公开(公告)号：CN109913490B

公开(公告)日：2023-04-07

申请号：CN201910187914.6

申请日：2019-03-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘秀霞 ,  高雄 ,  孙曼曼 ,  董贵宾 ,  严豪 ,  白仲虎 ,  杨艳坤 ,  刘春立

IPC: C12N15/77 ,  C12P21/02

Abstract: 本发明公开了一种在谷氨酸棒杆菌表达菌株Corynebacterium glutamicum CGMCC1.15647的增强型表达载体，用于外源蛋白表达。其特征在于：将内源双顺反子元件引入到穿梭载体pXMJ19的多克隆位点之前，得到含有增强型Ptac启动子的谷氨酸棒杆菌表达载体pGX19，该载体能够显著提高外源蛋白GFP、SUMO‑NT‑proBNP、VHH的表达能力。

公开(公告)号：CN108642074A

公开(公告)日：2018-10-12

申请号：CN201810494641.5

申请日：2018-05-22

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘秀霞 ,  高雄 ,  孙曼曼 ,  张伟 ,  董贵宾 ,  杨艳坤 ,  白仲虎

IPC: C12N15/77 ,  C12N15/67

Abstract: 本发明公开了一种含有乙醇诱导启动子的质粒载体及其在提高谷氨酸棒杆菌重组蛋白表达量中的应用。其中，所述乙醇诱导启动子为谷氨酸棒杆菌异柠檬酸裂合酶编码基因的启动子。本发明含有乙醇诱导启动子的载体装载重组蛋白，在含有1％乙醇的LBB培养基中培养36h后，相比不添加乙醇的本发明的乙醇诱导启动子具有9.5倍的诱导效果。本发明含有乙醇诱导启动子的质粒载体具有显著提高重组蛋白表达的作用，相比于自身对数期(4h)的表达水平，本发明乙醇诱导启动子有着提高21.1倍的自诱导效果。

公开(公告)号：CN109913490A

公开(公告)日：2019-06-21

申请号：CN201910187914.6

申请日：2019-03-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘秀霞 ,  高雄 ,  孙曼曼 ,  董贵宾 ,  严豪 ,  白仲虎 ,  杨艳坤 ,  刘春立

IPC: C12N15/77 ,  C12P21/02

Abstract: 本发明公开了一种在谷氨酸棒杆菌表达菌株Corynebacterium glutamicum CGMCC1.15647的增强型表达载体，用于外源蛋白表达。其特征在于：将内源双顺反子元件引入到穿梭载体pXMJ19的多克隆位点之前，得到含有增强型Ptac启动子的谷氨酸棒杆菌表达载体pGX19，该载体能够显著提高外源蛋白GFP、SUMO-NT-proBNP、VHH的表达能力。

公开(公告)号：CN108642109A

公开(公告)日：2018-10-12

申请号：CN201810494617.1

申请日：2018-05-22

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘秀霞 ,  高雄 ,  孙曼曼 ,  张伟 ,  董贵宾 ,  杨艳坤 ,  白仲虎

IPC: C12P21/02 ,  C12N15/77 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明公开了一种提高谷氨酸棒杆菌重组蛋白表达量的方法，其包括，在谷氨酸棒杆菌培养基中加入体积浓度为0.5％～10％的乙醇。本发明显著提高了谷氨酸棒状杆菌的生长和蛋白表达产量，本发明方法绿色环保无毒害、操作简单、成本低、效果好、显著提高谷氨酸棒杆菌的蛋白表达产量，具有巨大的工业应用价值。本发明在培养基中添加1％乙醇促进谷氨酸棒杆菌的生长，同样培养条件下，谷氨酸棒杆菌的重组蛋白表达量提高一倍以上。