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公开(公告)号:CN107372122B
公开(公告)日:2019-03-12
申请号:CN201710806718.3
申请日:2017-09-08
Applicant: 海南大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明提供了橡胶树胚性愈伤组织诱导培养基及橡胶树胚性愈伤组织快速增殖方法,属于组织培养技术领域。所述诱导培养基是包含2,4‑D配合6‑BA、玉米素、TDZ、椰子汁和蔗糖的改良MS培养基,很大程度提高了胚性愈伤组织的诱导率。所述橡胶树胚性愈伤组织快速增殖方法,将花药经初代诱导、胚性愈伤组织诱导和体细胞胚状体分化培养,分别得到胚性愈伤组织和子叶形体细胞胚状体,将两者同步接种到增殖培养基上,以子叶形体细胞胚状体看护哺育,使胚性愈伤组织有效快速增殖。伴随着子叶形体细胞胚的萌发,胚性愈伤组织快速增殖,且同步性很好,皆处于胚性愈伤组织原胚性未分化状态。
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公开(公告)号:CN107517851A
公开(公告)日:2017-12-29
申请号:CN201710806719.8
申请日:2017-09-08
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明提供了一种橡胶树胚性愈伤组织的低温保存培养基及其低温方法,属于组织培养技术领域。所述低温保存培养基通过添加外源抗氧化剂L-谷氨酰胺、抗氧化型维生素VC以及外源激素水杨酸;激发内源抗氧化酶谷胱甘肽还原酶GR作用以维持细胞内高比例的GSH/GSSG以及GR参与植物体内清除ROS关键途径抗坏血酸谷胱甘肽循环AsA-GSH,辅以其他抗氧化酶,协同有效清除低温保存下的胚性愈伤组织内多余的ROS,以提高胚性愈伤组织抗低温胁迫能力。经低温保存培养基保存的胚性愈伤组织的愈伤组织存活率与对照25±2℃暗培养条件下的胚性愈伤组织相比无显著差异,且FDA荧光检测表明经低温保存的胚性愈伤组织细胞活力维持更强。
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公开(公告)号:CN103740723B
公开(公告)日:2015-05-20
申请号:CN201410017746.3
申请日:2014-01-15
Applicant: 海南大学 , 中国科学院遗传与发育生物学研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N1/21 , C12N5/10 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种受水稻白叶枯病菌与细菌性条斑病菌诱导的启动子及应用。本发明所提供的启动子是下述a)-c)中任一的DNA片段:a)序列表中序列1所示DNA片段;b)与a)限定的核苷酸序列具有90%以上同源性,且具有启动子功能的DNA片段;c)在严格条件下与a)或b)限定的核苷酸序列杂交,且具有启动子功能的DNA片段。实验证明,将本发明启动子驱动Gus基因的植物表达载体导入水稻中,获得转基因水稻;接种水稻白叶枯病菌或水稻细菌性条斑病菌,发现转基因水稻叶片的Gus可受水稻白叶枯病菌或水稻细菌性条斑病菌诱导表达。本发明所提供的启动子对于培育食用安全的转基因植物抗病新品种具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN107372122A
公开(公告)日:2017-11-24
申请号:CN201710806718.3
申请日:2017-09-08
Applicant: 海南大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明提供了橡胶树胚性愈伤组织诱导培养基及橡胶树胚性愈伤组织快速增殖方法,属于组织培养技术领域。所述诱导培养基是包含2,4-D配合6-BA、玉米素、TDZ、椰子汁和蔗糖的改良MS培养基,很大程度提高了胚性愈伤组织的诱导率。所述橡胶树胚性愈伤组织快速增殖方法,将花药经初代诱导、胚性愈伤组织诱导和体细胞胚状体分化培养,分别得到胚性愈伤组织和子叶形体细胞胚状体,将两者同步接种到增殖培养基上,以子叶形体细胞胚状体看护哺育,使胚性愈伤组织有效快速增殖。伴随着子叶形体细胞胚的萌发,胚性愈伤组织快速增殖,且同步性很好,皆处于胚性愈伤组织原胚性未分化状态。
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公开(公告)号:CN107517851B
公开(公告)日:2020-01-10
申请号:CN201710806719.8
申请日:2017-09-08
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明提供了一种橡胶树胚性愈伤组织的低温保存培养基及其低温方法,属于组织培养技术领域。所述低温保存培养基通过添加外源抗氧化剂L‑谷氨酰胺、抗氧化型维生素VC以及外源激素水杨酸;激发内源抗氧化酶谷胱甘肽还原酶GR作用以维持细胞内高比例的GSH/GSSG以及GR参与植物体内清除ROS关键途径抗坏血酸谷胱甘肽循环AsA‑GSH,辅以其他抗氧化酶,协同有效清除低温保存下的胚性愈伤组织内多余的ROS,以提高胚性愈伤组织抗低温胁迫能力。经低温保存培养基保存的胚性愈伤组织的愈伤组织存活率与对照25±2℃暗培养条件下的胚性愈伤组织相比无显著差异,且FDA荧光检测表明经低温保存的胚性愈伤组织细胞活力维持更强。
