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公开(公告)号：CN118726440A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202410542382.4
申请日：2024-04-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种红色荧光强度表征蛋白表达量的生物传感器，将EGFP与m‑Cherry荧光蛋白表达耦联，两种荧光值计算相关性，拟合度R2达到0.998，将该耦联序列应用于α‑乳白蛋白表达的表征验证，蛋白表达灰度值与m‑Cherry荧光值计算相关性，拟合度达到0.6543。
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公开(公告)号：CN116286934B
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202211664220.5
申请日：2022-12-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌中冷休克蛋白调控有机化合物耐受性的研究方法，以P.putidaKT2440为原始菌，构建得到敲除菌ΔCapB和过表达菌株CapB，构建敲除菌ΔCspA1和过表达菌株CspA1，构建敲除菌ΔCspA2和过表达菌株CspA2，证明了冷休克蛋白作为一种调控蛋白作用于细胞，通过调控细胞释放OMV进而影响细胞对有机化合物的耐受性，这一发现对优化底盘细胞调控网络从而提高生物合成有机化合物的效益意义重大。
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公开(公告)号：CN116559307B
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202310030885.9
申请日：2023-01-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种菌株发酵液中紫苏醇的高效液相色谱检测方法，本发明方法能够直接对菌株发酵液中紫苏醇进行高效液相色谱检测，相比于气相色谱的检测方法,更为直接,直接对培养基进行检测,省去了气相色谱对培养基的后处理步骤,步骤相对于气相色谱来说较为简单,并且检测灵敏度与气象色谱检测相当，同时还能够减少样品的损失率。
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公开(公告)号：CN116334105B
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202310472680.6
申请日：2023-04-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌中4‑异丙基苯甲酸诱导的高强度表达体系的构建方法，以恶臭假单胞菌F1（Pseudomonas Putida F1）代谢途径中存在的4‑异丙基苯甲酸（cumate）诱导的cym操纵子为基础，替换其原有表达用启动子以及表达目的基因，通过组合多阻遏位点，得到改造后的cym操纵子，从而使得荧光蛋白表达强度提高；本发明确定了所述诱导系统的诱导剂在恶臭假单胞菌中的有效响应范围，同时筛选得到响应最好的多阻遏位点诱导系统。
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公开(公告)号：CN116355940A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202310299393.X
申请日：2023-03-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种猪O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达载体及其构建方法，构建得到的猪O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达载体在以谷氨酸棒状杆菌作为底盘菌株时能够分泌表达，与现有技术相比，实现了在除大肠杆菌以外的底盘菌株中表达VP1，提高其表达量以及活性；同时本发明还通过更换合成型启动子来构建表达载体，实现VP1表达量的进一步提升，为开发猪O型口蹄疫亚单位疫苗提供了一种新的更安全的方案。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116334105A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202310472680.6
申请日：2023-04-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种一种基于4‑异丙基苯甲酸诱导的cmt操纵子的改造方法，以恶臭假单胞菌F1(PseudomonasPutidaF1)代谢途径中存在的4‑异丙基苯甲酸(cumate)诱导的cmt操纵子为基础，构建得到可在大肠杆菌BL21(DE3)和恶臭假单胞菌KT2440中应用的4‑异丙基苯甲酸诱导表达系统，确定构建得到诱导系统的诱导剂在恶臭假单胞菌KT2440中的有效响应范围，根据确定的有效响应范围分别筛选出在大肠杆菌BL21(DE3)和恶臭假单胞菌KT2440中响应较好的多阻遏位点诱导系统。
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公开(公告)号：CN116240229A
公开(公告)日：2023-06-09
申请号：CN202310178204.3
申请日：2023-02-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产β‑榄香烯和germacreneA的重组菌的构建方法。首先，通过germacreneA合成酶的筛选和甲羟戊酸代谢途径的过表达实现β‑榄香烯和germacreneA的从头合成；然后，通过删除中心碳途径中的竞争途径确保了类异戊二烯途径中乙酰辅酶A、丙酮酸和甘油醛‑3‑磷酸的可用性；接着采用番茄红素颜色作为高通量筛选方法，通过易于出错的PCR诱变获得了优化的NSY305N。最后，在摇瓶中，通过关键途径酶、外排工程和翻译工程的最终构建的菌株β‑EL‑4产生了1161.09mg/L的β‑榄香烯和852.36mg/L的germacreneA，是目前报道的摇瓶水平的最高产量，在4‑L补料分批发酵中，β‑榄香烯和germacreneA的产量分别达到3.52g/L和2.13g/L。
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公开(公告)号：CN114672509B
公开(公告)日：2022-12-27
申请号：CN202210173671.2
申请日：2022-02-24
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/77 , C12N15/67 , C12N15/66 , C12N15/12 , C07K14/435
Abstract: 本发明提供了一种具有高表达能力的棒状杆菌和大肠杆菌双表达载体及其构建方法，目的在于提高外源蛋白的蛋白产量；从蛋白表达元件的突变入手，对目的基因前的一段序列加以突变，在不引入副产物，不对宿主菌株产生额外的影响下，提高蛋白产量；原pXMJ19‑egfp的荧光表达量在100000左右，现pXMJ19‑1676‑5’UTR‑egfp的荧光表达量在850000左右，对于5’utr核苷酸序列的加入，蛋白表达元件的绿色荧光蛋白表达能力有了8.5倍左右的提升。本发明不仅仅对egfp这种绿色荧光蛋白有效果，对m‑cherry的表达也有提升效果，说明，本发明中的质粒系统可以尝试应用于其他的外源蛋白表达。
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公开(公告)号：CN114672509A
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN202210173671.2
申请日：2022-02-24
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/77 , C12N15/67 , C12N15/66 , C12N15/12 , C07K14/435
Abstract: 本发明提供了一种具有高表达能力的棒状杆菌和大肠杆菌双表达载体及其构建方法，目的在于提高外源蛋白的蛋白产量；从蛋白表达元件的突变入手，对目的基因前的一段序列加以突变，在不引入副产物，不对宿主菌株产生额外的影响下，提高蛋白产量；原pXMJ19‑egfp的荧光表达量在100000左右，现pXMJ19‑1676‑5’UTR‑egfp的荧光表达量在850000左右，对于5’utr核苷酸序列的加入，蛋白表达元件的绿色荧光蛋白表达能力有了8.5倍左右的提升。本发明不仅仅对egfp这种绿色荧光蛋白有效果，对m‑cherry的表达也有提升效果，说明，本发明中的质粒系统可以尝试应用于其他的外源蛋白表达。
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公开(公告)号：CN114574490A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202210238177.X
申请日：2022-03-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种巴斯德毕赤酵母组成型启动子及其改造方法和应用，所述组成型启动子为P0887‑GAP、P0887‑AOX1和P0887‑GS中的一种；所述启动子P0887‑GAP的核苷酸序列如SEQ ID NO.31所示；所述启动子P0887‑AOX1的核苷酸序列如SEQ ID NO.32所示；所述启动子P0887‑GS的核苷酸序列如SEQ ID NO.33所示。本发明通过替换启动子P0887的5’非翻译区序列，改造后启动子的转录活性基本不变，荧光强度提高至原始启动子的37倍。
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