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公开(公告)号：CN119101500A
公开(公告)日：2024-12-10
申请号：CN202310682568.5
申请日：2023-06-09
Applicant: 佳能医疗系统株式会社 , 南京大学
Abstract: 本发明涉及基于热激子有机发光分子的电化学发光(ECL)纳米探针、使用了该电化学发光纳米探针的传感器、检测方法及检测用试剂盒。所述电化学发光纳米探针的制备方法包含下述工序：热激子纳米颗粒合成工序，使热激子有机发光分子与共聚物分子聚合，合成热激子纳米颗粒；和热激子纳米颗粒修饰工序，使用具有淬灭剂分子修饰的寡核苷酸链对得到的热激子纳米颗粒进行修饰，得到经修饰的热激子纳米颗粒。通过本发明，能够提升电化学发光的整体效能，从而实现对目标分子的快速非扩增的高通量检测，并且具有较宽的检测范围和极高的灵敏度。
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公开(公告)号：CN117653601A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202211038377.7
申请日：2022-08-29
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种近红外二区光驱动的水凝胶纳米马达及其制备方法和应用。方法包括：制备Fe3O4@Cu9S8纳米粒子、水凝胶储备液和脂质体储备液；通过微流控芯片制得包裹水凝胶前聚体的纳米脂质体囊泡，Fe3O4@Cu9S8在磁场的引导下聚集到纳米囊泡的一端，紫外光引发丙烯酸酯基之间的自由基聚合反应，制得不对称结构的水凝胶纳米马达。本发明首次提出以近红外二区光作为驱动力的纳米马达，并将其作为药物载体，负载化疗药物到达肿瘤部位。近红外二区光照引起水凝胶纳米马达内部的温度梯度，产生自热泳现象驱动马达运动，解决被动运动粒子作为药物载体时药物分子在肿瘤部位渗透深度的局限性。
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公开(公告)号：CN114235773B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202010943933.X
申请日：2020-09-09
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/65
Abstract: 供了一种简单、灵敏的方法，也为膜孔修复相关本发明设计一种用于细胞膜修复过程动态 疾病的治疗提供了新的技术支撑。监测的拉曼成像方法。该方法用成孔蛋白SLO与二苄环辛基‑磺基‑N‑羟基琥珀酰亚胺酯(DBCO‑sulfo‑NHS ester)的反应产物SLO‑DBCO作为成孔单体，在活细胞膜上聚集成孔，再利用SLO‑DBCO与拉曼信标分子(对巯基苯甲酸)和叠氮‑聚乙二醇(PEG‑N3)共修饰的金纳米星探针之间的点击反应，将表面增强拉曼(SERS)探针聚集到膜孔周围产生SERS信号，实现膜孔的拉曼成像。在细胞膜修复过程中，膜孔逐渐变小，SLO及其偶联的SERS探针不断地从细胞表面脱落，使SERS信号(56)对比文件赵小雷.突变蛋白导向构筑三维等离激元石墨烯凝胶用于细胞SERS成像《.中国优秀硕士学位论文全文数据库 基础科学辑》.2019,(第7期),第A006-328页.俞允.电穿孔SERS技术及其在细胞检测筛查中的应用《.中国博士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》.2020,(第5期),第B014-79页.Yang, Yuanjiao等.A pore-formingprotein-induced surface-enhanced Ramanspectroscopic strategy for dynamictracing of cell membrane repair.《ISCIENCE》.2021,第24卷(第9期),第102980页.Sletten, Ellen M.等.Bioorthogonalchemistry: fishing for selectivity in asea of functionality《.ANGEWANDTE CHEMIE-INTERNATIONAL EDITION》.2009,第48卷(第38期),第6974-6998页.Qi, Guohua等.Living-Cell Imaging ofMitochondrial Membrane PotentialOscillation and Phenylalanine MetabolismModulation during PeriodicElectrostimulus《.ANALYTICAL CHEMISTRY》.2019,第91卷(第15期),第9571-9579页.Huang, Mengjia 等.Preparation of CS/PVA Nanofibrous Membrane with TunableMechanical Properties for Tympanic MemberRepair《.MACROMOLECULAR RESEARCH》.2018,第26卷(第10期),第892-899页.Orsolya Hakkel.MicrofluidicallyIntegrated SERS Active Cell Trap Arrayfor Sensitive Analysis of Red BloodCells《.2019 20th International Conferenceon Solid-State Sensors, Actuators andMicrosystems》.2019,第19007541页.林居强 等.基于表面增强拉曼散射技术的癌症检测研究进展《.激光与光电子学进展》.2013,(第08期),第080020页.俞允 等.银胶浓度对电穿孔获取细胞内表面增强拉曼光谱的影响《.生物化学与生物物理进展》.2011,第38卷(第10期),第961-966页.
