一种精准抗体核酸定向连接方法

    公开(公告)号:CN112778426A

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN202110010916.5

    申请日:2021-01-06

    Abstract: 本发明公开了一种精准抗体核酸定向连接方法,包括以下步骤:(1)HUH类核酸内切酶与Protein G通过柔性Linker分子连接,获得融合蛋白;(2)合成单链DNA,其含有能被HUH类核酸内切酶识别的位点;(3)融合蛋白与单链DNA混合反应得蛋白核酸复合物;(4)蛋白核酸复合物与目标抗体混合,光照催化条件下反应实现目标抗体与单链DNA的定向连接;步骤(1)和(2)可互换;Protein G基因特定位点插入光诱导位点特异性交联的非天然氨基酸的密码子。该方法无需对抗体与核酸进行任何化学或功能修饰,不影响抗体识别抗原的能力以及核酸分子的性质与功能;且获得的抗体核酸复合物一个抗体上仅连有一个核酸分子。

    一种基于FRET的融合蛋白、荧光纳米颗粒及其应用

    公开(公告)号:CN111018997A

    公开(公告)日:2020-04-17

    申请号:CN201911187599.3

    申请日:2019-11-28

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于FRET的融合蛋白、荧光纳米颗粒及其应用。该融合蛋白包括病毒结构蛋白,所述病毒结构蛋白能自组装成病毒样颗粒;和能实现荧光共振能量转移的供体-受体对。本发明还提供一种病毒样荧光纳米颗粒由该融合蛋白组装得到,所述荧光纳米颗粒在提高FRET效率的同时,还极大提高了其作为荧光探针功能过程中的荧光信号输出量,在提高检测的灵敏度和稳定性的同时降低背景值提高信噪比;在应用时可直接与靶向性配体相连,可以保证荧光蛋白对的FRET效果,稳定性好,灵敏度高,使得实验结果误差减小,实验结果更贴近真实。

    一种基于荧光蛋白Venus的三片段荧光互补系统及应用

    公开(公告)号:CN109385450A

    公开(公告)日:2019-02-26

    申请号:CN201710650339.X

    申请日:2017-08-02

    Abstract: 本发明公开了一种基于荧光蛋白Venus的三片段荧光互补系统及应用,以荧光蛋白Venus为模板,分别在氨基酸154-155位以及172-173位将其拆分为不发荧光的三个片段VN154,VN(155-172)和VC173,当这三个片段分别与相互作用的三个蛋白相融合表达时,无荧光的三个片段就可以被拉近而激发产生Venus的荧光信号;由于Venus的三片段荧光互补系统具有高的互补荧光强度和生理温度条件下成熟的特性,因此,可以在生理温度条件下实现三个蛋白相互作用的成像研究。该系统为一种简单、有效、方便的研究三蛋白相互作用的系统。

    一种基于蛋白纳米线的3D探针-磁性微珠复合物及其应用

    公开(公告)号:CN105717287B

    公开(公告)日:2017-11-14

    申请号:CN201610051186.2

    申请日:2016-01-26

    CPC classification number: G01N33/543

    Abstract: 本发明提供一种基于蛋白纳米线的3D探针‑磁性微珠复合物,包括磁性微珠和蛋白纳米线,所述蛋白纳米线表面包括至少一种功能配体和至少一种连接配体,所述蛋白纳米线通过连接配体连接在磁性微珠表面。本发明利用纳米线较大的比表面积,展示在其上的配体形成3D高密度固定,一方面提高配体数量,利用高密度展示形成多价效应,提高特异性配体的结合力;另一方面通过自组装的方式实现抗原或抗体等分子的定向固定,最大程度的保留功能分子活性,减少常规化学交联的损伤,从而提高对样品中待测目标的捕获效率。复合物通过连接配体将蛋白纳米线与磁性微珠相连,利用磁性微珠快速分离的性质,减少检测时间,进而实现快速高通量的病原筛查或疾病检测。

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