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公开(公告)号：CN106349348A
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201610937104.4
申请日：2016-11-01
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/70 , C12N2750/10022 , C12N2800/101
Abstract: 本发明提供了一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法。该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX-6p-1载体与GyV7病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应，直接重组克隆技术；并转化到大肠杆菌，实现VP3蛋白表达；其中，用于PCR扩增GyV7病毒VP3基因的上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。该方法操作简单、快速高效，获得的GyV7病毒VP3表达及纯化的蛋白，可直接提供VP3蛋白作为GyV7诊断抗原；作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体；为开展GyV7流行病学调查提供有效诊断试剂；并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号：CN106018780A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610327488.8
申请日：2016-05-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: G01N33/5302 , G01N21/6486
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种基于F1蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F1蛋白的293T细胞，FITC标记的羊抗鸡抗体，样品稀释液，洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性；该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查，而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平，用于评价免疫保护性抗体水平等。
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公开(公告)号：CN105973854A
公开(公告)日：2016-09-28
申请号：CN201610327763.6
申请日：2016-05-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: G01N21/6486 , G01N33/5302
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种基于F2蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F2蛋白的293T细胞，FITC标记的羊抗鸡抗体，样品稀释液和洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性。该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查，而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平，用于评价免疫保护性抗体水平等。
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公开(公告)号：CN105037504A
公开(公告)日：2015-11-11
申请号：CN201510359309.4
申请日：2015-06-25
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C07K14/01 , C07K2319/23 , C12N2750/10011
Abstract: 本发明提供了一种AGV2型环形病毒VP2可溶性蛋白及其制备方法。是利用pGEX-6p-1线性化载体以及AGV2病毒VP2基因片段的引物，利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆VP2，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现AGV2的VP2蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的VP2可溶性蛋白。本发明获得的AGV2病毒VP2可溶性表达及纯化的蛋白，可直接提供VP2可容性蛋白作为AGV2诊断抗原；作为免疫原获得抗VP2多克隆抗体；为开展AGV2血清学流行病学调查及VP2功能研究提供有效免疫学试剂，填补国内外空白；并为进一步探究VP2生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号：CN104833801A
公开(公告)日：2015-08-12
申请号：CN201510113989.1
申请日：2015-03-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56983
Abstract: 一种检测小鹅瘟抗原的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用，本发明属于生物技术检测领域，本发明包括包被抗小鹅瘟病毒(GPV)单克隆抗体的酶标板、GPV标准阳性抗原和针对GPV不同表位的酶标记抗GPV单克隆抗体。本发明的技术原理：酶联免疫吸附试验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。本发明可用于检测大分子抗原或特异性抗体等，具有快速、灵敏、简便、易于标准化等优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103995123A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410266781.9
申请日：2014-06-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N33/54373 , G01N2333/23
Abstract: 一种竞争ELISA试剂盒检测牛布氏杆菌病的方法，属于生物技术检测领域，将超声裂解处理的牛种布鲁氏菌A99包被ELISA酶标板；再将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10和稀释的待检血清样品加入酶标板的板孔中；并同时分别将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10分别和已知的阴、阳性血清加入酶标板的板孔中，水浴后用PBST洗涤，再向各板孔中分别加入抗小鼠IgG酶标抗体，孵育洗涤后，进行显色反应，测得各板孔的OD450值，计算各板孔的抑制率。本发明利用建立的cELISA方法对小肠结肠炎耶尔森菌O9和大肠杆菌O157高免阳性血清进行检测，PI值均低于30%，可以有效地排除假阳性结果的发生。
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公开(公告)号：CN102924577B
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201210494560.8
申请日：2012-11-28
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了鸡高迁移率族蛋白B1（chHMGB1）抗原多肽和抗chHMGB1的单克隆抗体。该chHMGB1抗原多肽序列为VDAGKKVVAKAEKSKK。以该抗原多肽为免疫原免疫Balb/c小鼠，筛选得到一株杂交瘤细胞株2G1，保藏编号为CGMCCNo.6708。该细胞株能够持续稳定地分泌抗chHMGB1的单克隆抗体。该单克隆抗体不仅能够与融合蛋白表达的chHMGB1反应，而且能够与禽类巨噬细胞系HD11和CEF、DF1细胞中天然的chHMGB1特异性反应；该抗体还可以用于细胞刺激后培养上清中chHMGB1的分析，因此可用于对chHMGB1分子生物学功能的深入研究。
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公开(公告)号：CN101957375B
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201010295008.7
申请日：2010-10-15
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/558 , G01N27/02 , G01N27/30
Abstract: 本发明涉及呋喃它酮残留物无标记的阻抗型免疫传感器，及其制备方法和应用，所说的该传感器通过金胶制备、金电极的预处理、1，4-苯二硫醇修饰金电极、单层纳米金胶的自组装和抗体的固定5个步骤而制得。其特征在于是将纳米金通过自组装方法固定于金电极表面，用来固定呋喃它酮残留物的单克隆抗体而构建得到。使用时，先建立阻抗的相对变化率%△Rct与AMOZ浓度的关系，再根据待测样品的阻抗相对变化率%△Rct就可确定其AMOZ浓度。采用本发明的传感器和检测方法具有快速简便的特点，解决当前呋喃它酮残留检测操作费时的缺陷。
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公开(公告)号：CN118894915A
公开(公告)日：2024-11-05
申请号：CN202411032283.8
申请日：2024-07-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种可溶性鸡源PML蛋白及其高效原核表达方法和应用，所述PML蛋白命名为PML‑P2，如SEQ ID NO:1所示。本发明筛选的蛋白PML‑P2不仅高效表达，其融合蛋白免疫小鼠产生的多抗血清，不仅能够与鸡源PML发生特异性反应，还能有效识别人、犬的细胞中内源性PML蛋白，表现出优异的广谱反应性，同时该多抗血清还能在免疫沉淀试验中高效地将外源高表达的鸡PML蛋白进行免疫沉淀。本发明表达载体构建及纯化的PML‑P2融合蛋白将为探究鸡源PML生物学功能及其在疾病中的作用提供有效的免疫学试剂，也为其他物种相关生物学研究提供了有效生物学材料。
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公开(公告)号：CN118879777A
公开(公告)日：2024-11-01
申请号：CN202410983164.4
申请日：2024-07-22
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9敲除鸡EphrinA2基因的细胞系的构建方法，包括如下步骤：设计特异性靶向鸡源EphrinA2基因的sgRNA；构建含有Cas9蛋白基因和特异性靶向鸡源EphrinA2基因的sgRNA的敲除质粒；对细胞进行转染，利用CRISPR‑Cas9系统达到基因沉默，随后通过亚克隆获得鸡源EphrinA2敲除细胞。本发明获得鸡源EphrinA2基因敲除的细胞模型，不仅方法成本低、效率高、简单易用，并且所构建的敲除鸡EphrinA2基因细胞系细胞活性显著降低，为解析EphrinA2在鸡体内中的功能作用及其在某些病毒入侵宿主中的作用与机制提供帮助。
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