公开(公告)号：CN113249397B

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202110528879.7

申请日：2021-05-14

Applicant: 河北农业大学 ,  中国农业科学院研究生院

Inventor： 郭巍 ,  赵丹 ,  陆秀君 ,  康占海 ,  李瑞军 ,  吴涵 ,  刘兆瑞

IPC: C12N15/56 ,  C12N15/113 ,  A01N63/60 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了一种蛴螬海藻糖酶基因dsRNA及其应用，属于生物技术和农业应用领域。该dsRNA如SEQ ID NO.13所示，其制备过程如下：(1)提取蛴螬的总RNA，反转录获得cDNA第一链；(2)以步骤(1)中获得的cDNA为模板，使用SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示的引物进行PCR扩增；(3)以步骤(2)中的PCR产物为模板，使用SEQ ID NO.3～6所示的引物分别进行PCR，获得合成dsRNA的正、反向模板；(4)反应完成后回收电泳产物，以电泳产物为模板，转录合成dsRNA。蛴螬注射上述dsRNA后，该基因沉默效率高达92.4％，幼虫死亡率达98.6％。

公开(公告)号：CN113122540B

公开(公告)日：2022-10-11

申请号：CN202110528880.X

申请日：2021-05-14

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 赵丹 ,  郭巍 ,  康占海 ,  陆秀君 ,  李瑞军 ,  刘兆瑞

IPC: C12N15/113 ,  A01N57/16 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了一种对蛴螬高效致死的RNAi靶标基因及其应用，属于生物技术和农业应用领域。该RNAi的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示，其获得的步骤如下：(1)提取蛴螬的总RNA，反转录获得cDNA第一链；(2)以步骤(1)中获得的cDNA为模板，使用SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物进行PCR扩增；(3)以步骤(2)中的PCR产物为模板，使用SEQ ID NO.3～6所示的引物进行PCR，获得合成dsRNA的正、反向模板；(4)反应完成后回收电泳产物，以回收的电泳产物为模板，转录合成dsRNA。注射或饲喂上述dsRNA72h后，蛴螬幼虫的HpCDA1沉默效率高于95％，死亡率高于90％。

公开(公告)号：CN113249397A

公开(公告)日：2021-08-13

申请号：CN202110528879.7

申请日：2021-05-14

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 郭巍 ,  赵丹 ,  陆秀君 ,  康占海 ,  李瑞军 ,  吴涵 ,  刘兆瑞

IPC: C12N15/56 ,  C12N15/113 ,  A01N63/60 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了一种蛴螬海藻糖酶基因dsRNA及其应用，属于生物技术和农业应用领域。该dsRNA如SEQ ID NO.13所示，其制备过程如下：(1)提取蛴螬的总RNA，反转录获得cDNA第一链；(2)以步骤(1)中获得的cDNA为模板，使用SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示的引物进行PCR扩增；(3)以步骤(2)中的PCR产物为模板，使用SEQ ID NO.3～6所示的引物分别进行PCR，获得合成dsRNA的正、反向模板；(4)反应完成后回收电泳产物，以电泳产物为模板，转录合成dsRNA。蛴螬注射上述dsRNA后，该基因沉默效率高达92.4％，幼虫死亡率达98.6％。

公开(公告)号：CN113122540A

公开(公告)日：2021-07-16

申请号：CN202110528880.X

申请日：2021-05-14

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 赵丹 ,  郭巍 ,  康占海 ,  陆秀君 ,  李瑞军 ,  刘兆瑞

IPC: C12N15/113 ,  A01N57/16 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了一种对蛴螬高效致死的RNAi靶标基因及其应用，属于生物技术和农业应用领域。该RNAi的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示，其获得的步骤如下：(1)提取蛴螬的总RNA，反转录获得cDNA第一链；(2)以步骤(1)中获得的cDNA为模板，使用SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物进行PCR扩增；(3)以步骤(2)中的PCR产物为模板，使用SEQ ID NO.3～6所示的引物进行PCR，获得合成dsRNA的正、反向模板；(4)反应完成后回收电泳产物，以回收的电泳产物为模板，转录合成dsRNA。注射或饲喂上述dsRNA72h后，蛴螬幼虫的HpCDA1沉默效率高于95％，死亡率高于90％。

公开(公告)号：CN117247943A

公开(公告)日：2023-12-19

申请号：CN202311342951.2

申请日：2023-10-17

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 赵丹 ,  郭巍 ,  刘兆瑞 ,  王倩 ,  温晶鑫 ,  陆秀君 ,  李瑞军

IPC: C12N15/12 ,  C07K14/435 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明提供了一种用于防控蛴螬的dsHpAGO1及其应用，属于生物技术和农业应用领域。本发明中的dsHpAGO1由核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的HpAGO1基因和核苷酸序列如SEQ ID NO.3～SEQ ID NO.4所示的dsRNA引物合成。蛴螬注射了本发明中的dsHpAGO1后，与对照组相比，HpAGO1基因的表达量均显著降低，干扰效率为95.53％；蛴螬生长发育出现明显异常，且大量死亡，死亡率为91.7％；HpVAA基因的沉默效率降低了42.6％。所以本发明中的dsHpAGO1在蛴螬防控中的意义十分重大。

公开(公告)号：CN109793016A

公开(公告)日：2019-05-24

申请号：CN201910060191.3

申请日：2019-01-22

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 陆秀君 ,  张雪梅 ,  李寒 ,  齐国辉 ,  郭素萍 ,  王红 ,  乔英翠 ,  刘兆瑞

IPC: A01N65/40 ,  A01N61/00 ,  A01N37/02 ,  A01P19/00 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了一种果蝇诱杀剂及制备方法，通过采用红糖5％-7％、食醋5％-7％、菠萝香精1％-2％以及余量的水，将各原料混合均匀，即得果蝇诱杀剂。该果蝇诱杀剂成分简单、易得、成本低、对环境无污染，不影响红树莓果实的品质，能够实现果园保质、保量、丰产、稳产。