公开(公告)号：CN115786369A

公开(公告)日：2023-03-14

申请号：CN202310005071.X

申请日：2023-01-04

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 付远辉 ,  何金生 ,  彭向雷 ,  郑妍鹏 ,  虞结梅

IPC: C12N15/45 ,  A61K39/155 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种编码呼吸道合胞病毒融合前融合糖蛋白(preF)、核蛋白(nucleoprot ein，N)和转录延长/转录终止抑制因子(M2‑1)的核苷酸序列、重组载体、疫苗及应用，属于疫苗制备技术领域。本发明利用RSV主要中和抗原preF、和可拓宽抗原T细胞表位的RSV病毒内部保守蛋白N和M2‑1的共表达，构建获得表达该抗原组合的RSV腺病毒载体；所述重组载体能够用于制备呼吸道合胞病毒疫苗，经滴鼻免疫及攻毒感染小鼠后，该RSV腺病毒载体疫苗免疫动物后可同时诱导产生针对preF、N和M2‑1的高效、持久的呼吸道黏膜局部的体液免疫、记忆性细胞免疫和记忆性固有免疫应答。

公开(公告)号：CN112226444A

公开(公告)日：2021-01-15

申请号：CN202010863762.X

申请日：2020-08-25

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  付远辉 ,  刘美琴 ,  彭向雷 ,  郑妍鹏 ,  黄蕾

IPC: C12N15/45 ,  C12N15/861 ,  A61K39/155 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种呼吸道合胞病毒全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列、重组腺病毒载体及其应用产品。该全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列包括S155C、S190F、V207L和S290C四个突变位点，保留了融合糖蛋白的跨膜区及胞内区，其序列表如序列1所示。还提供了一种含有全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列的猩猩复制缺陷型重组腺病毒载体pChAd63或人复制缺陷型重组腺病毒载体pAd26，腺病毒载体出发毒株为猩猩腺病毒63型或人腺病毒26型，缺失了腺病毒E1和E3区、且E4orf6替换为人5型腺病毒E4orf6。以及应用重组腺病毒的产品。本发明的重组腺病毒载体免疫动物后，能在短时间内诱导机体产生强烈的细胞免疫和体液免疫反应，产生的抗体对融合前F识别能力较强，具有较好的免疫效果和免疫保护作用。

公开(公告)号：CN107384958B

公开(公告)日：2020-04-10

申请号：CN201710574632.2

申请日：2017-07-14

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  彭向雷 ,  许敏 ,  付远辉

IPC: C12N15/85 ,  C12N7/00 ,  A61K39/155 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开基于反向遗传学构建的RSV反基因组质粒，所述RSV反基因组质粒为如序列表SEQ ID No.1所示的质粒pBRB‑RSV‑rLong/A2cp、如序列表SEQ ID No.2所示的质粒pBRB‑RSV‑rLong/A2cpts或如序列表SEQ ID No.3所示的质粒pBRB‑RSV‑rLong/A2cptsΔSH。本发明构建的重组质粒经拯救获得的重组RSV病毒具有明显的减毒效果，可用于制备RSV减毒活疫苗。

公开(公告)号：CN108276323A

公开(公告)日：2018-07-13

申请号：CN201810109813.2

申请日：2018-02-05

Applicant: 北京交通大学 ,  中国医学科学院医药生物技术研究所

Inventor： 何金生 ,  王玉成 ,  付远辉 ,  张国宁 ,  徐竹欣 ,  李强 ,  郑妍鹏 ,  王菊仙 ,  彭向雷 ,  白晓光

IPC: C07D209/30 ,  C07D471/04 ,  C07D209/40 ,  C07D333/64 ,  A61K31/404 ,  A61K31/381 ,  A61K31/437 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了一类3-位官能团化的N(O,S)-杂茚类衍生物及其在抗呼吸道合胞病毒中的应用。其结构为：其中：n为0或1；X表示碳原子或氮原子；Y表示NH、NMe、氧原子或硫原子；Z表示NH、氧原子、硫原子、亚砜基或砜基；当Z为硫原子、亚砜基或砜基时：R1表示C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素、硝基、氨基或羟基；R2表示H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素、硝基、氨基或羟基；R1与R2相同或不同；所述R1和R2各自为1个或2个；当Z为NH或氧原子时：R1、R2表示H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素、硝基、氨基或羟基；R1与R2相同或不同；所述R1和R2各自为1个或2个。本发明研究发现该类衍生物具有较强的抗呼吸道合胞病毒活性，有望开发成为临床有效的抗病毒药物。

公开(公告)号：CN102719443B

公开(公告)日：2014-05-07

申请号：CN201210133385.X

申请日：2012-04-28

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 张莹 ,  何金生 ,  张娜 ,  洪涛

IPC: C12N15/13 ,  C07K16/18 ,  C12N5/20 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  A61K39/395 ,  A61K48/00 ,  A61P25/28