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公开(公告)号:CN105230497A
公开(公告)日:2016-01-13
申请号:CN201510815703.4
申请日:2015-11-23
Applicant: 海南大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明属植物组培技术领域,涉及一种海南地区白花油茶组培苗的生产方法,是取开花后170~190d发育时期的油茶果实幼胚子叶作为外植体,经脱分化诱导出结节胚性组织、增殖培养、再分化培养得到体细胞胚,将体细胞胚转接至植株再生诱导培养基上诱导得到具健壮胚芽和主根的体细胞胚再生植株。本发明利用组织培养,选择花后180d油茶果发育时期的种子未成熟胚子叶为外植体进行油茶组培快繁,建立一整套经体细胞胚发生途径获得油茶再生植株的体系,为海南地区白花油茶工厂化育苗提供技术依据,并为海南地区白花油茶的基因工程改良奠定了材料和技术基础。
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公开(公告)号:CN103740723A
公开(公告)日:2014-04-23
申请号:CN201410017746.3
申请日:2014-01-15
Applicant: 海南大学 , 中国科学院遗传与发育生物学研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N1/21 , C12N5/10 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种受水稻白叶枯病菌与细菌性条斑病菌诱导的启动子及应用。本发明所提供的启动子是下述a)-c)中任一的DNA片段:a)序列表中序列1所示DNA片段;b)与a)限定的核苷酸序列具有90%以上同源性,且具有启动子功能的DNA片段;c)在严格条件下与a)或b)限定的核苷酸序列杂交,且具有启动子功能的DNA片段。实验证明,将本发明启动子驱动Gus基因的植物表达载体导入水稻中,获得转基因水稻;接种水稻白叶枯病菌或水稻细菌性条斑病菌,发现转基因水稻叶片的Gus可受水稻白叶枯病菌或水稻细菌性条斑病菌诱导表达。本发明所提供的启动子对于培育食用安全的转基因植物抗病新品种具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN109486970B
公开(公告)日:2021-12-07
申请号:CN201811369192.8
申请日:2018-11-16
Applicant: 海南大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种水稻黄单胞菌的环介导等温扩增检测引物组、检测方法和检测试剂盒。本发明基于水稻黄单胞菌基因组特异性分子标记特征,通过比较基因组学方法,获得了水稻黄单胞菌保守的、特异性的DNA片段xcp,采用环介导等温扩增技术成功检测出带病水稻幼苗及种子,而且该检测方法快速、简单、高效。整个检测过程不需要特殊仪器,可在田间及实验室45‑90分钟内完成。该方法灵敏度高,可以检测低至含10个细菌的水稻材料,特异性好,其它病原菌及植物基因组不会对结果造成影响。该方法安全无害,没有有机试剂,没有核酸结合染料,所有试剂可以直接释放到环境中,可以对一切可能的病原菌传播源做检测。
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公开(公告)号:CN109486970A
公开(公告)日:2019-03-19
申请号:CN201811369192.8
申请日:2018-11-16
Applicant: 海南大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种水稻黄单胞菌的环介导等温扩增检测引物组、检测方法和检测试剂盒。本发明基于水稻黄单胞菌基因组特异性分子标记特征,通过比较基因组学方法,获得了水稻黄单胞菌保守的、特异性的DNA片段xcp,采用环介导等温扩增技术成功检测出带病水稻幼苗及种子,而且该检测方法快速、简单、高效。整个检测过程不需要特殊仪器,可在田间及实验室45-90分钟内完成。该方法灵敏度高,可以检测低至含10个细菌的水稻材料,特异性好,其它病原菌及植物基因组不会对结果造成影响。该方法安全无害,没有有机试剂,没有核酸结合染料,所有试剂可以直接释放到环境中,可以对一切可能的病原菌传播源做检测。
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公开(公告)号:CN108575761A
公开(公告)日:2018-09-28
申请号:CN201810617301.7
申请日:2018-06-15
Applicant: 海南大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明提供了一种橡胶树胚状体诱导培养基、胚性愈伤组织的诱导方法及抗性愈伤组织植株再生的培育方法,属于植物组织培养技术领域。所述橡胶树胚状体诱导培养基,以改良MS培养基为基本培养基,包括Kt、NAA、6-BA、水杨酸、亚精胺、酸水解酪蛋白、椰子液体胚乳椰子水、活性炭、蔗糖和植物凝胶。本发明提供的胚状体诱导培养基进行橡胶树花药体细胞胚诱导胚性愈伤组织的体细胞胚诱导率相较于花药脱分化愈伤组织的提高2.04~2.16倍。
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