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公开(公告)号:CN117285640B
公开(公告)日:2024-06-28
申请号:CN202311264113.8
申请日:2023-09-28
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明属于免疫及分子生物学技术领域,具体涉及一种鲨源赭曲霉毒素A(OchratoxinA,OTA)抗独特型纳米抗体及其制备方法和应用。本发明所述鲨源赭曲霉毒素A抗独特型纳米抗体可与驼源抗OTA纳米抗体特异性结合,能够作为传统化学合成OTA全抗原和OTA标准品的替代物,节约成本,减少对环境及分析人员的危害,开发无毒绿色免疫检测方法。同时,所述鲨源赭曲霉毒素A抗独特型纳米抗体分子量小,结构简单,稳定性好,分子量仅有12kDa,比驼源纳米抗体小约20%,是已知脊椎动物中最小的天然单域抗体,可用原核或真核表达系统体外表达,容易制备,表达量高,且成本低。
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公开(公告)号:CN106468712A
公开(公告)日:2017-03-01
申请号:CN201610852241.8
申请日:2016-09-26
Applicant: 海南大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/68
CPC classification number: G01N33/54326 , G01N33/5434 , G01N33/6854
Abstract: 本发明公开了一种基于纳米抗体及免疫磁分离检测谷物中赭曲霉毒素A方法,将抗OTA纳米抗体与纳米磁珠结合制备IMB,利用IMB富集谷物中的OTA作为样品前处理方法;再结合斑点免疫法,将OTA-OVA检测抗原固定在PVDF膜上,磁珠以抗体标记物的形式参与免疫反应,OTA-OVA与待测物OTA竞争结合抗体,以磁珠是否在PVDF膜聚集来判断检测结果。本发明实现简单、快速的定性检测;该方法无需分析仪器即可裸视读取结果,进而可研发一种新型快速可视化的检测卡专门用于检测谷物中的OTA。
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公开(公告)号:CN116655740B
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202310610666.8
申请日:2023-05-26
Applicant: 海南大学
IPC: C07K7/06 , C12N15/11 , G01N33/53 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种赭曲霉毒素A的抗原模拟肽及编码核酸分子和应用,属于生物检测技术领域。本发明以抗OTA纳米抗体Nb28为靶分子筛选OTA抗原模拟肽,所述抗原模拟肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1~SEQ ID No.3所示。本发明所述OTA抗原模拟肽可用于检测OTA,本发明建立了一种直接竞争ELISA方法用于OTA检测,上述3个抗原模拟肽的IC50值分别为0.400、1.308、0.609ng/mL,具有较高的灵敏度。
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公开(公告)号:CN117106030A
公开(公告)日:2023-11-24
申请号:CN202311253934.1
申请日:2023-09-27
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明属于免疫学检测技术领域,具体涉及一种玉米赤霉烯酮模拟抗原表位及其应用。本发明所述抗原模拟表位具有与天然ZEN分子相似的免疫反应特性,可以代替价格昂贵且毒性强的ZEN标准品,并作为竞争抗原或固相包被抗原应用于ZEN的免疫学检测。利用本发明所述抗原模拟表位作为免疫学检测的标准品,不仅能够减少国内对于价格高昂的小分子物质标准品ZEN进口的依赖,同时能够降低ZEN对于人体的毒性伤害,对于提升我国小分子物质免疫检测试剂的稳定性和可持续具有积极的意义。
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公开(公告)号:CN116655740A
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN202310610666.8
申请日:2023-05-26
Applicant: 海南大学
IPC: C07K7/06 , C12N15/11 , G01N33/53 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种赭曲霉毒素A的抗原模拟肽及编码核酸分子和应用,属于生物检测技术领域。本发明以抗OTA纳米抗体Nb28为靶分子筛选OTA抗原模拟肽,所述抗原模拟肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1~SEQ ID No.3所示。本发明所述OTA抗原模拟肽可用于检测OTA,本发明建立了一种直接竞争ELISA方法用于OTA检测,上述3个抗原模拟肽的IC50值分别为0.400、1.308、0.609ng/mL,具有较高的灵敏度。
