PGA合成酶单体的功能，以及对γ‑PGA合成的影响规律。
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公开(公告)号：CN112175982A
公开(公告)日：2021-01-05
申请号：CN202011047620.2
申请日：2020-09-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/77 , C12N1/21 , C12N15/52 , C12P13/02 , A23L29/269 , A61K8/88 , A61K47/34 , A61Q19/00 , C12R1/15
Abstract: 本发明公开了一种γ‑PGA聚合酶基因重组菌株及其构建方法与应用，是一种从糖质原料一步法发酵合成γ–聚谷氨酸的生产工艺，属于合成生物学和发酵工程领域。本发明将天然生产菌地衣芽孢杆菌的γ‑聚谷氨酸合成酶的基因簇capBCA克隆至一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中进行外源表达，在此基础上，利用不同强度的RBS调控元件调控合成酶基因簇各基因的表达水平获得的重组菌株Cg 1/10BCA、Cg B1/10CA和Cg BC1/10A所生产的γ‑PGA分子量为295.47～28018kDa。本发明成功地构建了聚谷氨酸的外源合成途径，实现理性控制γ‑PGA分子量的目的，节省了原料和过程控制成本，提高了经济效益，拓展了聚谷氨酸的应用范围，具有很好的工业应用价值和前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118291492A
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202410407809.X
申请日：2024-04-07
Applicant: 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明将地衣芽孢杆菌的γ‑聚谷氨酸合成酶基因簇pgsBCA克隆至一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中进行外源表达，在此基础上，将pgsBC替换为其他菌株来源的pgsBC，分别是枯草芽孢杆菌或甲基营养型芽孢杆菌，得到重组菌株B'(BS)C'(BS)A或B'(BM)C'(BM)A，与对照菌株B'(BL)C'(BL)A产生γ‑PGA的最大分子量6693.689kDa相比，异源表达BS和BM来源的PgsBC蛋白能产生更高分子量的γ‑PGA，分别为25657kDa、16741kDa。因此替换PgsBCA多蛋白复合体中PgsBC的来源是改变γ‑PGA分子量的有效方法。
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公开(公告)号：CN114369561A
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202210026910.1
申请日：2022-01-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种调控CapBCA单体表达水平的菌株及在聚谷氨酸生产中的应用，本发明将天然生产菌地衣芽孢杆菌的γ‑聚谷氨酸合成酶的基因簇capBCA克隆至一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中进行外源表达，在此基础上，利用不同数量的lacO调控合成酶基因簇各基因的表达水平，获得的重组菌株所生产的γ‑PGA产量为3.63～5.84g/L，产率为0.15～0.27g/L/OD600。还发现单独提高CapB和CapC的表达强度，及适度表达CapA均有利于γ‑PGA的合成，而且CapC对于γ‑PGA的合成发挥着至关重要的作用，其表达水平对γ‑PGA产量的影响贡献度可达68.24％。结果有助于深入了解γ‑PGA合成酶单体的功能，以及对γ‑PGA合成的影响规律。
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公开(公告)号：CN116042660A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202211045962.X
申请日：2022-08-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种替换PgsA来源的γ‑PGA合成酶的基因簇及其合成聚谷氨酸的方法，本发明将地衣芽孢杆菌的γ‑聚谷氨酸合成酶基因簇pgsBCA克隆至一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中进行外源表达，在此基础上，将pgsA替换为其他菌株来源的pgsA，分别是枯草芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、炭疽芽孢杆菌，得到重组菌株BCA′(BS)、BCA′(BM)、BCA′(BAM)、BCA′(BAN)。其中BCA′(BS)、BCA′(BM)、BCA′(BAM)所生产的γ‑PGA产量分别提高了54.73％、34.87％、25.10％，而BCA′(BAN)所生产的γ‑PGA产量下降了24.09％。因此替换特定的PgsBCA多蛋白复合体中PgsA的来源是进一步提高γ‑PGA产量的有效方法。
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公开(公告)号：CN116042659A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202211044435.7
申请日：2022-08-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种替换PgsA来源的γ‑PGA合成酶的基因簇及其合成聚谷氨酸的方法，将地衣芽孢杆菌的γ‑聚谷氨酸合成酶基因簇pgsBCA克隆至一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中进行外源表达，在此基础上，将pgsB替换为其他菌株来源的pgsB，分别是枯草芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、炭疽芽孢杆菌，得到重组菌株B′(BS)CA、B′(BM)CA、B′(BAM)CA、B′(BAN)CA，其中B′(BS)CA、B′(BM)CA、B′(BAM)CA所生产的γ‑PGA产量分别提高了48.00％、107.87％和98.43％，而B′(BAM)CA所生产的γ‑PGA产量明显下降。因此替换特定的PgsBCA多蛋白复合体中PgsB的来源是进一步提高γ‑PGA产量的有效方法。
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公开(公告)号：CN113151136A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110546483.5
申请日：2021-05-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株产γ‑DL‑PGA的菌株及其合成不同D/L单体比γ‑PGA的方法，是一种从糖质原料一步法发酵合成不同D/L单体比的γ‑PGA的生产工艺，以一株高产L‑Glu的C.glutamicum F343为底盘同时表达来自于地衣芽孢杆菌的γ‑PGA合成酶的基因簇capBCA和枯草芽孢杆菌的谷氨酸消旋酶基因racE，利用组成型启动子内源调控RacE表达水平，合成了D‑Glu占比为30％‑50％的γ‑PGA，实现了γ‑PGA的D/L单体比的理性、精确调控，构建了不同D/L单体比的γ‑PGA的合成途径，节省了原料和过程控制成本。
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