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公开(公告)号:CN103194400A
公开(公告)日:2013-07-10
申请号:CN201310100330.3
申请日:2013-03-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种低产乙醛啤酒酵母D-A-14(Saccharomyces cerevisiae D-A-14),于2012年11月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为北京市朝阳区中国科学院微生物研究所,保藏编号为CGMCC No.6822。该方法采用啤酒酵母为出发菌株,经紫外诱变后涂布于含有双硫仑的合成培养基上,从而筛选出低产乙醛啤酒酵母。筛选出的优选酵母再经乙醛培养基驯养一定的周期,可以使其代谢乙醛的能力加强、速度加快,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN101899458A
公开(公告)日:2010-12-01
申请号:CN200910264850.1
申请日:2009-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了基因工程领域中的一种巴斯德毕赤酵母重组菌及其应用。本研究室通过体外分子进化技术,对淀粉液化芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因进行了热稳定性提高定向进化,获得多株热稳定性提高突变体。本发明首次在巴斯德毕赤酵母系统中表达了其中一株热稳定提高最明显β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因bgl。将该基因克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA上,构建到AOX I甲醇诱导型启动子下游,得到重组质粒pPICZαA-his6-bgl,将其经Pme I线性化后转化毕赤酵母GS115,bgl基因通过同源重组被整合到毕赤酵母染色体上,并处于酵母α因子的下游,实现了异源分泌表达。通过重组菌株培养条件的优化,β-1,3-1,4-葡聚糖酶的最佳表达条件为:pH7.0,OD600为2.5,甲醇的日诱导添加量为1%,甲醇诱导后菌体的培养时间为2.5-3天。在此条件下β-葡聚糖酶分泌到培养基中的蛋白表达量为190mg/L,比酶活达到4312U/mg蛋白。SDS-PAGE结果显示表达蛋白的大小为27KDa左右,与理论分子量大小吻合。
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公开(公告)号:CN101285071A
公开(公告)日:2008-10-15
申请号:CN200810108039.X
申请日:2008-05-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株高产β-葡聚糖酶的重组大肠杆菌及其构建,属于基因工程领域。从高产β-葡聚糖酶的淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens SYB-001专利菌株(ZL.200510038488.8)中扩增出β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的开放阅读框序列SEQ ID NO:1,将其插入到大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,得到重组载体pET28a(+)-bgl,转化Escherichia coli BL21(DE3)得到重组菌E.coli BL21(DE3)-pET28a(+)-bgl,CGMCC No.2470。重组菌CGMCC No.2470经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,该基因得到了高效表达,在LB培养基中总酶活可达322.0U/mL,胞外酶活为127.5U/mL,最适反应温度为50℃,最适pH为6.0。该菌株适合在工业化β-葡聚糖酶生产中推广和应用。
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公开(公告)号:CN1329504C
公开(公告)日:2007-08-01
申请号:CN200510038488.8
申请日:2005-03-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株产复合酶的菌株及用该菌株发酵生产复合酶的方法,属于生物工程技术领域。本发明的菌株为一株淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)SYB-001,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.1314。该菌株在以玉米粉和大麦粉为复合碳源,豆饼粉为氮源的发酵培养基中能够制备具有较高酶活性的复合酶(包括β-葡聚糖酶和蛋白酶)。本发明为指导育种和最终实现工业化生产奠定基础。
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公开(公告)号:CN1743444A
公开(公告)日:2006-03-08
申请号:CN200510094670.5
申请日:2005-09-30
Applicant: 江南大学 , 青岛啤酒股份有限公司
IPC: C12C12/00
