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公开(公告)号：CN116219068A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202211390927.1
申请日：2022-11-07
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及基于NSP2基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒RT‑RAA‑LF检测方法及应用。该方法的引物序列为：正向引物(5’‑3’)：AGCCTGTCCCCGCCCCGCGCAGGAA；反向引物(5’‑3’)：Biotin‑CAGTCTGTGAGGAAGCAGACAAATC；探针(5’‑3’)：RAA‑NSP2‑Taq1：FITC‑GTGCCCGCGTCGCGACGTGTCTCCAAGCTG(THE)TGACACCTTTGAGTG‑C3Spacer；RAA‑NSP2‑Taq2：FITC‑GCCGATCCCTGTGCCCGCACCGCGGCGTAA(THE)TTTCAGCAGGTGAA‑C3Spacer；利用本发明设计的引物，RNA通过逆转录酶成cDNA后，再通过重组酶介导的扩增技术(RAA)扩增目标产物，并使用核酸检测试纸条检测目标产物，可以实现PRRSV的快速、准确检测。利用上述引物，待测样品若存在PRRSV，则试纸条检测结果为阳性，根据两个探针的结果，可对PRRSV高致病毒株、经典株进行区分。若待测样品不存在PRRSV高致病毒株或经典株，则相应类型病原的检测结果为阴性；本发明方法操作快速，具有特异性强，灵敏度高等特点。
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公开(公告)号：CN116144838A
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202211383578.0
申请日：2022-11-07
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征通用型RT‑RAA‑LF检测方法。引物序列为：正向引物(5’‑3’)：ATGCCAAATAACAACGGCAAGC；反向引物(5’‑3’)：Biotin‑GCAAACTAAACTCCACAGTGTAACTTAT；探针(5’‑3’)：FITC‑CAGCCAGTCAATCAGCTGTGCCAAATGCTG(THF)GTAAGATCATCGCC‑C3Spacer。利用本发明设计的引物，RNA通过逆转录酶M‑MLV转录成cDNA后，重组酶聚合酶介导的恒温扩增技术(RAA)扩增目标产物，并结合侧流层析试纸条检测目标产物，可以实现PRRSV的快速、准确检测。利用上述引物，若待测样品存在PRRSV，则试纸条检测结果为阳性，若待测样品不存在PRRSV，检测结果为阴性；本发明方法操作快速，具有特异性强，灵敏度高等特点。
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公开(公告)号：CN115725798A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202211385878.2
申请日：2022-11-07
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及基于NSP2基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒RT‑RAA检测方法及应用。该方法的引物序列为：正向引物(5’‑3’)：AGCCTGTCCCCGCCCCGCGCAGGAA；反向引物(5’‑3’)：CAGTCTGTGAGGAAGCAGACAAATC；探针(5’‑3’)：RAA‑HTaq1：GTGCCCGCGTCGCGACGTGTCTCCAAGC(6FAM)G(THE)(TAM)GACACCTTTGAGTGRAA‑CTaq2：GCCGATCCCTGTGCCCGCACCGCGGCG(Cy5)AA(THE)(BHQ2)TTCAGCAGGTGAA。利用本发明设计的引物，可以实现PRRSV的快速、准确的检测与分型。利用上述引物，若待测样品存在PRRSV，则检测样品出现扩增曲线，根据两个探针的起峰情况，可对PRRSV高致病毒株与经典株进行区分。若待测样品不存在PRRSV高致病毒株或经典株，检测样品检测不到相应的峰；本发明方法操作快速，具有特异性强，灵敏度高等特点。
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公开(公告)号：CN116121451A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202211383579.5
申请日：2022-11-07
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征通用型RT‑RAA荧光型检测方法。涉及的引物序列为：正向引物(5’‑3’)：ATGCCAAATAACAACGGCAAGC；反向引物(5’‑3’)：GCAAACTAAACTCCACAGTGTAACTTAT；探针(5’‑3’)：CAGCCAGTCAATCAGCTGTGCCAAATGC(TexRd)G(THF)G(BHQ2)AAGATCATCGCC‑C3Spacer。利用本发明设计的引物，RNA通过转录成cDNA后，重组酶聚合酶介导的恒温扩增技术(RAA)扩增目标产物，并结合荧光定量PCR仪检测目标产物，可以实现PRRSV的快速、准确检测。利用上述引物，若待测样品存在PRRSV，则检测样品出现扩增曲线，若待测样品不存在PRRSV，检测样品不起峰；本发明方法操作快速，具有特异性强，灵敏度高等特点。
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公开(公告)号：CN116162736A
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202211383575.7
申请日：2022-11-07
