一种抗呼吸道合胞病毒药物的高通量筛选方法和应用

    公开(公告)号:CN107058359A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710244050.8

    申请日:2017-04-14

    CPC classification number: C12N15/63 C12N7/00 C12N2760/18521 C12Q1/70

    Abstract: 本发明公开一种重组RSV反基因组质粒rRSV‑EGFP,其序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了由上述质粒经拯救获得的重组RSV以及其在筛选抗RSV药物中的应用。本发明筛选抗RSV药物的高通量筛选方法,包括:接种宿主细胞,加入重组RSV和待筛选药物;检测GFP荧光强度;评价待筛选药物的抗RSV效果。本发明利用表达绿色荧光蛋白的重组RSV与宿主细胞和待筛选化合物相互作用,由于绿色荧光蛋白的表达水平与病毒复制水平密切相关可以通过检查荧光强度分析化合物的抗病毒作用,进而建立针对RSV的高通量药物筛选模型,进行大规模的药物筛选,为抗RSV药物的研发奠定基础。

    呼吸道合胞病毒全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列、重组腺病毒载体及其应用产品

    公开(公告)号:CN112226444B

    公开(公告)日:2022-11-04

    申请号:CN202010863762.X

    申请日:2020-08-25

    Abstract: 本发明提供了一种呼吸道合胞病毒全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列、重组腺病毒载体及其应用产品。该全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列包括S155C、S190F、V207L和S290C四个突变位点,保留了融合糖蛋白的跨膜区及胞内区,其序列表如序列1所示。还提供了一种含有全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列的猩猩复制缺陷型重组腺病毒载体pChAd63或人复制缺陷型重组腺病毒载体pAd26,腺病毒载体出发毒株为猩猩腺病毒63型或人腺病毒26型,缺失了腺病毒E1和E3区、且E4orf6替换为人5型腺病毒E4orf6。以及应用重组腺病毒的产品。本发明的重组腺病毒载体免疫动物后,能在短时间内诱导机体产生强烈的细胞免疫和体液免疫反应,产生的抗体对融合前F识别能力较强,具有较好的免疫效果和免疫保护作用。

    一种RSV融合前F蛋白、表达质粒、细胞株和RSV疫苗组合物

    公开(公告)号:CN114195867A

    公开(公告)日:2022-03-18

    申请号:CN202111536309.9

    申请日:2021-12-15

    Abstract: 本发明提供了一种RSV融合前F蛋白、表达质粒、稳定表达融合前F蛋白的细胞株和RSV疫苗组合物,涉及生物医药技术领域。本发明在融合前F蛋白基础上引入N70Q突变位点,消除该糖基化位点并增强免疫原性,并以GCN4基序替换跨膜区和胞内区形成稳定的分泌型三聚体从而获得分泌型三聚体化的融合前F蛋白(NQ)。本发明利用真核表达的方法,成功构建了稳定表达所述融合前F蛋白NQ的CHO细胞系,将表达的NQ和佐剂(Al(OH)3+CpG‑X1)组合后,制备疫苗组合物。本发明所述疫苗组合物可诱导产生Th1/Th2平衡免疫应答、高滴度的中和抗体,以及细胞免疫,为研制RSV亚单位疫苗奠定基础。

    一种针对呼吸道合胞病毒感染的组合疫苗

    公开(公告)号:CN112220921A

    公开(公告)日:2021-01-15

    申请号:CN202010863764.9

    申请日:2020-08-25

    Abstract: 本发明提供了一种针对呼吸道合胞病毒感染的组合疫苗。包括:第一组合物,其包含免疫有效剂量的人26型复制缺陷型腺病毒载体和药学上可以接受的载体,人26型复制缺陷型腺病毒载体包含编码呼吸道合胞病毒的抗原蛋白的核苷酸;第二组合物,包含免疫有效剂量的猩猩63型复制缺陷型腺病毒载体和药学上可以接受的载体,猩猩63型复制缺陷型腺病毒载体包含编码呼吸道合胞病毒的抗原蛋白的核苷酸。第一组合物为初免组合物,第二组合物为加强组合物;或者,第一组合物为加强组合物,第二组合物为初免组合物。本发明的组合疫苗用于诱导针对呼吸道合胞病毒感染的保护性免疫,提供针对呼吸道合胞病毒感染的保护性免疫的组合物、疫苗和方法。

    基于RNA聚合酶Ⅰ的RSV微型复制基因组及其应用

    公开(公告)号:CN105200069A

    公开(公告)日:2015-12-30

    申请号:CN201510673911.5

    申请日:2015-10-16

    Abstract: 本发明公开一种基于RNA聚合酶Ⅰ的RSV微型复制基因组及其应用,该微型复制基因组包含RNA聚合酶Ⅰ启动子和终止子、Gaussia荧光素酶(Gaussia luciferase,Gluc)报告基因、RSV前导序列(Leader region/genomic promotor)、转录起始信号(Gene start signal,GS)、转录终止信号(Gene end signal,GE)和尾随序列(Trailer region/antigenomic promoter)等顺式作用元件(Cis-acting elements);包含RSV微型复制基因组的pHM-RSV-Gluc表达载体,其包括基于RNA聚合酶Ⅰ的RSV微型复制基因组和pHM载体序列;利用所述筛选抗RSV化合物的方法,该方法包括如下步骤:接种宿主细胞,并加入RSV病毒和待筛选化合物;转染所述pHM-RSV-Gluc质粒到宿主细胞;检测Gaussia荧光素酶信号强度;评价待筛选化合物的抗RSV病毒的效果,通过该方法可对抗RSV的药物进行高通量筛选。

    一种RSV融合前F蛋白、表达质粒、细胞株和RSV疫苗组合物

    公开(公告)号:CN114195867B

    公开(公告)日:2024-05-03

    申请号:CN202111536309.9

    申请日:2021-12-15

    Abstract: 本发明提供了一种RSV融合前F蛋白、表达质粒、稳定表达融合前F蛋白的细胞株和RSV疫苗组合物,涉及生物医药技术领域。本发明在融合前F蛋白基础上引入N70Q突变位点,消除该糖基化位点并增强免疫原性,并以GCN4基序替换跨膜区和胞内区形成稳定的分泌型三聚体从而获得分泌型三聚体化的融合前F蛋白(NQ)。本发明利用真核表达的方法,成功构建了稳定表达所述融合前F蛋白NQ的CHO细胞系,将表达的NQ和佐剂(Al(OH)3+CpG‑X1)组合后,制备疫苗组合物。本发明所述疫苗组合物可诱导产生Th1/Th2平衡免疫应答、高滴度的中和抗体,以及细胞免疫,为研制RSV亚单位疫苗奠定基础。

Patent Agency Ranking