公开(公告)号：CN113249397B

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202110528879.7

申请日：2021-05-14

Applicant: 河北农业大学 ,  中国农业科学院研究生院

Inventor： 郭巍 ,  赵丹 ,  陆秀君 ,  康占海 ,  李瑞军 ,  吴涵 ,  刘兆瑞

IPC: C12N15/56 ,  C12N15/113 ,  A01N63/60 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了一种蛴螬海藻糖酶基因dsRNA及其应用，属于生物技术和农业应用领域。该dsRNA如SEQ ID NO.13所示，其制备过程如下：(1)提取蛴螬的总RNA，反转录获得cDNA第一链；(2)以步骤(1)中获得的cDNA为模板，使用SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示的引物进行PCR扩增；(3)以步骤(2)中的PCR产物为模板，使用SEQ ID NO.3～6所示的引物分别进行PCR，获得合成dsRNA的正、反向模板；(4)反应完成后回收电泳产物，以电泳产物为模板，转录合成dsRNA。蛴螬注射上述dsRNA后，该基因沉默效率高达92.4％，幼虫死亡率达98.6％。

公开(公告)号：CN116849182A

公开(公告)日：2023-10-10

申请号：CN202310830009.4

申请日：2023-07-07

Applicant: 中国农业科学院研究生院 ,  河北农业大学

Inventor： 郭巍 ,  赵丹 ,  侴越 ,  张杰 ,  耿丽丽 ,  嵇玉洁 ,  高博 ,  吴涵 ,  张璐

IPC: A01K67/033

Abstract: 本发明提供了一种高效测定西花蓟马生物活性的方法及其应用，属于农业害虫生物活性测定技术领域。本发明将西花蓟马接入设置有取食口和透气孔的生测装置中，然后将透气孔封口，将药液和液体饲料混合制成混合饲料添加到取食口中，在适宜条件下饲育昆虫一段时间后观察记录西花蓟马的死亡数，计算死亡率和校正死亡率。使用该方法死亡误差小，校正死亡率高，相较于现有技术中的叶管药膜法、薄膜饲喂法更为高效。本发明中的药液也可为保藏号为CGMCCNo.24768的BtCY6菌株制成的胞晶混合物，西花蓟马的校正死亡率也较高，也可有效应用于西花蓟马生物活性测定体系中，同时还具有环保等优点，对西花蓟马等引起的农业害虫研究意义更为重大。

公开(公告)号：CN113249397A

公开(公告)日：2021-08-13

申请号：CN202110528879.7

申请日：2021-05-14

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 郭巍 ,  赵丹 ,  陆秀君 ,  康占海 ,  李瑞军 ,  吴涵 ,  刘兆瑞

IPC: C12N15/56 ,  C12N15/113 ,  A01N63/60 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了一种蛴螬海藻糖酶基因dsRNA及其应用，属于生物技术和农业应用领域。该dsRNA如SEQ ID NO.13所示，其制备过程如下：(1)提取蛴螬的总RNA，反转录获得cDNA第一链；(2)以步骤(1)中获得的cDNA为模板，使用SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示的引物进行PCR扩增；(3)以步骤(2)中的PCR产物为模板，使用SEQ ID NO.3～6所示的引物分别进行PCR，获得合成dsRNA的正、反向模板；(4)反应完成后回收电泳产物，以电泳产物为模板，转录合成dsRNA。蛴螬注射上述dsRNA后，该基因沉默效率高达92.4％，幼虫死亡率达98.6％。