公开(公告)号：CN107384958B

公开(公告)日：2020-04-10

申请号：CN201710574632.2

申请日：2017-07-14

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  彭向雷 ,  许敏 ,  付远辉

IPC: C12N15/85 ,  C12N7/00 ,  A61K39/155 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开基于反向遗传学构建的RSV反基因组质粒，所述RSV反基因组质粒为如序列表SEQ ID No.1所示的质粒pBRB‑RSV‑rLong/A2cp、如序列表SEQ ID No.2所示的质粒pBRB‑RSV‑rLong/A2cpts或如序列表SEQ ID No.3所示的质粒pBRB‑RSV‑rLong/A2cptsΔSH。本发明构建的重组质粒经拯救获得的重组RSV病毒具有明显的减毒效果，可用于制备RSV减毒活疫苗。

公开(公告)号：CN107058359B

公开(公告)日：2019-08-13

申请号：CN201710244050.8

申请日：2017-04-14

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  付远辉 ,  彭向雷 ,  郑妍鹏 ,  姜男 ,  许敏

IPC: C12N15/63 ,  C12N7/01 ,  C12Q1/70

Abstract: 本发明公开一种重组RSV反基因组质粒rRSV‑EGFP，其序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了由上述质粒经拯救获得的重组RSV以及其在筛选抗RSV药物中的应用。本发明筛选抗RSV药物的高通量筛选方法，包括：接种宿主细胞，加入重组RSV和待筛选药物；检测GFP荧光强度；评价待筛选药物的抗RSV效果。本发明利用表达绿色荧光蛋白的重组RSV与宿主细胞和待筛选化合物相互作用，由于绿色荧光蛋白的表达水平与病毒复制水平密切相关可以通过检查荧光强度分析化合物的抗病毒作用，进而建立针对RSV的高通量药物筛选模型，进行大规模的药物筛选，为抗RSV药物的研发奠定基础。

公开(公告)号：CN107384958A

公开(公告)日：2017-11-24

申请号：CN201710574632.2

申请日：2017-07-14

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  彭向雷 ,  许敏 ,  付远辉

IPC: C12N15/85 ,  C12N7/00 ,  A61K39/155 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开基于反向遗传学构建的RSV反基因组质粒，所述RSV反基因组质粒为如序列表SEQ ID No.1所示的质粒pBRB-RSV-rLong/A2cp、如序列表SEQ ID No.2所示的质粒pBRB-RSV-rLong/A2cpts或如序列表SEQ ID No.3所示的质粒pBRB-RSV-rLong/A2cptsΔSH。本发明构建的重组质粒经拯救获得的重组RSV病毒具有明显的减毒效果，可用于制备RSV减毒活疫苗。

公开(公告)号：CN104140363B

公开(公告)日：2016-12-28

申请号：CN201310169084.7

申请日：2013-05-09

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 肖维康 ,  何志群 ,  许敏 ,  吴楠

IPC: C07C41/30 ,  C07C43/23

Abstract: 本发明涉及一种单羟基取代苯并菲的制备方法。制备所说的单羟基取代苯并菲的主要步骤是：适当温度下，在硝基甲烷、二氯甲烷或硝基甲烷-二氯甲烷混合溶剂中，邻二烷氧基苯与三氯化铁按适当比例，搅拌反应2～24小时，之后加入甲醇终止反应，水洗2～3次，再用饱和食盐水洗1～2次，收集水相后用二氯甲烷萃取，合并有机相再用无水硫酸钠干燥、浓缩，再经柱层析分离提纯、干燥即得目标物。所说的制备方法不仅操作简便、原料廉价、目标物易分离提纯，而且产率最高可达65%及以上。

公开(公告)号：CN107058359A

公开(公告)日：2017-08-18

申请号：CN201710244050.8

申请日：2017-04-14

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  付远辉 ,  彭向雷 ,  郑妍鹏 ,  姜男 ,  许敏

IPC: C12N15/63 ,  C12N7/01 ,  C12Q1/70

CPC classification number: C12N15/63 ,  C12N7/00 ,  C12N2760/18521 ,  C12Q1/70

Abstract: 本发明公开一种重组RSV反基因组质粒rRSV‑EGFP，其序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了由上述质粒经拯救获得的重组RSV以及其在筛选抗RSV药物中的应用。本发明筛选抗RSV药物的高通量筛选方法，包括：接种宿主细胞，加入重组RSV和待筛选药物；检测GFP荧光强度；评价待筛选药物的抗RSV效果。本发明利用表达绿色荧光蛋白的重组RSV与宿主细胞和待筛选化合物相互作用，由于绿色荧光蛋白的表达水平与病毒复制水平密切相关可以通过检查荧光强度分析化合物的抗病毒作用，进而建立针对RSV的高通量药物筛选模型，进行大规模的药物筛选，为抗RSV药物的研发奠定基础。

公开(公告)号：CN104140363A

公开(公告)日：2014-11-12

申请号：CN201310169084.7

申请日：2013-05-09

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 肖维康 ,  何志群 ,  许敏 ,  吴楠

IPC: C07C41/30 ,  C07C43/23

CPC classification number: C07C41/30 ,  C07C43/23

Abstract: 本发明涉及一种单羟基取代苯并菲的制备方法。制备所说的单羟基取代苯并菲的主要步骤是：适当温度下，在硝基甲烷、二氯甲烷或硝基甲烷-二氯甲烷混合溶剂中，邻二烷氧基苯与三氯化铁按适当比例，搅拌反应2～24小时，之后加入甲醇终止反应，水洗2～3次，再用饱和食盐水洗1～2次，收集水相后用二氯甲烷萃取，合并有机相再用无水硫酸钠干燥、浓缩，再经柱层析分离提纯、干燥即得目标物。所说的制备方法不仅操作简便、原料廉价、目标物易分离提纯，而且产率最高可达65%及以上。