一种同时制备D-脯氨酸和L-1-吡咯啉-5-羧酸的生物法

    公开(公告)号:CN111424060A

    公开(公告)日:2020-07-17

    申请号:CN202010235113.5

    申请日:2020-03-30

    Abstract: 本发明公开了一种同时制备D-脯氨酸和L-1-吡咯啉-5-羧酸的生物法。该方法以解木糖赖氨酸芽孢杆菌XX-40为发酵菌株,DL-脯氨酸为发酵前体。该菌株首先利用DL-脯氨酸中的部分L-脯氨酸生长并诱导产生L-脯氨酸脱氢酶,剩余L-脯氨酸在L-脯氨酸脱氢酶作用下转化为L-1-吡咯啉-5-羧酸,D-脯氨酸完全保留。发酵液中的细胞不经分离,直接或分批添加DL-脯氨酸,利用胞内L-脯氨酸脱氢酶将其中的L-脯氨酸转化为L-1-吡咯啉-5-羧酸。采用本发明中的发酵/转化级联方式,发酵液中D-脯氨酸浓度达到20g/L,ee>99%,发酵液中L-1-吡咯啉-5-羧酸浓度达到16g/L,产率达到40%。本发明提供的方法工艺简单,环境友好,适合D-脯氨酸和L-1-吡咯啉-5-羧酸的工业化生产。

    类产碱假单胞菌株及其在制备西他列汀中间体中的应用

    公开(公告)号:CN105274027B

    公开(公告)日:2018-06-05

    申请号:CN201510753925.8

    申请日:2015-11-05

    Abstract: 本发明公开了一种类产碱假单胞菌株及其在制备西他列汀中间体中的应用,类产碱假单胞菌XW‑40菌落表面形态扁平,圆形,边缘光滑整齐,呈潮湿状,颜色呈乳白色,不透明,菌落直径约为1.9mm。该菌株能够有效催化4‑氧‑4‑[3‑(三氟甲基)‑5,6‑二氢[1,2,4]三唑并[4,3‑a]‑吡嗪‑7(8H)‑基]‑1‑(2,4,5)‑三氟苯基)丁‑2‑酮还原为西他列汀手性中间体,在最适反应条件下能耐受10g/L的高底物浓度,且仍保持高选择性,底物抑制作用较弱,可实现高底物浓度的生物催化。该菌体还能够循环使用,与分批补料相比,同时去除了底物与产物对细胞的抑制作用,使菌体的催化活性达到最大限度的利用。

    一种制备D-酪氨酸的化学-酶法

    公开(公告)号:CN102352392A

    公开(公告)日:2012-02-15

    申请号:CN201110292491.8

    申请日:2011-09-29

    Inventor: 夏仕文 方国兰

    Abstract: 本发明提供一种制备D-酪氨酸的化学-酶法。该方法以DL-酪氨酸为原料,在酸性介质中利用酰化剂衍生为DL-N-苯乙酰酪氨酸,以固定化青霉素酰化酶为生物催化剂,对映选择性水解为L-酪氨酸、苯乙酸和D-N-苯乙酰酪氨酸。D-N-苯乙酰酪氨酸酸解为苯乙酸和D-酪氨酸。D-酪氨酸收率为40%,对映体过量>99%。本发明提出的方法具有收率和光学纯度高,过程简单等特点,适合D-酪氨酸的规模化生产。

    解木糖赖氨酸芽孢杆菌内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN117431226A

    公开(公告)日:2024-01-23

    申请号:CN202311496085.2

    申请日:2023-11-10

    Inventor: 夏仕文 黄文薪

    Abstract: 本发明公开了一种源于解木糖赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus xylanilyticus)的内消旋‑二氨基庚二酸脱氢酶(LxDAPDH)突变体及其应用,属于生物工程技术领域。该突变体是将解木糖赖氨酸芽孢杆菌内消旋‑二氨基庚二酸脱氢酶的第94位天冬氨酸氨酸突变为丙氨酸。以大肠杆菌BL21为宿主,突变体LxDAPDHD94A基因和源于巨大芽孢杆菌的葡萄糖脱氢酶(BmGDH)基因采用同源重组技术共表达。以共表达菌株的全细胞为生物催化剂,4‑溴苯丙酮酸和氯化铵为底物,葡萄糖为辅底物制备4‑溴‑D‑苯丙氨酸。4‑溴苯丙酮酸的转化率为95%。D‑4‑溴苯丙氨酸的分离收率为80%,ee>99%。