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公开(公告)号：CN117402941A
公开(公告)日：2024-01-16
申请号：CN202210793469.X
申请日：2022-07-07
Applicant: 南京大学
IPC: C12Q1/6825 , C12Q1/682 , G01N21/76 , G01N27/327 , G01N27/416 , G01N21/77 , C08L65/00 , C08L35/06
Abstract: 本发明涉及一种热激活延迟荧光聚合物点(TADF Pdots)和DNA甲基化传感器的制备与电化学发光(ECL)检测方法。该方法以TADF聚合物为前驱体通过纳米沉淀法合成TADF Pdots，并用DNA偶连获得ECL探针；再将捕获DNA固定在电极表面，获得DNA甲基化传感器；最后执行甲基化DNA的ECL检测：1)通过DNA杂交反应在传感器表面捕获目标DNA，2)利用生物素化抗体识别目标DNA上的甲基化位点，3)利用链霉亲和素和生物素的识别将引物DNA键合到传感器表面，滚环扩增后生成具有重复DNA序列的DNA长链，4)将Pdots‑DNA探针键合到传感器表面，5)检测探针的ECL信号，获得甲基化目标DNA的工作曲线。本发明首次合成了具有高ECL效率的TADF Pdots，为甲基化DNA提供了一种灵敏、特异的ECL分析方法。
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公开(公告)号：CN117169494A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202210592343.6
申请日：2022-05-27
Applicant: 佳能医疗系统株式会社 , 南京大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/533 , G01N33/53 , G01N27/30 , G01N21/64
Abstract: 本发明涉及基于纳米信标的核酸特异位点修饰的电化学发光(ECL)检测方法、电化学发光(ECL)纳米信标及其制备方法以及试剂盒。所述电化学发光检测方法中使用了本发明所制备的电化学发光纳米信标，所述电化学发光纳米信标为二抗修饰了的金属掺杂无机氧化物纳米粒子，通过将包含电化学发光纳米信标和目标核酸的复合物置于电极表面，进行电化学发光检测，根据电化学发光信号有无和强度对目标核酸的修饰进行定性与定量分析。通过本发明的ECL检测方法，能够对核酸特异位点修饰、例如DNA的甲基化位点进行简单、灵敏、快速且通用的检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115975623A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202111219329.3
申请日：2021-10-15
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明涉及一种用于可视化误导细胞内唾液酸化的介孔硅探针。它以介孔二氧化硅纳米粒子为载体，表面同时修饰了半乳糖，叶酸和修饰有被黑洞猝灭剂1(BHQ1)猝灭的羧基荧光素(FAM)的功能双链DNA分子，内部装载有两端分别有苯硼酸和花菁5荧光素(Cy5)的功能单链DNA分子。当介孔硅探针通过其表面的叶酸介导的细胞内吞进入细胞内后，细胞内的唾液酸转移酶会以介孔硅探针表面的半乳糖为基底在连接上唾液酸，从介孔硅内部释放出来的功能单链DNA分子一端的Cy5的荧光用于示踪，另一端的苯硼酸会与连接的唾液酸特异性结合，并引发邻位链取代作用取代下功能双链DNA分子中修饰有BHQ1的单链，恢复FAM的荧光，实现细胞内唾液酸化的可视化误导。
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公开(公告)号：CN115598111A
公开(公告)日：2023-01-13
申请号：CN202110771111.2
申请日：2021-07-08
Applicant: 南京大学(CN)
IPC: G01N21/76 , G01N33/537 , G01N33/554
