公开(公告)号：CN102875682A

公开(公告)日：2013-01-16

申请号：CN201210386353.0

申请日：2012-10-12

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  罗燕 ,  秦爱建 ,  于恩琪 ,  张勇攀 ,  张笛 ,  杨振 ,  钱文正 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  单玉平

IPC: C07K16/42 ,  C12N5/20 ,  G01N33/577 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及一种以抗鹌鹑IgG单克隆抗体以及由其制备的试剂盒及检测方法。所述抗鹌鹑IgG单克隆抗体由杂交瘤细胞株CGMCC No.6655分泌。所述试剂盒包括：包被了不同抗原的酶标板，辣根过氧化物酶（HRP）标记抗鹌鹑IgG单克隆抗体，洗涤液，显色试剂。通过将待检血清样品与包被于酶标板上的抗原发生反应，用特异性的辣根过氧化物酶标记的抗鹌鹑IgG单克隆抗体作为二抗进行反应，最后加入底物进行显色反应，从而检出血清中是否产生针对不同包被抗原的抗体，进而判断检测鹌鹑群体是否感染过某些疾病以及对疫苗免疫效果进行评估。此方法简便，快速，可以检测鹌鹑血清中多种抗体，成本低廉，适合广泛推广应用。

公开(公告)号：CN118256446A

公开(公告)日：2024-06-28

申请号：CN202410446996.2

申请日：2024-04-15

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张鑫宇 ,  周雅维 ,  李颖 ,  周加陶 ,  夏晓莉 ,  单玉平

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12N15/34 ,  C12N7/00 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  C12R1/91 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种稳定表达非洲猪瘟病毒(ASFV)p30抗原的MA104‑p30细胞系及其构建方法和应用，属于基因工程领域，构建的细胞系不仅能用于ASFV抗体的检测，还可用于猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的病毒快速增殖。所述的细胞系构建时以慢病毒作为ASFV CP204L基因传递载体，通过药物筛选、细胞克隆，获得稳定表达ASFV p30抗原的MA104‑p30细胞系，可用于ASFV抗体的间接免疫荧光检测；除此之外，该MA104‑p30细胞系中PIAS1基因表达高于正常的MA104细胞系，可促进PRRSV的增殖，在猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗生产上有应用前景。

公开(公告)号：CN118006690A

公开(公告)日：2024-05-10

申请号：CN202410035165.6

申请日：2024-01-10

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  马陈淑 ,  周洪善 ,  朱亭帆 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  羊扬 ,  闫彩虹 ,  王倩倩 ,  刘金彪 ,  王建 ,  邓建中 ,  单玉平 ,  洪枫

IPC: C12N15/866 ,  A61K39/295 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明属于基因工程和疫苗开发技术领域，公开了三种猪致病性冠状病毒主要保护性蛋白串联表达载体的构建及应用，选取PEDV、PDCoV、TGEV的中和抗原表位基因，按一定顺序与pFastBacHTA昆虫表达载体连接，通过对不同位点的酶切及测序验证是否串联成功；而后通过重组杆状病毒真核表达系统对串联基因进行融合蛋白表达，以间接免疫荧光、Western Blot验证融合蛋白表达效果；将表达融合蛋白的重组病毒免疫小鼠并通过间接免疫荧光验证其免疫原性；并以串联重组病毒感染Sf9细胞后获得的病变细胞的破碎上清作为包被抗原，建立了针对三种冠状病毒主要保护性蛋白的ELISA检测方法。本发明为预防致猪腹泻的三种冠状病毒提供了一种行之有效的方法，为冠状病毒新型疫苗的开发提供了新思路。