一种ω-转氨酶突变体及其在制备西塞卡纳药物中间体的应用

    公开(公告)号:CN114645030B

    公开(公告)日:2023-11-17

    申请号:CN202210371099.0

    申请日:2022-04-08

    Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在制备西塞卡纳药物中间体的应用,涉及分子生物学技术领域。一种ω‑转氨酶突变体,由来自土曲霉(Aspergillus terreus)的ω‑转氨酶突变所得,野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示,所述ω‑转氨酶突变体的突变位点为:V149A/R128L/L182V/D224K、V149A/R128L/L182F/D224K或V149A/L182F/L187F/D224K中的至少一种。本发明基于一种催化口袋疏水氨基酸的位阻效应,确定需要突变的氨基酸残基位点,结合高通量显色的定量筛选方法,通过定点突变技术进行实验验证,该方法可有效地提高突变氨基酸位点的筛选概率,提高实验效率及可行性,并筛选得到热力学稳定性、酶活性明显优于野生酶的突变酶。

    一种固定化转氨酶的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN117701550A

    公开(公告)日:2024-03-15

    申请号:CN202311546339.7

    申请日:2023-11-20

    Abstract: 本发明公开了一种固定化转氨酶的制备方法及其应用,涉及固定化酶领域。本发明以氨基修饰的多壁碳纳米管为载体,以戊二醛为交联剂活化氨基化多壁碳纳米管,将ω‑转氨酶固定在氨基化多壁碳纳米管上得到固定化转氨酶。在最佳固定条件下,酶活性回收率为78.7%。为了简化产物的分离和提取,以体积浓度为10%的甲醇作为助溶剂,构建了固定化转氨酶催化反应的非水相体系。固定化转氨酶用于催化1‑乙酰基萘反应生成(R)‑NEA,连续反应15个批次后,(R)‑NEA总产量为1.86g,e.e.p值(产物对映体过量)为99.5%,在非水体系中实现了(R)‑NEA的克级规模化生产。

    一种ω-转氨酶多位点组合突变体及其在制备西那卡塞药物中间体的应用

    公开(公告)号:CN118374466A

    公开(公告)日:2024-07-23

    申请号:CN202410051239.5

    申请日:2024-01-12

    Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶多位点组合突变体及其在制备西那卡塞药物中间体的应用,涉及分子生物学技术领域。所述ω‑转氨酶多位点组合突变体是在氨基酸序列为SEQ ID No.2的基础上多位点组合突变得到,所述ω‑转氨酶多位点组合突变体的突变位点为以下任意一种:(1)V149A/L182F/L187F/V62A/V147F/V116S/E117I/L118I,(2)V149A/L182F/L187F/V62A/V147F,(3)V149A/L182F/L187F/V62A。本发明基于一种催化口袋关键氨基酸附近的相关氨基酸,确定需要突变的氨基酸残基位点,结合高通量显色的定量筛选方法,通过定点突变技术进行实验验证,该方法可有效地提高突变氨基酸位点的筛选概率,提高实验效率及可行性,并筛选得到热力学稳定性、酶活性明显优于野生酶的突变酶。

    一种ω-转氨酶突变体及其在制备西塞卡纳药物中间体的应用

    公开(公告)号:CN114645030A

    公开(公告)日:2022-06-21

    申请号:CN202210371099.0

    申请日:2022-04-08

    Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在制备西塞卡纳药物中间体的应用,涉及分子生物学技术领域。一种ω‑转氨酶突变体,由来自土曲霉(Aspergillus terreus)的ω‑转氨酶突变所得,野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示,所述ω‑转氨酶突变体的突变位点为:V149A/R128L/L182V/D224K、V149A/R128L/L182F/D224K或V149A/L182F/L187F/D224K中的至少一种。本发明基于一种催化口袋疏水氨基酸的位阻效应,确定需要突变的氨基酸残基位点,结合高通量显色的定量筛选方法,通过定点突变技术进行实验验证,该方法可有效地提高突变氨基酸位点的筛选概率,提高实验效率及可行性,并筛选得到热力学稳定性、酶活性明显优于野生酶的突变酶。

    一种养殖场合规投入品精准控制平台和方法

    公开(公告)号:CN114638570A

    公开(公告)日:2022-06-17

    申请号:CN202210166749.8

    申请日:2022-02-23

    Abstract: 本发明公开了一种养殖场合规投入品精准控制平台和方法,克服了现有技术投入品供应、投入品使用、畜禽水产品质量安全三大环节的“信息孤岛”时机器学习无法高质量应用的问题,包括相互关联的软件部分和管控系统模块;软件部分包括:底层感知和调节设备、局域网信息传播通信系统、云处理系统、显示和人工决策系统;所述的管控系统模块包括:算法模块、数据库模块、权限管理模块、门禁模块、仓储模块、养殖模块、监控模块、电子档案,算法模块包括用于预测复杂环境下所述的合规投入品的残留,对投入品进行抽检,根据抽检数据实现养殖中投入品危害因子污染率预测。本发明对投入品进行实时监控与抽检,通过预测投入品是否含有危险因子对平台进行管控。

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