-
公开(公告)号：CN114645030B
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202210371099.0
申请日：2022-04-08
Applicant: 浙江科技学院
Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在制备西塞卡纳药物中间体的应用，涉及分子生物学技术领域。一种ω‑转氨酶突变体，由来自土曲霉(Aspergillus terreus)的ω‑转氨酶突变所得，野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述ω‑转氨酶突变体的突变位点为：V149A/R128L/L182V/D224K、V149A/R128L/L182F/D224K或V149A/L182F/L187F/D224K中的至少一种。本发明基于一种催化口袋疏水氨基酸的位阻效应，确定需要突变的氨基酸残基位点，结合高通量显色的定量筛选方法，通过定点突变技术进行实验验证，该方法可有效地提高突变氨基酸位点的筛选概率，提高实验效率及可行性，并筛选得到热力学稳定性、酶活性明显优于野生酶的突变酶。
-
公开(公告)号：CN112391372B
公开(公告)日：2022-06-07
申请号：CN202011294113.9
申请日：2020-11-18
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶突变体、基因工程菌及其应用。该突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示，核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过蛋白质工程改造植物乳杆菌源的谷氨酸脱羧酶，拓宽了该蛋白催化pH活性范围；改造后的GadB基因与GadC基因共同连接于pNZ8149载体中，在乳酸乳球菌NZ3900中表达；在发酵罐中培养重组菌株L.lactis NZ3900/pNZ8149‑gadBΔC11C，用于转化谷氨酸钠生产食品级GABA，转化周期48h，产量高达33.52g/L，谷氨酸钠摩尔转化率达到91.64％；为基于乳酸菌代谢改造及发酵技术制备食品级GABA提供了优良菌株和方法支撑。
-
公开(公告)号：CN112391372A
公开(公告)日：2021-02-23
申请号：CN202011294113.9
申请日：2020-11-18
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶突变体、基因工程菌及其应用。该突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示，核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过蛋白质工程改造植物乳杆菌源的谷氨酸脱羧酶，拓宽了该蛋白催化pH活性范围；改造后的GadB基因与GadC基因共同连接于pNZ8149载体中，在乳酸乳球菌NZ3900中表达；在发酵罐中培养重组菌株L.lactis NZ3900/pNZ8149‑gadBΔC11C，用于转化谷氨酸钠生产食品级GABA，转化周期48h，产量高达33.52g/L，谷氨酸钠摩尔转化率达到91.64％；为基于乳酸菌代谢改造及发酵技术制备食品级GABA提供了优良菌株和方法支撑。
-
公开(公告)号：CN112359030A
公开(公告)日：2021-02-12
申请号：CN202011344825.7
申请日：2020-11-26
Applicant: 浙江科技学院 , 宁波酶赛生物工程有限公司
Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体，由来自土曲霉(Aspergillus terreus)的ω‑转氨酶突变所得，野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述ω‑转氨酶突变体的突变位点为：E133Q、D224K、D231A、E253A或D268K中的至少一种。本发明筛选得到的ω‑转氨酶突变体在热力学稳定性、酶活性方面明显优于野生酶。
-
公开(公告)号：CN117701550A
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202311546339.7
申请日：2023-11-20
Applicant: 浙江科技学院 , 浙江野风药业股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种固定化转氨酶的制备方法及其应用，涉及固定化酶领域。本发明以氨基修饰的多壁碳纳米管为载体，以戊二醛为交联剂活化氨基化多壁碳纳米管，将ω‑转氨酶固定在氨基化多壁碳纳米管上得到固定化转氨酶。在最佳固定条件下，酶活性回收率为78.7％。为了简化产物的分离和提取，以体积浓度为10％的甲醇作为助溶剂，构建了固定化转氨酶催化反应的非水相体系。固定化转氨酶用于催化1‑乙酰基萘反应生成(R)‑NEA，连续反应15个批次后，(R)‑NEA总产量为1.86g，e.e.p值(产物对映体过量)为99.5％，在非水体系中实现了(R)‑NEA的克级规模化生产。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112359030B
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN202011344825.7
申请日：2020-11-26
Applicant: 浙江科技学院 , 宁波酶赛生物工程有限公司
Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体，由来自土曲霉(Aspergillus terreus)的ω‑转氨酶突变所得，野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述ω‑转氨酶突变体的突变位点为：E133Q、D224K、D231A、E253A或D268K中的至少一种。本发明筛选得到的ω‑转氨酶突变体在热力学稳定性、酶活性方面明显优于野生酶。
-
公开(公告)号：CN116445445A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310360880.2
申请日：2020-11-26
Applicant: 浙江科技学院 , 宁波酶赛生物工程有限公司
Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体，由来自土曲霉(Aspergillus terreus)的ω‑转氨酶突变所得，野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述ω‑转氨酶突变体的突变位点为：E133Q、D224K、D231A、E253A或D268K中的至少一种。本发明筛选得到的ω‑转氨酶突变体在热力学稳定性、酶活性方面明显优于野生酶。
-
公开(公告)号：CN107058256B
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201710308984.3
申请日：2017-05-04
Applicant: 浙江科技学院
Abstract: 本发明公开了ω‑转氨酶突变体及其制备方法和应用，属于分子生物学技术领域。ω‑转氨酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.10或SEQ ID NO.12所示。本发明还提供了编码ω‑转氨酶突变体的基因、包含该基因的表达单元、重组质粒和转化子。本发明制备方法利用NCBI数据库和BLAST软件比对筛选获得与ω‑转氨酶同源的氨基酸序列，通过Weblogo程序得到序列一致性结果，并结合ω‑转氨酶的序列确定需要突变的氨基酸残基位点，通过定点突变技术进行实验验证。该方法可有效地提高正突变概率，提高实验效率及可行性，并筛选得到热力学稳定性明显优于野生酶的突变酶。
-
公开(公告)号：CN118222530A
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202311746899.7
申请日：2023-12-18
Applicant: 浙江科技学院 , 浙江野风药业股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高有机溶剂耐受性的ω‑转氨酶突变体及其应用，该ω‑转氨酶突变体由来自土曲霉(Aspergillus terreus)的野生型ω‑转氨酶的第23位的苏氨酸突变成异亮氨酸、第117位的谷氨酸突变成缬氨酸、第200位的苏氨酸突变成甘氨酸以及第294位的谷氨酰胺突变成赖氨酸所得，野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。与野生型酶相比，ω‑转氨酶突变体在30％甲醇溶液中的半衰期均在28.5min以上，而野生型仅为6.2min，比野生型延长了约22.3min，催化活性也显著提高。利用计算机辅助设计技术，筛选获得有机耐受性、酶活性方面明显优于野生酶的ω‑转氨酶突变体。
-
公开(公告)号：CN114107241B
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202111331763.0
申请日：2020-12-04
Applicant: 浙江科技学院 , 宁波酶赛生物工程有限公司
Abstract: 本发明公开了一种通过DNA合成改组组合突变获得的ω‑转氨酶突变体，由来自土曲霉(Aspergillus terreus)的野生型ω‑转氨酶进行点突变而得，野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述ω‑转氨酶突变体的突变位点为：H210N‑N245D‑E253A‑G292D。本发明通过DNA合成改组组合突变方法，将前期所得到的正向突变随机组合，通过实验验证，该方法可有效地提高正突变概率，提高实验效率及可行性，并筛选得到热力学稳定性明显优于野生酶的突变酶。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
31
records
(took 0.021 seconds)
