公开(公告)号：CN101285071A

公开(公告)日：2008-10-15

申请号：CN200810108039.X

申请日：2008-05-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 李崎 ,  李永仙 ,  郑飞云 ,  刘春凤 ,  顾国贤 ,  谢焱

IPC: C12N15/56 ,  C12N1/21 ,  C12N9/42 ,  C12N9/24 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 一株高产β－葡聚糖酶的重组大肠杆菌及其构建，属于基因工程领域。从高产β－葡聚糖酶的淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens SYB－001专利菌株(ZL.200510038488.8)中扩增出β－1，3－1，4－葡聚糖酶基因的开放阅读框序列SEQ ID NO：1，将其插入到大肠杆菌表达载体pET28a(+)中，得到重组载体pET28a(+)－bgl，转化Escherichia coli BL21(DE3)得到重组菌E.coli BL21(DE3)－pET28a(+)－bgl，CGMCC No.2470。重组菌CGMCC No.2470经异丙基硫代－β－D－半乳糖苷(IPTG)诱导，该基因得到了高效表达，在LB培养基中总酶活可达322.0U/mL，胞外酶活为127.5U/mL，最适反应温度为50℃，最适pH为6.0。该菌株适合在工业化β－葡聚糖酶生产中推广和应用。