Abstract: 本发明公开了一种羧基末端特异的抗人淀粉样蛋白单克隆抗体基因和其编码多肽及应用，所述基因包括重链可变区基因和轻链可变区基因，其中，所述重链可变区基因的序列如SEQ？ID？N0：1所示，所述轻链可变区基因的序列如SEQ？ID？N0：3所示。根据本发明的基因，由于能够特异性识别Aβ42寡聚体而区分只相差2个氨基酸的Aβ40和Aβ42寡聚体，在免疫治疗实验中，可以避免与Aβ40结合，从而降低非特异性识别引起的副反应；根据该基因编码所得的多肽为淀粉样蛋白羧基末端多肽，免疫效果好，小鼠免疫血清效价高，并且其抗原识别能力具有构象特征，可以用于AD早期诊断。

公开(公告)号：CN101531717B

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN200910082077.7

申请日：2009-04-22

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  张莹 ,  王鑫 ,  洪涛

IPC: C07K16/18 ,  G01N33/577 ,  A61K39/395 ,  A61P25/28

Abstract: 本发明提供了一种抗阿尔茨海默病单克隆抗体，能够特异性识别和结合Aβ寡聚体，可用于制备阿尔茨海默病的诊断试剂和治疗药物。

公开(公告)号：CN102199198A

公开(公告)日：2011-09-28

申请号：CN201110075335.6

申请日：2011-03-28

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  郑妍鹏 ,  唐亚宁 ,  付远辉

IPC: C07K14/135 ,  C07K1/18 ,  C07K1/16

Abstract: 本发明公开了一种人呼吸道合胞病毒F蛋白的纯化方法。该方法通过以RSV感染HEp-2细胞或Vero细胞，待细胞出现完全病变后，收获细胞及培养基，离心，取上清，PEG6000沉淀，获得的沉淀物经溶解后通过蔗糖密度梯度离心进一步纯化，纯化的病毒经裂解液溶解包膜蛋白后，蛋白粗提溶液依次经过离子交换层析和凝胶过滤层析对F蛋白进行纯化。经过两步层析可以得到高度纯化的F蛋白，且在纯化过程中保持了F蛋白的抗原性，纯化的F蛋白仍然能被一组单克隆抗体检测到。

公开(公告)号：CN114195867B

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202111536309.9

申请日：2021-12-15

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 付远辉 ,  何金生 ,  郑妍鹏 ,  彭向雷 ,  虞结梅

IPC: C07K14/135 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  A61K39/155 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种RSV融合前F蛋白、表达质粒、稳定表达融合前F蛋白的细胞株和RSV疫苗组合物，涉及生物医药技术领域。本发明在融合前F蛋白基础上引入N70Q突变位点，消除该糖基化位点并增强免疫原性，并以GCN4基序替换跨膜区和胞内区形成稳定的分泌型三聚体从而获得分泌型三聚体化的融合前F蛋白(NQ)。本发明利用真核表达的方法，成功构建了稳定表达所述融合前F蛋白NQ的CHO细胞系，将表达的NQ和佐剂(Al(OH)3+CpG‑X1)组合后，制备疫苗组合物。本发明所述疫苗组合物可诱导产生Th1/Th2平衡免疫应答、高滴度的中和抗体，以及细胞免疫，为研制RSV亚单位疫苗奠定基础。

公开(公告)号：CN115969966A

公开(公告)日：2023-04-18

申请号：CN202310005068.8

申请日：2023-01-04

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 付远辉 ,  何金生 ,  彭向雷 ,  郑妍鹏 ,  虞结梅

IPC: A61K39/155 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种针对呼吸道合胞病毒感染的免疫物组合物及其应用，属于疫苗制备技术领域。本发明通过将呼吸道合胞病毒减毒株和呼吸道合胞病毒复制缺陷型腺病毒载体分别与呼吸道合胞病毒病毒融合前融合糖蛋白进行组合，用于诱导针对呼吸道合胞病毒感染的保护性免疫，提供针对呼吸道合胞病毒感染的保护性免疫的方法。

公开(公告)号：CN110054668A

公开(公告)日：2019-07-26

申请号：CN201910337141.5

申请日：2019-04-25

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  马尧 ,  付远辉 ,  彭向雷 ,  郑妍鹏

IPC: C07K14/135 ,  C12N15/45 ,  G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  C07K16/10 ,  A61K39/155 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种呼吸道合胞病毒融合前F蛋白及其应用，属于呼吸道合胞病毒疫苗技术领域。该融合前F蛋白是野生型F蛋白的第106位、第108位及第109位氨基酸由Arg突变为Asn后，第104位氨基酸由Asn突变为Cys、第155位氨基酸由Ser突变为Cys，或者第58位氨基酸由Thr突变为Cys、第190位氨基酸由Ser突变为Cys。本发明突变野生型F蛋白的第一个弗林酶切割位点，使Pre-F的结构更加稳定，表达量没有下降且M1-F在293T细胞中表达的融合前表位显著提高；对F蛋白氨基酸位点的第二次突变，使其形成二硫键，与野生型相比具有更稳定的融合前表位，适用于人RSV的其他病毒株；适用于以RSV F蛋白为抗原的各种疫苗形式，如：核酸疫苗、蛋白疫苗、载体疫苗及重组病毒颗粒疫苗。