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公开(公告)号：CN108441483A
公开(公告)日：2018-08-24
申请号：CN201810377315.6
申请日：2018-04-25
Applicant: 江南大学
IPC: C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种促进牛鼻气管炎病毒复制的方法，其包括用低温常压等离子体发生器照射牛肾细胞培养基，将经过照射处理的所述培养基加入牛肾细胞中，并加入牛鼻气管炎病毒孵育。本发明通过等离子体间接处理细胞，处理均匀且强度可控。本发明处理时间只需2min，操作简单、快速，处理后的DMEM培养基与牛鼻气管炎病毒和牛肾细胞一同孵育1h就能显著提高牛鼻气管炎病毒在牛肾细胞中的复制，得到的高浓度牛鼻气管炎病毒经灭活处理可用于疫苗生产，显著提高疫苗生产效率。
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公开(公告)号：CN108441483B
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN201810377315.6
申请日：2018-04-25
Applicant: 江南大学
IPC: C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种促进牛鼻气管炎病毒复制的方法，其包括用低温常压等离子体发生器照射牛肾细胞培养基，将经过照射处理的所述培养基加入牛肾细胞中，并加入牛鼻气管炎病毒孵育。本发明通过等离子体间接处理细胞，处理均匀且强度可控。本发明处理时间只需2min，操作简单、快速，处理后的DMEM培养基与牛鼻气管炎病毒和牛肾细胞一同孵育1h就能显著提高牛鼻气管炎病毒在牛肾细胞中的复制，得到的高浓度牛鼻气管炎病毒经灭活处理可用于疫苗生产，显著提高疫苗生产效率。
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公开(公告)号：CN115786340B
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202211376459.2
申请日：2022-11-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高leaderless启动子活性的方法及其应用，包括，在leaderless启动子和目的基因之间插入一段SEQ ID NO.2所示的62bp的核酸序列、SEQ ID NO.3所示的13bp的SD序列和SEQ ID NO.4所示的5bp的翻译偶联结构，制得高活性启动子。本发明提出的方法对于提高leadless启动子的活性具有很好的普适性；在所测试的另外两个leaderless启动子H36和Cg0124中，也观察到显著的启动子活性提高效果。
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公开(公告)号：CN108467902B
公开(公告)日：2022-05-03
申请号：CN201810294653.3
申请日：2018-04-25
Applicant: 江南大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种快速检测牛鼻气管炎病毒的方法。其包括，煮沸：将感染有牛鼻气管炎病毒的细胞及其培养液煮沸；检测：煮沸后，进行PCR检测定量测定牛鼻气管炎病毒含量。本发明在短时间内有效提取和检测牛鼻气管炎病毒，与传统提取检测方法比较，直接煮沸后检测，成本更低。本发明避免了常规检测柱提基因组过程中的误差，煮沸法提取模板省去了诸多繁琐的步骤，尤其适用于快速、高通量地检测牛鼻气管炎病毒。本发明检测所需样品微量(只需100uL含病毒培养液，不足100uL可用1640培养基补足至100uL)，方便科研工作中微量样品的提取与检测；更符合牛鼻气管炎病毒检测研究工作的需要。
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公开(公告)号：CN109913490A
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201910187914.6
申请日：2019-03-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种在谷氨酸棒杆菌表达菌株Corynebacterium glutamicum CGMCC1.15647的增强型表达载体，用于外源蛋白表达。其特征在于：将内源双顺反子元件引入到穿梭载体pXMJ19的多克隆位点之前，得到含有增强型Ptac启动子的谷氨酸棒杆菌表达载体pGX19，该载体能够显著提高外源蛋白GFP、SUMO-NT-proBNP、VHH的表达能力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108642109A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810494617.1
申请日：2018-05-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高谷氨酸棒杆菌重组蛋白表达量的方法，其包括，在谷氨酸棒杆菌培养基中加入体积浓度为0.5％～10％的乙醇。本发明显著提高了谷氨酸棒状杆菌的生长和蛋白表达产量，本发明方法绿色环保无毒害、操作简单、成本低、效果好、显著提高谷氨酸棒杆菌的蛋白表达产量，具有巨大的工业应用价值。本发明在培养基中添加1％乙醇促进谷氨酸棒杆菌的生长，同样培养条件下，谷氨酸棒杆菌的重组蛋白表达量提高一倍以上。
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公开(公告)号：CN115786340A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211376459.2
申请日：2022-11-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高leaderless启动子活性的方法及其应用，包括，在leaderless启动子和目的基因之间插入一段SEQ ID NO.2所示的62bp的核酸序列、SEQ ID NO.3所示的13bp的SD序列和SEQ ID NO.4所示的5bp的翻译偶联结构，制得高活性启动子。本发明提出的方法对于提高leadless启动子的活性具有很好的普适性；在所测试的另外两个leaderless启动子H36和Cg0124中，也观察到显著的启动子活性提高效果。
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公开(公告)号：CN108642074A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810494641.5
申请日：2018-05-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种含有乙醇诱导启动子的质粒载体及其在提高谷氨酸棒杆菌重组蛋白表达量中的应用。其中，所述乙醇诱导启动子为谷氨酸棒杆菌异柠檬酸裂合酶编码基因的启动子。本发明含有乙醇诱导启动子的载体装载重组蛋白，在含有1％乙醇的LBB培养基中培养36h后，相比不添加乙醇的本发明的乙醇诱导启动子具有9.5倍的诱导效果。本发明含有乙醇诱导启动子的质粒载体具有显著提高重组蛋白表达的作用，相比于自身对数期(4h)的表达水平，本发明乙醇诱导启动子有着提高21.1倍的自诱导效果。
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公开(公告)号：CN109913490B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN201910187914.6
申请日：2019-03-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种在谷氨酸棒杆菌表达菌株Corynebacterium glutamicum CGMCC1.15647的增强型表达载体，用于外源蛋白表达。其特征在于：将内源双顺反子元件引入到穿梭载体pXMJ19的多克隆位点之前，得到含有增强型Ptac启动子的谷氨酸棒杆菌表达载体pGX19，该载体能够显著提高外源蛋白GFP、SUMO‑NT‑proBNP、VHH的表达能力。
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公开(公告)号：CN107937429B
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN201711081124.7
申请日：2017-11-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了CRIPSR/Cas9系统中重组sgRNA骨架载体的构建方法，其能解决现有构建方法操作要求以及试剂配制要求较高受，普通技术人员获得的菌株阳性率低，阳性菌株挑选费时费力的技术问题。CRIPSR/Cas9系统中重组sgRNA骨架载体的构建方法，其包括以下步骤：（1）制备线性化的sgRNA空质粒；（2）制备区分片段；（3）制备重组sgRNA骨架载体；（4）挑选重组sgRNA骨架载体；其特征在于：所述步骤（2）的区分片段包含sacB基因及其开放阅读框（ORF）、启动子和终止子。
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