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公开(公告)号：CN117487732A
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202311396829.3
申请日：2023-10-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种无质粒无缺陷型L‑亮氨酸生产菌株的构建，属于生物工程技术领域。本发明初步筛选了与大肠杆菌代谢相关性差异显著的基因，并对其进行过表达或敲除，结果显示通过敲除DNA结合转录激活因子tdcA可以实现L‑亮氨酸产量的提高。本发明成功构建一株L‑亮氨酸产量提高的工程菌株L18，5L发酵罐中培养48h后L‑亮氨酸产量提高至64g/L。本发明进一步突破L‑亮氨酸的产量瓶颈，促进L‑亮氨酸的工业化生产。
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公开(公告)号：CN117187126A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202311130419.4
申请日：2023-09-04
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/20 , C12N7/00 , C12N7/02 , C12P1/04 , A01N63/40 , A01P1/00 , A23K10/18 , A61K35/76 , A61P31/04 , C12R1/19 , C12R1/92
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌噬菌体JNUW3的分离以及抗JNUW3噬菌体大肠杆菌的开发，属于微生物技术领域。本发明筛选分离出来自污染发酵罐的噬菌体JNUW3，该噬菌体能够抑制多种大肠杆菌。本发明成功地筛选出一株具有噬菌体抗性的底盘细胞JNK4，与现有技术中的大肠杆菌相比，可以抵抗噬菌体JNUW3的感染；并且也可以抵御T7噬菌体，具有一定的广谱抗噬菌体特性。从根本上解决了发酵产物在生产中易受到噬菌体侵染导致发酵失败的难题，提高了发酵生产企业的经济效益。
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公开(公告)号：CN117143775A
公开(公告)日：2023-12-01
申请号：CN202311133852.3
申请日：2023-09-04
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/20 , C12N7/00 , C12N7/02 , C12P1/04 , A01N63/40 , A01P1/00 , A23K10/18 , A61K35/76 , A61P31/04 , C12R1/19 , C12R1/92
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌噬菌体JNUWH的分离以及抗JNUWH噬菌体大肠杆菌的开发，属于微生物技术领域。本发明成功地筛选出一株噬菌体JNUWH，所述噬菌体JNUWH能够防治大肠杆菌引起的传染病；所述噬菌体JNUWH能够裂解多种大肠杆菌。本发明成功地筛选出一株具有噬菌体抗性的底盘细胞KWH，与现有技术中的大肠杆菌O78:H11、BL21、W3110、MG1655、JM109相比，可以抵抗噬菌体JNUWH的感染；并且也可以抵御T1、T7噬菌体，具有一定的广谱抗噬菌体特性。
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公开(公告)号：CN107828768B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201711328978.0
申请日：2017-12-13
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/82 , C12N15/55 , C12N1/21 , C12N15/75 , A61K38/50 , A61P35/02 , A61P35/00 , A23L5/20 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种L‑天冬酰胺酶突变体及其构建方法，属于基因工程、酶工程领域。本发明的突变体是在SEQ ID N0.2所示的核苷酸的基础上，将其编码的第298位赖氨酸突变成亮氨酸。本发明得到的突变体在枯草芽孢杆菌中表达，通过镍柱亲和层析纯化目的蛋白，得到的突变体最适温度从95℃降低到85℃，最适pH从8降低到7，Km值从6.5降低到4.9，比酶活突变前后无变化。本发明表明298位赖氨酸残基对酶底物亲和性有较大影响，对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础，并提高了该酶的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN115895990A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202211073479.2
