公开(公告)号：CN112646815B

公开(公告)日：2022-12-02

申请号：CN202011563128.0

申请日：2020-12-25

Applicant: 海南大学

Inventor： 冯世鹏 ,  郑运天 ,  刘欢 ,  周霞 ,  李慧萍 ,  牛晓磊

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/84 ,  A01H5/06 ,  A01H5/04 ,  A01H5/02 ,  A01H5/12 ,  A01H5/08 ,  A01H6/20 ,  A01H6/38

Abstract: 本发明公开了一种微小RNA分子及其应用。miRNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，miRNA分子的前体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，miRNA分子的初级前体的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明发现将上述miRNA分子或其前体(pre‑miRNA)或者初级前体(pri‑miRNA)导入植物体内，从而增大植物根、茎、叶、花、果等器官，使转基因植物生长旺盛，增加产量，提高抗病性，在植物育种领域具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN109486970B

公开(公告)日：2021-12-07

申请号：CN201811369192.8

申请日：2018-11-16

Applicant: 海南大学

Inventor： 陶均 ,  陈银华 ,  何朝族 ,  郑琳琳 ,  李春霞 ,  牛晓磊 ,  冯世鹏

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种水稻黄单胞菌的环介导等温扩增检测引物组、检测方法和检测试剂盒。本发明基于水稻黄单胞菌基因组特异性分子标记特征，通过比较基因组学方法，获得了水稻黄单胞菌保守的、特异性的DNA片段xcp，采用环介导等温扩增技术成功检测出带病水稻幼苗及种子，而且该检测方法快速、简单、高效。整个检测过程不需要特殊仪器，可在田间及实验室45‑90分钟内完成。该方法灵敏度高，可以检测低至含10个细菌的水稻材料，特异性好，其它病原菌及植物基因组不会对结果造成影响。该方法安全无害，没有有机试剂，没有核酸结合染料，所有试剂可以直接释放到环境中，可以对一切可能的病原菌传播源做检测。

公开(公告)号：CN109486970A

公开(公告)日：2019-03-19

申请号：CN201811369192.8

申请日：2018-11-16

Applicant: 海南大学

Inventor： 陶均 ,  陈银华 ,  何朝族 ,  郑琳琳 ,  李春霞 ,  牛晓磊 ,  冯世鹏

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种水稻黄单胞菌的环介导等温扩增检测引物组、检测方法和检测试剂盒。本发明基于水稻黄单胞菌基因组特异性分子标记特征，通过比较基因组学方法，获得了水稻黄单胞菌保守的、特异性的DNA片段xcp，采用环介导等温扩增技术成功检测出带病水稻幼苗及种子，而且该检测方法快速、简单、高效。整个检测过程不需要特殊仪器，可在田间及实验室45-90分钟内完成。该方法灵敏度高，可以检测低至含10个细菌的水稻材料，特异性好，其它病原菌及植物基因组不会对结果造成影响。该方法安全无害，没有有机试剂，没有核酸结合染料，所有试剂可以直接释放到环境中，可以对一切可能的病原菌传播源做检测。

公开(公告)号：CN106906233A

公开(公告)日：2017-06-30

申请号：CN201710019559.2

申请日：2017-01-10

Applicant: 海南大学

Inventor： 牛晓磊 ,  许文茸 ,  刘秦 ,  冯世鹏 ,  何朝族

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/10

CPC classification number: C12N15/70 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种基于ccdB致死基因和SmaI酶切位点的酶切连接共体系同时进行的方法。将ccdB基因插入载体pUC18的EcoRI和HindIII位点之间，得到pUC18‑ccdB质粒，然后将pUC18‑ccdB质粒、DNA片段、限制性内切酶SmaI、T4连接酶、T4连接酶buffer和水混合形成反应体系进行反应，由此得到连接产物。本发明以常见的pUC18载体为骨架载体，结合ccdB致死基因的筛选机制以及ccdB致死基因内部含有的SmaI酶切位点，构建出一套快速、高效、低背景的克隆方法，无需对ccdB重组载体及PCR产物进行双酶切及胶回收等步骤，可以直接将PCR产物连接到克隆载体，效率高，整个时间控制在20分钟以内，极大地减少了实验成本，加快了实验进度，该克隆体系具有极为广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN112646815A

公开(公告)日：2021-04-13

申请号：CN202011563128.0

申请日：2020-12-25

Applicant: 海南大学

Inventor： 冯世鹏 ,  郑运天 ,  刘欢 ,  周霞 ,  李慧萍 ,  牛晓磊

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/84 ,  A01H5/06 ,  A01H5/04 ,  A01H5/02 ,  A01H5/12 ,  A01H5/08 ,  A01H6/20 ,  A01H6/38

Abstract: 本发明公开了一种微小RNA分子及其应用。miRNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，miRNA分子的前体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，miRNA分子的初级前体的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明发现将上述miRNA分子或其前体(pre‑miRNA)或者初级前体(pri‑miRNA)导入植物体内，从而增大植物根、茎、叶、花、果等器官，使转基因植物生长旺盛，增加产量，提高抗病性，在植物育种领域具有广泛的应用前景。