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公开(公告)号:CN117285640A
公开(公告)日:2023-12-26
申请号:CN202311264113.8
申请日:2023-09-28
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明属于免疫及分子生物学技术领域,具体涉及一种鲨源赭曲霉毒素A(OchratoxinA,OTA)抗独特型纳米抗体及其制备方法和应用。本发明所述鲨源赭曲霉毒素A抗独特型纳米抗体可与驼源抗OTA纳米抗体特异性结合,能够作为传统化学合成OTA全抗原和OTA标准品的替代物,节约成本,减少对环境及分析人员的危害,开发无毒绿色免疫检测方法。同时,所述鲨源赭曲霉毒素A抗独特型纳米抗体分子量小,结构简单,稳定性好,分子量仅有12kDa,比驼源纳米抗体小约20%,是已知脊椎动物中最小的天然单域抗体,可用原核或真核表达系统体外表达,容易制备,表达量高,且成本低。
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公开(公告)号:CN117209601A
公开(公告)日:2023-12-12
申请号:CN202311255764.0
申请日:2023-09-27
Applicant: 海南大学
IPC: C07K16/18 , C12N15/13 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/558 , G01N33/543 , G01N33/553 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,特别是涉及一种靶向虾原肌球蛋白的噬菌体展示鲨源单域抗体及其应用。本发明所述噬菌体展示鲨源单域抗体具有优势如下:与原肌球蛋白具有较高的亲和性和特异性,其空间结构较为简单,对于温度、有机溶剂具有更高的稳定性;其独特的立体结构和小尺寸,能够深入到抗原结构中,识别包裹于分子内部较为隐蔽的位点;易于改造,稳定性高,分子量小,具有操作简单、易制备和便于纯化的优点。另外,本发明所述的噬菌体展示鲨源单域抗体可应用于食品中虾类过敏物质的试纸条快速检测,具有高灵敏度、低干扰、高稳定性和可以定量检测的优势,在实现食品中痕量水平过敏原的检测的同时,可以实现现场快速检测。
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公开(公告)号:CN116640183A
公开(公告)日:2023-08-25
申请号:CN202310602033.2
申请日:2023-05-26
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明公开了一种玉米赤霉烯酮毒素的抗原模拟表位及应用和检测试剂盒,属于生物技术领域。本发明提供了一种玉米赤霉烯酮毒素的抗原模拟表位,通过用噬菌体展示肽库技术,从肽库中筛选出能与抗ZEN单克隆抗体特异性结合的多肽,即本发明所述抗原模拟表位,所述抗原模拟表位具有与天然ZEN分子相似的免疫反应特性,通过获得的ZEN抗原模拟表位,以代替价格昂贵且毒性强的ZEN标准品,并作为竞争抗原或固相包被抗原应用于ZEN的免疫学检测。利用本发明所述抗原模拟表位作为免疫学检测的标准品,减少了ZEN对人体健康的危害,节约了成本,具有很高的应用价值。
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公开(公告)号:CN106468712B
公开(公告)日:2018-11-16
申请号:CN201610852241.8
申请日:2016-09-26
Applicant: 海南大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种基于纳米抗体及免疫磁分离检测谷物中赭曲霉毒素A方法,将抗OTA纳米抗体与纳米磁珠结合制备IMB,利用IMB富集谷物中的OTA作为样品前处理方法;再结合斑点免疫法,将OTA‑OVA检测抗原固定在PVDF膜上,磁珠以抗体标记物的形式参与免疫反应,OTA‑OVA与待测物OTA竞争结合抗体,以磁珠是否在PVDF膜聚集来判断检测结果。本发明实现简单、快速的定性检测;该方法无需分析仪器即可裸视读取结果,进而可研发一种新型快速可视化的检测卡专门用于检测谷物中的OTA。
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公开(公告)号:CN117417442A
公开(公告)日:2024-01-19
申请号:CN202311227939.7
申请日:2023-09-22
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,特别是涉及一种能结合人甲胎蛋白的鲨源单域抗体及其应用。本发明所述鲨源单域抗体是通过将甲胎蛋白免疫条纹斑竹鲨(Chiloscyllium plagiosum)后筛选得到的,具有优势如下:1)分子量小,只有12kDa左右,比驼源的更小,是已知动物中最小的类抗体抗原结合结构域;2)鲨鱼与哺乳动物在系统发育树上相距甚远,因此可以对结构保守的哺乳动物药物靶标有高亲和力;3)鲨源单域抗体中较长的CDR3区域具有形成长指状延伸的非凡能力,可以探测蛋白质中的隐藏表位;4)条纹斑竹鲨不属于濒危动物,体型小,便于饲养。
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