一种对蛴螬高效致死的RNAi靶标基因及其应用

    公开(公告)号:CN113122540B

    公开(公告)日:2022-10-11

    申请号:CN202110528880.X

    申请日:2021-05-14

    Abstract: 本发明公开了一种对蛴螬高效致死的RNAi靶标基因及其应用,属于生物技术和农业应用领域。该RNAi的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示,其获得的步骤如下:(1)提取蛴螬的总RNA,反转录获得cDNA第一链;(2)以步骤(1)中获得的cDNA为模板,使用SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物进行PCR扩增;(3)以步骤(2)中的PCR产物为模板,使用SEQ ID NO.3~6所示的引物进行PCR,获得合成dsRNA的正、反向模板;(4)反应完成后回收电泳产物,以回收的电泳产物为模板,转录合成dsRNA。注射或饲喂上述dsRNA72h后,蛴螬幼虫的HpCDA1沉默效率高于95%,死亡率高于90%。

    一种蛴螬海藻糖酶基因dsRNA及其应用

    公开(公告)号:CN113249397A

    公开(公告)日:2021-08-13

    申请号:CN202110528879.7

    申请日:2021-05-14

    Abstract: 本发明公开了一种蛴螬海藻糖酶基因dsRNA及其应用,属于生物技术和农业应用领域。该dsRNA如SEQ ID NO.13所示,其制备过程如下:(1)提取蛴螬的总RNA,反转录获得cDNA第一链;(2)以步骤(1)中获得的cDNA为模板,使用SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示的引物进行PCR扩增;(3)以步骤(2)中的PCR产物为模板,使用SEQ ID NO.3~6所示的引物分别进行PCR,获得合成dsRNA的正、反向模板;(4)反应完成后回收电泳产物,以电泳产物为模板,转录合成dsRNA。蛴螬注射上述dsRNA后,该基因沉默效率高达92.4%,幼虫死亡率达98.6%。

    一种马铃薯疮痂病菌的LAMP检测方法

    公开(公告)号:CN111560450A

    公开(公告)日:2020-08-21

    申请号:CN202010439243.0

    申请日:2020-05-22

    Abstract: 本发明公开了一种马铃薯疮痂病菌的LAMP检测方法,根据马铃薯疮痂病菌特有的毒素合成基因簇的基因txtA和txtB等序列设计引物,通过线上筛选与扩增效果筛选,得到一组LAMP检测引物;再对反应体系进行优化以及特异性验证建立了马铃薯疮痂病菌的LAMP检测方法并测定其灵敏度。应用此方法对提取马铃薯疮痂病组织以及带有疮痂病菌的土壤DNA对建立LAMP检测方法进行稳定性验证,得出本发明LAMP检测引物提高了病原菌检测的灵敏度以及检测效率,为以后预防马铃薯疮痂病的工作奠定了基础,对马铃薯疮痂病的预防有较高的实际应用价值。

    解淀粉芽孢杆菌及其在防治花生果腐病中的应用

    公开(公告)号:CN103131648A

    公开(公告)日:2013-06-05

    申请号:CN201110389068.X

    申请日:2011-11-30

    Abstract: 本发明涉及微生物防治领域,特别涉及解淀粉芽孢杆菌菌株、固态发酵菌肥及其在防治花生果腐病中的应用。包含保藏编号为CGMCCNo.5436的解淀粉芽孢杆菌的菌肥稀释100~1000倍穴施于花生,田间定殖促生试验证明该菌能定殖于花生根际土壤及根内,对根部有明显的促生作用,对根部病害防治效果达60%以上,田间防病试验表明对花生果腐病的防治效果为50%以上,出苗率增加10~20%,增产6~12%,实现了在控制病害的同时,达到保果增产的目的。本发明涉及的解淀粉芽孢杆菌能定殖于花生的根际土壤及根内,对花生果腐病有良好的防治效果;其次,该菌株还具有促生增产作用;同时,该菌肥的芽孢含量高、用量少,且无毒无致病性,对人畜安全,不污染环境,生产成本低。

    一种用于防控蛴螬的dsHpAGO1及其应用

    公开(公告)号:CN117247943A

    公开(公告)日:2023-12-19

    申请号:CN202311342951.2

    申请日:2023-10-17

    Abstract: 本发明提供了一种用于防控蛴螬的dsHpAGO1及其应用,属于生物技术和农业应用领域。本发明中的dsHpAGO1由核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的HpAGO1基因和核苷酸序列如SEQ ID NO.3~SEQ ID NO.4所示的dsRNA引物合成。蛴螬注射了本发明中的dsHpAGO1后,与对照组相比,HpAGO1基因的表达量均显著降低,干扰效率为95.53%;蛴螬生长发育出现明显异常,且大量死亡,死亡率为91.7%;HpVAA基因的沉默效率降低了42.6%。所以本发明中的dsHpAGO1在蛴螬防控中的意义十分重大。

    一种用于防控蛴螬的dsHpVAA、dsRNA纳米复合物及其应用

    公开(公告)号:CN117187278B

    公开(公告)日:2024-11-12

    申请号:CN202311342950.8

    申请日:2023-10-17

    Abstract: 本发明提供了一种用于防控蛴螬的dsHpVAA、dsRNA纳米复合物及其应用,属于生物技术和农业应用领域。本发明使用从蛴螬(暗黑鳃金龟)中克隆的V‑ATPaseA基因(HpVAA)和dsRNA特异引物合成核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示dsHpVAA,同时为了有效保护dsRNA免受环境和昆虫肠道核酸酶的影响,将该dsHpVAA与层状双氢氧化物(LDH)纳米载体结合形成dsRNA纳米复合物。使用注射法将该dsRNA纳米复合物导入蛴螬,蛴螬HpVAA基因的沉默效率为99.19%,蛴螬得死亡率为83.3%,为重要地下害虫——蛴螬的生物防治提供了新方法。

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