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公开(公告)号:CN116121451A
公开(公告)日:2023-05-16
申请号:CN202211383579.5
申请日:2022-11-07
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征通用型RT‑RAA荧光型检测方法。涉及的引物序列为:正向引物(5’‑3’):ATGCCAAATAACAACGGCAAGC;反向引物(5’‑3’):GCAAACTAAACTCCACAGTGTAACTTAT;探针(5’‑3’):CAGCCAGTCAATCAGCTGTGCCAAATGC(TexRd)G(THF)G(BHQ2)AAGATCATCGCC‑C3Spacer。利用本发明设计的引物,RNA通过转录成cDNA后,重组酶聚合酶介导的恒温扩增技术(RAA)扩增目标产物,并结合荧光定量PCR仪检测目标产物,可以实现PRRSV的快速、准确检测。利用上述引物,若待测样品存在PRRSV,则检测样品出现扩增曲线,若待测样品不存在PRRSV,检测样品不起峰;本发明方法操作快速,具有特异性强,灵敏度高等特点。
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公开(公告)号:CN110794148A
公开(公告)日:2020-02-14
申请号:CN201911076215.0
申请日:2019-11-06
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了猪炎症小体NLRP3的双抗夹心ELISA定量检测试剂盒及其应用,双抗夹心ELISA定量检测试剂盒通过在固相载体上包被生物保藏号为CCTCC NO:C201973的杂交瘤细胞株9H5分泌的单克隆抗体,通过检测抗体、底物显色和标准曲线实现定量检测,实现快速检测猪炎症小体NLRP3,并且该试剂盒具有灵敏度高的优点,稳定性好,弥补了现有市场猪炎症小体NLRP3检测的空缺。
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公开(公告)号:CN110759988A
公开(公告)日:2020-02-07
申请号:CN201911075811.7
申请日:2019-11-06
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明公开了猪NLRP3的抗原结构蛋白和猪NLRP3单克隆抗体及其制备方法和应用,猪NLRP3的抗原结构蛋白具有很好的免疫原性,作为抗原免疫小鼠,通过细胞融合后以IFA筛选杂交瘤细胞,筛选获得7株分泌NLRP3单克隆抗体细胞株,分别将单克隆抗体进行纯化,获得猪NLRP3单克隆抗体;其中,9H5杂交瘤细胞株NLRP3稳定性最好,所分泌的单抗效价最高、特异性最强,其生物保藏号为CCTCC NO:C201973。本发明进一步提供了杂交瘤细胞株猪NLRP3以及所分泌的单克隆抗体在检测或纯化NLRP3蛋白中的应用。
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公开(公告)号:CN116219068A
公开(公告)日:2023-06-06
申请号:CN202211390927.1
申请日:2022-11-07
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及基于NSP2基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒RT‑RAA‑LF检测方法及应用。该方法的引物序列为:正向引物(5’‑3’):AGCCTGTCCCCGCCCCGCGCAGGAA;反向引物(5’‑3’):Biotin‑CAGTCTGTGAGGAAGCAGACAAATC;探针(5’‑3’):RAA‑NSP2‑Taq1:FITC‑GTGCCCGCGTCGCGACGTGTCTCCAAGCTG(THE)TGACACCTTTGAGTG‑C3Spacer;RAA‑NSP2‑Taq2:FITC‑GCCGATCCCTGTGCCCGCACCGCGGCGTAA(THE)TTTCAGCAGGTGAA‑C3Spacer;利用本发明设计的引物,RNA通过逆转录酶成cDNA后,再通过重组酶介导的扩增技术(RAA)扩增目标产物,并使用核酸检测试纸条检测目标产物,可以实现PRRSV的快速、准确检测。利用上述引物,待测样品若存在PRRSV,则试纸条检测结果为阳性,根据两个探针的结果,可对PRRSV高致病毒株、经典株进行区分。若待测样品不存在PRRSV高致病毒株或经典株,则相应类型病原的检测结果为阴性;本发明方法操作快速,具有特异性强,灵敏度高等特点。
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公开(公告)号:CN116144838A
公开(公告)日:2023-05-23
申请号:CN202211383578.0
申请日:2022-11-07
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征通用型RT‑RAA‑LF检测方法。引物序列为:正向引物(5’‑3’):ATGCCAAATAACAACGGCAAGC;反向引物(5’‑3’):Biotin‑GCAAACTAAACTCCACAGTGTAACTTAT;探针(5’‑3’):FITC‑CAGCCAGTCAATCAGCTGTGCCAAATGCTG(THF)GTAAGATCATCGCC‑C3Spacer。利用本发明设计的引物,RNA通过逆转录酶M‑MLV转录成cDNA后,重组酶聚合酶介导的恒温扩增技术(RAA)扩增目标产物,并结合侧流层析试纸条检测目标产物,可以实现PRRSV的快速、准确检测。利用上述引物,若待测样品存在PRRSV,则试纸条检测结果为阳性,若待测样品不存在PRRSV,检测结果为阴性;本发明方法操作快速,具有特异性强,灵敏度高等特点。
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公开(公告)号:CN115725798A