Abstract: 一种含低嘌呤类物质的啤酒的制造方法,属于啤酒制造技术领域。本发明在常规啤酒生产过程中采用工艺技术措施,包括降低大麦芽的使用量,在糖化锅中尽量沉淀和降解核酸类大分子物质,在煮沸和储酒阶段分两次吸附核苷酸,然后通过高浓稀释工艺进一步降低嘌呤类物质在啤酒中的浓度。本发明的啤酒中,嘌呤类物质含量控制到2-5mg/L,仅为普通啤酒的5%-10%,该低嘌呤啤酒的质量符合啤酒的国家标准要求,口感与普通啤酒相似,泡沫细腻洁白,泡持性长达180秒以上。
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公开(公告)号:CN101921737A
公开(公告)日:2010-12-22
申请号:CN200910264846.5
申请日:2009-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明以本研究室构建的高产耐热性重组Pichia pastoris GS115-pPICZαA-bgl为出发菌,对其发酵液进行提取并分离纯化得到电泳纯β-1,3-1,4-葡聚糖酶样品。主要研究冻融法、酶法和超声破碎法破壁对酶活力的影响,考察硫酸铵分级沉淀和乙醇分级沉淀的特点,最后采用离子交换层析获得了较纯的重组酶,并用SDS-PAGE进行鉴定。重组β-葡聚糖酶粗酶液经过硫酸铵分级沉淀和DEAE-650M离子交换层析,纯化倍数为22.57倍,回收率为20.06%,最终比活力达到17674U/mg。SDS-PAGE鉴定表明纯化后的重组β-葡聚糖酶为一单一条带,分子量大小约为27kDa。
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公开(公告)号:CN101280290A
公开(公告)日:2008-10-08
申请号:CN200810108041.7
申请日:2008-05-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株产较高热稳定性重组β-葡聚糖酶的基因工程菌及其构建,属于基因工程技术领域。本发明采用易错PCR技术扩增高产β-葡聚糖酶的淀粉液化芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)SYB-001(ZL.200510038488.8)专利菌株β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的开放阅读框序列,向其中随机引入突变,将改造后的基因插入到大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,转化Escherichia coli BL21(DE3),构建重组子文库,经筛选,最终得到一株可以产较高热稳定性重组酶的突变株大肠埃希氏菌(E.coli BL21(DE3)-pET28a(+)-bglt 1)CGMCC No.2741。经酶学性质分析,CGMCC No.2741最适温度为 55℃,在50-55℃下较稳定,各比出发菌SYB-001提高5℃。
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公开(公告)号:CN100419058C
公开(公告)日:2008-09-17
申请号:CN200510094669.2
申请日:2005-09-30
Applicant: 江南大学 , 河南奥克啤酒实业有限公司
IPC: C12C12/02
Abstract: 一种低热量啤酒的生产工艺,属于啤酒生产技术领域。本发明采用调节酿造工艺,稀释和添加膳食纤维来制备低热量啤酒。主要包括啤酒原料的糊化、糖化、煮沸、添加酒花等工艺过程,得到高度发酵的含糖量低的嫩啤酒,经后稀释并添加膳食纤维及其它低热量的浸出物,制得低热量啤酒。本发明的低热量啤酒其热量低于800kJ/L,比普通啤酒的热量(1600kJ/L)降低了一半以上,既具有普通啤酒的风味,口感柔和,且具有一定的保健功能。
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公开(公告)号:CN100419057C
公开(公告)日:2008-09-17
申请号:CN200510094670.5
申请日:2005-09-30
Applicant: 江南大学 , 青岛啤酒股份有限公司
IPC: C12C12/00
Abstract: 一种含低嘌呤类物质的啤酒的制造方法,属于啤酒制造技术领域。本发明在常规啤酒生产过程中采用工艺技术措施,包括降低大麦芽的使用量,在糖化锅中尽量沉淀和降解核酸类大分子物质,在煮沸和储酒阶段分两次吸附核苷酸,然后通过高浓稀释工艺进一步降低嘌呤类物质在啤酒中的浓度。本发明的啤酒中,嘌呤类物质含量控制到2-5mg/L,仅为普通啤酒的5%-10%,该低嘌呤啤酒的质量符合啤酒的国家标准要求,口感与普通啤酒相似,泡沫细腻洁白,泡持性长达180秒以上。
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公开(公告)号:CN1314794C
公开(公告)日:2007-05-09
申请号:CN200510040487.7
申请日:2005-06-08
Applicant: 江南大学
IPC: C12H3/00
Abstract: 一种反渗透生产无醇啤酒的方法,涉及反渗透技术在啤酒行业的应用。本发明采用将啤酒清酒通过高压泵打入反渗透装置,控制透过液流速与补加脱氧水的流速相等,浓缩液仍流回进料罐中进行循环脱醇,直至酒液的酒精度低于0.5%(v/v),控制反渗透的透过液为反渗透料液4~5倍的体积比,反渗透系统的操作压力控制为1.8~2.5MPa,温度控制为4~12℃。采用反渗透法制备无醇啤酒,酒精度可降低约85%以上,不需要改变啤酒的其他生产工艺。所制得的无醇啤酒能够保留原啤酒的各种风味物质,酒体丰满,口感淡爽,符合了现代消费者的需求,具有潜在的经济效益和社会效益。
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