公开(公告)号：CN111560394A

公开(公告)日：2020-08-21

申请号：CN201911398245.3

申请日：2019-12-30

Applicant: 海南大学

Inventor： 罗丽娟 ,  李敏 ,  刘秦 ,  吴远航 ,  刘攀道 ,  蒋凌雁 ,  陈银华

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/10 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种利用种子荧光快速鉴定转基因拟南芥的方法，通过构建的pOGT载体构建重组基因载体，重组基因载体携带外源基因导入拟南芥中后，转基因拟南芥种子能够观察到荧光，与野生型拟南芥区分开来。本发明公开的pOGT植物表达载体体系避免了抗生素或除草剂对发育缺陷型植株的危害，摆脱了对无菌工作环境和大面积种植空间的需求，缩短了获得转基因植株的时间和成本。

公开(公告)号：CN106906233A

公开(公告)日：2017-06-30

申请号：CN201710019559.2

申请日：2017-01-10

Applicant: 海南大学

Inventor： 牛晓磊 ,  许文茸 ,  刘秦 ,  冯世鹏 ,  何朝族

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/10

CPC classification number: C12N15/70 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种基于ccdB致死基因和SmaI酶切位点的酶切连接共体系同时进行的方法。将ccdB基因插入载体pUC18的EcoRI和HindIII位点之间，得到pUC18‑ccdB质粒，然后将pUC18‑ccdB质粒、DNA片段、限制性内切酶SmaI、T4连接酶、T4连接酶buffer和水混合形成反应体系进行反应，由此得到连接产物。本发明以常见的pUC18载体为骨架载体，结合ccdB致死基因的筛选机制以及ccdB致死基因内部含有的SmaI酶切位点，构建出一套快速、高效、低背景的克隆方法，无需对ccdB重组载体及PCR产物进行双酶切及胶回收等步骤，可以直接将PCR产物连接到克隆载体，效率高，整个时间控制在20分钟以内，极大地减少了实验成本，加快了实验进度，该克隆体系具有极为广阔的应用前景。