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及基于猪繁殖与呼吸综合征ORF2a基因的RT‑RAA‑LF建立方法，采用的引物序列为：正向引物：AGCTTCACGATTTTCAGCAATGGCT；反向引物(5’‑3’)：Biotin‑ACGTAGCATTGGAATTCGCAACCAC；探针(5’‑3’)：6‑FITC‑AATAGCTGTACATTCCTCCATATTTTCTTC(THF)GTTGCAGCTTCTTGT‑C3Spacer。利用本发明设计的引物，RNA通过逆转录酶M‑MLV成cDNA后，重组酶介导的扩增技术(RAA)扩增目标产物，并使用核酸检测试纸条检测目标产物，可以实现PRRSV的快速、准确检测。利用上述引物，待测样品若存在PRRSV，则试纸条检测结果为阳性，若待测样品不存在PRRSV，则检测结果为阴性；本发明方法操作快速，具有特异性强，灵敏度高等特点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116121452A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202211383585.0
申请日：2022-11-07
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所 , 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及基于猪繁殖与呼吸综合征ORF2a基因的RT‑RPA荧光型建立方法，采用的引物序列为：正向引物：AGCTTCACGATTTTCAGCAATGGCT；反向引物(5’‑3’)：ACGTAGCATTGGAATTCGCAACCAC；探针(5’‑3’)：5'‑AATAGCTGTACATTCCTCCATATTTTCT(HEX‑dT)C(THF)G(BHQ1‑dT)TGCAGCTTCTTGT‑C3Spacer。利用本发明设计的引物，RNA通过逆转录酶M‑MLV逆转录成cDNA后，重组酶介导的扩增技术(RPA)扩增目标产物，并结合实时荧光定量PCR仪，可以实现PRRSV的快速、准确检测。利用上述引物，待测样品若存在PRRSV，则检测结果出现扩增曲线，若待测样品不存在PRRSV，则检测结果不起峰；本发明方法操作快速，具有特异性强，灵敏度高。
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公开(公告)号：CN118272580A
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202410121912.8
申请日：2024-01-29
Applicant: 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种同时检测三种猪内源性逆转录病毒的多重实时荧光定量PCR检测方法，本发明基于PERV‑A、PERV‑B和PERV‑C基因组上的保守区，设计高特异性引物和探针，本发明建立的多重实时荧光定量PCR检测方法具有高灵敏性、高特异性、操作简便的优点，为实验室检测区分上述三种亚型提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN119876149A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202510125008.9
申请日：2025-01-26
Applicant: 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/85
Abstract: 本发明属于基因敲除技术领域，具体涉及一种特异性靶向猪H SP90AA1基因敲除的sgRNA及其应用。该sgRNA的核苷酸序列特异性设计，能够与Cas9蛋白高效结合，实现在猪ST细胞中对HSP90AA1基因的精准敲除，抑制HSP90AA1基因的表达。
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公开(公告)号：CN118086312A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410510451.3
申请日：2024-04-26
Applicant: 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)
IPC: C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种用于实现猪HSP90AA1基因敲除的sgRNA及其应用。包括HSP90AA1‑sgRNA1和HSP90AA1‑sgRNA2，本发明sgRNA的核苷酸序列特异性设计，能够与Cas9蛋白高效结合，实现在猪ST细胞中对HSP90AA1基因的精准敲除，抑制HSP90AA1基因的表达。通过该技术，能够深入了解HSP90AA1在猪ST细胞中的功能、其在细胞应激和病毒复制中的作用，以及潜在的抗病毒治疗靶点。本发明不仅提供了一种高效、可行的基因编辑工具，而且为猪基因编辑、生物医学研究等领域的进展提供了新的方向。通过对猪ST细胞中HSP90AA1基因的敲除，有望为猪的生长、免疫反应和疾病抵抗力等方面的研究提供重要支持。
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公开(公告)号：CN118086585A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202311731862.7
申请日：2023-12-15
Applicant: 海南省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种针对猪内源性逆转录病毒三种亚型的多重PCR检测方法，所述猪内源性逆转录病毒的三种亚型为：PERV‑A、PERV‑B、PERV‑C，本发明建立的多重PCR检测方法具有高灵敏性、高特异性、操作简便的优点，为实验室检测区分上述三种亚型提供了有效的技术手段。
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