申请日：2022-09-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提升酱油品质的方法，属于酶工程及发酵工程技术领域。本发明将罗伊氏乳杆菌来源的耐盐谷氨酰胺酶在枯草芽孢杆菌中表达，并通过RBS序列调控，提高了耐盐谷氨酰胺酶在枯草芽孢杆菌中的表达量，相比对照提高了5.61倍。本发明还通过对重组枯草芽孢杆菌固定化后，将固定化酶或固定化细胞投入到高盐稀态酱油酿造中，有效提升酱油的氨基酸态氮，从0.783±0.003g/100ml提高到0.841±0.002g/100ml，谷氨酸含量从5.0152±0.048g/l提高到7.319±0.068g/l，为酱油生产提供了一种高效且经济的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111593038A
公开(公告)日：2020-08-28
申请号：CN202010584474.0
申请日：2020-06-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种稳定性提高的谷氨酰胺酶突变体，属于酶工程和微生物工程技术领域，本发明提供的谷氨酰胺酶突变体是将罗伊氏乳杆菌来源的谷氨酰胺酶亲本的第37位的酪氨酸突变为了半胱氨酸，谷氨酰胺酶突变体突变体在44℃时半衰期达到12h，其稳定性相对于突变前的谷氨酰胺酶提高了50％。
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公开(公告)号：CN115927273A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211073221.2
申请日：2022-09-02
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/80 , C12N15/55 , C12N15/75 , C12N1/21 , A23L27/50 , A23L33/17 , A61K8/66 , A61K38/50 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种稳定性提高的耐盐谷氨酰胺酶，属于酶工程技术领域。本发明通过计算机辅助的合理设计，筛选获得了在野生型谷氨酰胺酶的基础上将第105组氨酸突变为赖氨酸的突变体H105K。与野生酶相比，突变提H105K的热稳定性提高了247.36％，且酶的耐盐性能并没有明显的改变。本发明的突变体有助于拓宽谷氨酰胺酶在食品领域的应用范围。
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公开(公告)号：CN109266635B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201811384656.2
申请日：2018-11-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种L‑天冬酰胺酶突变体及其构建方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明在天然L‑天冬酰胺酶的基础上，通过定点突变生物技术改造L‑天冬酰胺酶分子结构，L‑天冬酰胺酶突变体的纯酶液酶活提高至2037.13U/mg，较原始酶酶活(约1483.81U/mg)相比提高了约37.3％。本发明表明第22位氨基酸残基对酶的催化作用有较大影响，对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础，并提高了该酶的在食品行业中的应用潜力。
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公开(公告)号：CN107828768A
公开(公告)日：2018-03-23
申请号：CN201711328978.0
申请日：2017-12-13
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/82 , C12N15/55 , C12N1/21 , C12N15/75 , A61K38/50 , A61P35/02 , A61P35/00 , A23L5/20 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种L-天冬酰胺酶突变体及其构建方法，属于基因工程、酶工程领域。本发明的突变体是在SEQ ID N0.2所示的核苷酸的基础上，将其编码的第298位赖氨酸突变成亮氨酸。本发明得到的突变体在枯草芽孢杆菌中表达，通过镍柱亲和层析纯化目的蛋白，得到的突变体最适温度从95℃降低到85℃，最适pH从8降低到7，Km值从6.5降低到4.9，比酶活突变前后无变化。本发明表明298位赖氨酸残基对酶底物亲和性有较大影响，对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础，并提高了该酶的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN117645967A
公开(公告)日：2024-03-05
申请号：CN202311607445.1
申请日：2023-11-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于高密度发酵产酶的枯草芽孢杆菌底盘细胞，属于基因工程和酶工程领域。本发明枯草芽孢杆菌168的基础上，通过敲除基因lytC、sigD、mraZ、sigE获得4株高鲁棒性且抵抗发酵后期自溶的底盘细胞BS1～BS4，以及一株组合敲除菌BS5作为底盘细胞。并构建表达载体pMA5‑glsA在构建的底盘细胞中表达L‑谷氨酰胺酶，其中BS5的5‑L发酵罐酶活为B.subtilis 168的1.98倍，且在细胞生物量增加的基础上单位细胞酶活也有增加。本发明中的底盘菌株比工业模式菌株更适用于工业生产，具有非常巨大的应用前景和产业价值。
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