Abstract: 本发明涉及一种基于邻位诱导免疫分析的特异性杂交瘤细胞化学发光筛选方法。该化学发光筛选方法的检测溶液包括一对抗原‑DNA偶联物、双链DNA探针、模板DNA、脱氧核糖核苷三磷酸、核酸连接酶及聚合酶。分配在96孔板中的杂交瘤单细胞培育1天后，取其上清液与检测溶液反应，如为特异性杂交瘤细胞，上清液中会有其分泌的特异性抗体，通过免疫识别，可同时结合检测液中的抗原‑DNA偶联物对，继而基于邻位效应，引发核酸组装及滚环扩增反应，产生大量焦磷酸根离子(PPi)。PPi能络合辣根过氧化物酶‑Cu2+复合物(HRP‑Cu2+)中的Cu2+恢复HRP的活性。通过HRP催化产生的化学发光信号对分泌的特异性抗体进行定量分析并完成对特异性杂交瘤细胞的筛选。
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公开(公告)号：CN111705044B
公开(公告)日：2022-12-27
申请号：CN202010482177.5
申请日：2020-05-23
Applicant: 南京大学
IPC: C12N9/22
Abstract: 本发明涉及一种间位胞嘧啶增强并利用单碱基修饰技术进一步实现高催化活性G四链体DNA酶的构建。首先，在富含G碱基DNA序列的3’端修饰胞嘧啶及其衍生物，在含有100mM K离子的缓冲中，95℃退火5min，形成G四链体结构。然后将该G四链体与血红素混合，形成DNA酶。通过测试不同H2O2浓度下DNA酶的催化活性并利用米氏模型进行拟合、计算获得不同G四链体DNA酶的米氏常数。最终，当3’端间位碱基是氮杂胞苷时，其活性与天然蛋白酶HRP的活性达到同个数量级(kcat(F3T‑azaC)＝22.7s‑1)。该高活性G四链体DNA酶设计简单，制备快速，价格低廉，便于储存，具有一定的应用前景。
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公开(公告)号：CN114235773A
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202010943933.X
申请日：2020-09-09
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/65
Abstract: 本发明设计一种用于细胞膜修复过程动态监测的拉曼成像方法。该方法用成孔蛋白SLO与二苄环辛基‑磺基‑N‑羟基琥珀酰亚胺酯(DBCO‑sulfo‑NHS ester)的反应产物SLO‑DBCO作为成孔单体，在活细胞膜上聚集成孔，再利用SLO‑DBCO与拉曼信标分子(对巯基苯甲酸)和叠氮‑聚乙二醇(PEG‑N3)共修饰的金纳米星探针之间的点击反应，将表面增强拉曼(SERS)探针聚集到膜孔周围产生SERS信号，实现膜孔的拉曼成像。在细胞膜修复过程中，膜孔逐渐变小，SLO及其偶联的SERS探针不断地从细胞表面脱落，使SERS信号逐渐降低，直至膜孔完全修复，通过SERS信号的变化实现整个修复过程的动态监测。本发明为细胞膜修复过程的动态监测及其修复机制研究提供了一种简单、灵敏的方法，也为膜孔修复相关疾病的治疗提供了新的技术支撑。
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公开(公告)号：CN112451485B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202011420002.8
申请日：2020-12-07
Applicant: 南京大学
IPC: A61K9/107 , A61K41/00 , A61K47/34 , A61K31/704 , A61P35/00
Abstract: 本发明涉及一种短时间近红外光照响应的纳米胶束的制备方法及其在药物快速释放中的应用。该方法利用亲水性聚乙二醇以及疏水性供体受体Stenhouse加合物(DASA)形成两亲性聚合物链P‑DASA，制备了包覆有Er3+掺杂上转换纳米粒子(UCNPs)以及抗癌药物阿霉素的纳米胶束。在近红外光照下，UCNPs发射的绿光(541nm)促使疏水性的DASA转变为亲水性，导致胶束解体并释放阿霉素，仅仅5分钟的光照(808nm，2W/cm2)刺激后，药物在30min内达到80％以上的释放率。本发明提供了一种短时间光照激活的近红外光控药物释放体系，对于上转换纳米材料在药物载运以及癌症精准诊疗领域的临床应用和发展有着重要的意义。
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