公开(公告)号：CN117737031A

公开(公告)日：2024-03-22

申请号：CN202311795604.5

申请日：2023-12-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈鹏程 ,  袁仪霄 ,  万昕玥 ,  郑璞 ,  吴丹

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/62 ,  C12N15/81 ,  C12N11/12 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明涉及一种一步纯化固定化D‑泛解酸内酯水解酶的方法及其应用，本发明在构建热纤维梭菌来源的碳水化合物结合模块24与D‑泛解酸内酯水解酶融合蛋白，并在毕赤酵母表达系统中高密度发酵获得含有大量融合酶D‑泛解酸内酯水解酶‑碳水化合物结合模块的粗酶液，将粗酶液与微晶纤维素混合反应，利用微晶纤维素吸附融合蛋白，即可快速实现一步纯化固定化D‑泛解酸内酯水解酶的制备，不需要进行细胞破碎以及进一步的纯化步骤，且所得D‑泛解酸内酯水解酶在贮存30天后仍保持90％以上酶活性，在循环使用10次时仍保持60％以上酶活性，具有良好的稳定性和可重复利用性。