公开(公告)号：CN117821425A

公开(公告)日：2024-04-05

申请号：CN202311767493.7

申请日：2023-12-20

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏伟 ,  吴敬 ,  霍润甜

IPC: C12N9/26 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/14 ,  C12P19/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种β‑呋喃果糖苷酶突变体及其在制备低聚乳果糖中的应用，属于酶工程技术领域。本发明对β‑呋喃果糖苷酶ArFF的氨基酸序列进行定点突变，获得一系列制备低聚乳果糖转化率提高的单突变体S165A、N244Q、T360F、Y422F、Y425F，最终获得组合突变体S165A/N244Q/Y422F/Y425F，可以将350g/L乳糖和350g/L蔗糖转化为转化成268.6g/L的低聚乳果糖，转化率达到38.37％，提高了9.4％，拓宽了其在食品领域的应用前景。

公开(公告)号：CN112501025A

公开(公告)日：2021-03-16

申请号：CN202011482484.X

申请日：2020-12-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  王蕾 ,  饶德明 ,  刘展志 ,  陶秀梅 ,  霍润甜 ,  罗慧

IPC: C12N1/06

Abstract: 本发明公开了一种提高高通量筛选中表达宿主细胞破碎效率的方法，属于蛋白工程和发酵工程技术领域。本发明在微生物细胞破碎体系中加入十六烷基三甲基溴化铵，从而使得细胞破碎效率得到提高且破碎均匀，使得胞内酶被充分地被释放出来，对于表达量较低的酶也能有效释放至细胞外，有利于菌株的筛选、降低假阳性率。操作简便，利于高通量筛选。

公开(公告)号：CN112143722A

公开(公告)日：2020-12-29

申请号：CN202011047985.5

申请日：2020-09-29

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  王蕾 ,  饶德明 ,  陈晟 ,  刘展志 ,  霍润甜 ,  杨卫康 ,  盛露菲

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种提高4,6‑α‑葡萄糖基转移酶可溶性表达量的方法，属于蛋白质工程和发酵工程技术领域，具体涉及分别以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌为宿主表达来源于发酵乳杆菌的4,6‑α‑葡萄糖基转移酶(GtfB)过程中，在发酵培养基中添加甜菜碱、麦芽糖、β‑环糊精、海藻糖、山梨醇小分子物质，提高4,6‑α‑葡萄糖基转移酶(GtfB)可溶性表达量的方法，使得发酵总酶活本发明为高效表达4,6‑α‑葡萄糖基转移酶(GtfB)提供了一个有效的策略，操作工艺简单，且成本较低，效果显著，为工业化生产奠定了基础。

公开(公告)号：CN116376861A

公开(公告)日：2023-07-04

申请号：CN202310081930.3

申请日：2023-01-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  饶德明 ,  王蕾 ,  陈晟 ,  郭志勇 ,  霍润甜 ,  刘伟琼 ,  陶秀梅 ,  陶尊

IPC: C12N9/10 ,  A61K8/66 ,  A61Q19/00 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/08 ,  A23L29/00 ,  A23L33/17 ,  A23L33/10 ,  A23L33/135 ,  A23L29/30 ,  A23L33/125 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的4,6‑α‑葡萄糖基转移酶突变体，涉及酶工程技术领域。本发明对现有4,6‑α‑葡萄糖基转移酶ΔGtfB的氨基酸序列进行定点突变，获得了突变体Y134V，Y241P，N247P，D262P，D420P，A473P，D474P，T518M/T534P，M765L/N839D，L777P，S813P。这些突变体在50℃热稳定性提高了1.23‑1.63倍，熔融温度(Tm)提高0.6‑1.4℃，部分突变体最适温度从45℃提高至50℃。本发明构建的突变体在耐热性得到改善的同时保持了较高的比酶活，拓宽了其在食品领域的应用前景。

公开(公告)号：CN116083404A

公开(公告)日：2023-05-09

申请号：CN202211386511.2

申请日：2022-11-07

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏伟 ,  吴敬 ,  盛玲玲 ,  霍润甜 ,  许俊勇 ,  史玉萍

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P19/12 ,  C12P19/14 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了β‑葡萄糖苷酶突变体及其在昆布二糖制备中的应用，属于酶工程技术领域。本发明通过定点突变构建获得转苷/水解比提高的一系列β‑葡萄糖苷酶突变体，其中最优组合突变体W324M/H298F在最优条件下合成昆布二糖最高产率可达11.41％，产物浓度达到91.3g/L，高于目前已有报道，具有较好的工业化应用潜力。