    一种制备D-碱性氨基酸盐酸盐的化学-酶法

    公开(公告)号:CN102392061A

    公开(公告)日:2012-03-28

    申请号:CN201110292208.1

    申请日:2011-09-29

    Inventor: 夏仕文 方国兰

    Abstract: 本发明提供一种制备D-碱性氨基酸盐酸盐的化学-酶法。该方法以DL-碱性氨基酸为原料,利用酰化剂衍生为DL-N-二苯乙酰碱性氨基酸,以固定化青霉素酰化酶为生物催化剂,通过非立体选择性和对映选择性水解为L-碱性氨基酸、苯乙酸和D-α-N-苯乙酰碱性氨基酸。D-α-N-苯乙酰碱性氨基酸酸解为苯乙酸和D-碱性氨基酸二盐酸盐,并进一步采用环氧丙烷处理为D-碱性氨基酸盐酸盐。利用该方法制备的D-赖氨酸盐酸盐和D-鸟氨酸盐酸盐收率>40%,ee>99%。本发明提出的方法具有收率和光学纯度高,过程简单等特点,适合D-碱性氨基酸盐酸盐的规模化生产。

    一种制备D-丝氨酸的化学-酶法

    公开(公告)号:CN102321695A

    公开(公告)日:2012-01-18

    申请号:CN201110292205.8

    申请日:2011-09-29

    Inventor: 夏仕文 方国兰

    Abstract: 本发明提供一种制备D-丝氨酸的化学-酶法。该方法以DL-丝氨酸为原料,利用酰化剂衍生为DL-N-苯乙酰丝氨酸。以固定化青霉素酰化酶为生物催化剂,在水介质中对映选择性催化DL-N-苯乙酰丝氨酸水解为L-丝氨酸、苯乙酸和D-N-苯乙酰丝氨酸。利用金属络合、等电点结晶的方法,分离得到光学纯D-苯乙酰丝氨酸。D-N-苯乙酰丝氨酸经酸解、浓缩、结晶可得D-丝氨酸。D-丝氨酸收率为45%,ee99.6%。本发明提出的方法具有收率、化学纯度和光学纯度高,环境友好的特点,适合D-丝氨酸的规模化生产。

    一种非天然L-氨基酸的生物催化去消旋化制备方法

    公开(公告)号:CN102174632A

    公开(公告)日:2011-09-07

    申请号:CN200910103883.8

    申请日:2009-05-19

    Abstract: 本发明提供一种非天然L-氨基酸的生物催化去消旋化制备方法。该方法以具有高对映选择性的固定化D-氨基酸氧化酶为生物催化剂,在分子氧存在下催化化学合成的DL-氨基酸中的D-对映体氧化为亚氨基酸,L-氨基酸保留。以Pd-C为催化剂,HCOONH4为氢供体通过化学催化氢转移反应将形成的亚氨基酸原位转化为DL-氨基酸,实现DL-氨基酸向L-氨基酸的连续转化。反应过程中产生的过氧化氢利用过氧化氢酶原位高效分解为水和分子氧。方法用于制备手性药物中间体L-2-氨基丁酸、L-2-氨基戊酸、L-2-氨基己二酸、L-叔亮氨酸、L-环己基甘氨酸、L-邻氯苯甘氨酸、L-对氟苯甘氨酸、L-2-氨基-4-苯基丁酸、L-哌啶-2-羧酸、L-哌嗪-2-羧酸,收率75-95%,ee>99%。

    一种解木糖赖氨酸芽孢杆菌及其制备α-酮酸的方法

    公开(公告)号:CN105316257B

    公开(公告)日:2018-10-12

    申请号:CN201510697875.6

    申请日:2015-10-23

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种解木糖赖氨酸芽孢杆菌及其制备α‑酮酸的方法。本发明公开的菌株为解木糖赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus xylanilyticus)XX‑2,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC No:M2015520。以解木聚糖类赖氨酸芽孢杆菌XX2全细胞为生物催化剂,利用其中的L‑氨基酸氧化酶在空气存在下将L‑氨基酸氧化脱氨为相应的α‑酮酸、氨气及过氧化氢,并利用细胞中共表达的过氧化氢酶原位分解产生的过氧化氢。本发明的方法克服了化学合成法和发酵法制备α‑酮酸的不足,具有反应条件温、环境友好、成本低廉、产物谱宽广等优点,适合α‑酮酸的工业化生产。

    可控粒径高纯碳酸锶的制备方法

    公开(公告)号:CN104016396B

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201410301701.9

    申请日:2014-06-27

    Abstract: 本发明公开了可控粒径高纯碳酸锶的制备方法,包括以下步骤:首先配置质量浓度4-6%的硝酸铵溶液和质量浓度为13-16%的氢氧化锶溶液,然后向反应釜添加一定量的硝酸铵溶液,并密闭搅拌,接着向反应装置流加氢氧化锶溶液和二氧化碳于0.01~0.3MPa,30~60℃充分反应,控制氢氧化锶和二氧化碳的加入量使反应液的pH值维持在7~10,最后分离干燥得产品。本发明利用氢氧化锶和二氧化碳作为制备碳酸锶的原材料,反应过程中不产生铵盐,避免了对环境的污染;本发明可通过控制反应前加入低浓度的硝酸铵的量、反应压力、pH值和反应温度,制备所需要粒径的高纯碳酸锶。

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