公开(公告)日:2023-03-03
申请号:CN202211385878.2
申请日:2022-11-07
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及基于NSP2基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒RT‑RAA检测方法及应用。该方法的引物序列为:正向引物(5’‑3’):AGCCTGTCCCCGCCCCGCGCAGGAA;反向引物(5’‑3’):CAGTCTGTGAGGAAGCAGACAAATC;探针(5’‑3’):RAA‑HTaq1:GTGCCCGCGTCGCGACGTGTCTCCAAGC(6FAM)G(THE)(TAM)GACACCTTTGAGTGRAA‑CTaq2:GCCGATCCCTGTGCCCGCACCGCGGCG(Cy5)AA(THE)(BHQ2)TTCAGCAGGTGAA。利用本发明设计的引物,可以实现PRRSV的快速、准确的检测与分型。利用上述引物,若待测样品存在PRRSV,则检测样品出现扩增曲线,根据两个探针的起峰情况,可对PRRSV高致病毒株与经典株进行区分。若待测样品不存在PRRSV高致病毒株或经典株,检测样品检测不到相应的峰;本发明方法操作快速,具有特异性强,灵敏度高等特点。
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公开(公告)号:CN117210619A
公开(公告)日:2023-12-12
申请号:CN202311289260.0
申请日:2023-10-08
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 吉林大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 一种用于非洲猪瘟病毒LAMP检测的引物组、试剂盒及其应用,属于核酸可视化检测技术领域。为了解决ASFV现有检测方法存在的赖于精准控温的仪器设备和专业的操作,不适应于疫病现场检测,灵敏度低等问题,本发明通过对不同ASFV的全基因组进行比对,筛选出了高度保守的靶序列,根据靶序列设计了适用于LAMP可视化方法的引物组合,并将该引物组合与封闭式胶体金免疫层析试纸相结合建立了一种基于等温扩增技术的核酸可视化检测方法。本发明提供的检测方法能快速、高效、灵敏地检测非洲猪瘟病毒,且无需特殊仪器设备和专业技术人员,操作简便,安全无污染,可为非洲猪瘟疫情现场的快速诊断、监控和流行病学调查提供技术支持。
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公开(公告)号:CN119842937A
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202510084898.3
申请日:2025-02-21
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/35
Abstract: 本发明提供了一种鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的双重qPCR引物组合,包括检测的鸡毒支原体MG mgC2基因、鸡滑液囊支原体MS vlhA基因的特异性引物和探针;针对所述鸡毒支原体MG mgC2基因的特异性引物为SEQ ID NO.1‑2,探针为MG‑Taq;针对所述鸡滑液囊支原体MS vlhA基因的特异性引物为SEQ ID NO.3‑4,探针为MS‑Taq,还提供了鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的双重qPCR检测方法和应用,该方法具有高灵敏性、高特异性、操作简便的优点,为检测区分鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体提供有效的手段。
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公开(公告)号:CN118086585A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202311731862.7
申请日:2023-12-15
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种针对猪内源性逆转录病毒三种亚型的多重PCR检测方法,所述猪内源性逆转录病毒的三种亚型为:PERV‑A、PERV‑B、PERV‑C,本发明建立的多重PCR检测方法具有高灵敏性、高特异性、操作简便的优点,为实验室检测区分上述三种亚型提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN117625800A
公开(公告)日:2024-03-01
申请号:CN202311386618.1
申请日:2023-10-24
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明涉及的一种基于m6A甲基化研究鸭骨骼肌发育影响因素的方法:利用miRNA‑seq以及meRIP‑seq来鉴定鸭在胸肌胚胎细胞分化过程中的E13和E27两个阶段可能存在的受m6A调控的相关差异基因,对m6A基因进行重叠,再联合miRNA及其靶基因分析其功能。通过关联分析筛选出可能存在的m6A位点的miRNA初始转录本。显示MeRIP‑seq在E13组和E27组分别检测到14,344个和14,016个m6A峰。RRACH是鸭胸肌中主要的m6A基序。GO和KEGG分析显示m6A峰主要富集于肌肉发育、脂肪沉积相关通路,同时也富集到很多和肌肉发育相关的基因。证明了通过miRNA可以调控m6A相关基因以此来调控m6A修饰的机制,为研究RNA修饰对家禽骨骼肌发育的影响奠定了基础。
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