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公开(公告)号:CN110079585A
公开(公告)日:2019-08-02
申请号:CN201910366401.1
申请日:2012-07-30
Applicant: 株式会社日立制作所
IPC: C12Q1/6837 , C12M1/34 , C12M1/00
Abstract: 本发明涉及基因表达解析方法、基因表达解析用设备及基因表达解析装置。本发明的基因表达解析方法对包含组织或多个细胞的样品中的各个细胞中的生物体分子分别进行解析,该方法包括:将所述样品载置在支撑体上的工序;在所述支撑体中,核酸探针在支撑体表面或表面附近2维地分布并被固定,使所述样品的作为靶的被检核酸与该核酸探针杂交的工序,所述核酸探针包含被检核酸捕捉用序列和具有已知序列且根据在支撑体表面或表面附近的位置的不同而不同的细胞识别用标签序列;进行与上述被检核酸互补的DNA链的合成,制作由包含上述标签序列的DNA互补链构成的cDNA文库的工序;以及对上述cDNA文库的全部或一部分进行核酸扩增的工序。
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公开(公告)号:CN101445828B
公开(公告)日:2012-11-21
申请号:CN200810181551.7
申请日:2008-11-27
Applicant: 株式会社日立制作所
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2545/101 , C12Q2525/161
Abstract: 本发明提供一种核酸的定量方法。本发明提供的方法是克服以往的处方法的缺点、新型简便的DNA定量分析方法。本发明的方法中,制备在靶DNA中导入有单碱基置换的标准DNA试样,将一定量的该试样与靶DNA试样混合,用相同的引物扩增靶DNA和标准DNA,使其包含所述单碱基置换部位,使用结合于所述单碱基置换部位前一个部位的探针,将ddATP、ddGTP、ddCTP、ddTTP一种一种地顺次加入,进行互补链合成反应,通过荧光素酶反应检测来自生成的焦磷酸的发光,由检测的发光量和加入的标准DNA试样的量来对靶DNA进行定量。
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公开(公告)号:CN105026562B
公开(公告)日:2019-06-07
申请号:CN201380073998.1
申请日:2013-03-12
Applicant: 株式会社日立制作所
IPC: C12M1/00 , C12N15/10 , C12Q1/6874
CPC classification number: C12N15/1003 , B01L3/502761 , B01L7/52 , B01L2200/0631 , B01L2200/0668 , B01L2200/10 , B01L2300/0636 , B01L2300/0819 , B01L2300/0851 , B01L2300/0864 , B01L2300/1805 , B01L2400/0421 , C12N15/1096 , C12Q1/6874 , C12Q2539/10
Abstract: 为了对多个细胞中的多个基因进行基因表达,需要在分离细胞后提取基因,进行核酸扩增,通过序列分析进行基因表达分析。然而,细胞的分离对细胞造成损伤,需要使用昂贵的系统。将细胞捕获部和核酸捕获部的一对结构在上下方向上配置,提取细胞的各个基因,在核酸捕获部合成cDNA,扩增核酸,通过第二代测序进行序列分析,从而高精度地进行各个细胞中的基因表达分析。
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公开(公告)号:CN101082062B
公开(公告)日:2011-10-05
申请号:CN200710085091.3
申请日:2007-02-28
Applicant: 株式会社日立制作所
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6811 , C12N15/1096 , C12Q1/6809 , C12Q1/6834 , C12Q2565/537 , C12Q2525/173 , C12Q2521/301 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明的目的在于提供适合进行单个细胞的基因表达的定量解析的方法。本发明提供了一种核酸检测方法,该方法包括:从至少含有单个细胞的试样获取单个细胞的步骤、溶解获取的单个细胞的细胞膜,使该细胞中的核酸溶出的细胞溶解步骤、通过溶出的核酸中的DNA分解酶使DNA分解的步骤、使该单个细胞中所含的RNA中的mRNA与固定在载体上的寡(dT)杂交的步骤、对与寡(dT)杂交了的mRNA进行逆转录反应,制作由来自单个细胞的cDNA固定在载体上得到的来自单个细胞的cDNA固定化载体文库的步骤、和边进行针对固定在载体上的cDNA的扩增反应,边进行扩增量的检测的步骤。
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公开(公告)号:CN105026562A
公开(公告)日:2015-11-04
申请号:CN201380073998.1
申请日:2013-03-12
Applicant: 株式会社日立制作所
CPC classification number: C12N15/1003 , B01L3/502761 , B01L7/52 , B01L2200/0631 , B01L2200/0668 , B01L2200/10 , B01L2300/0636 , B01L2300/0819 , B01L2300/0851 , B01L2300/0864 , B01L2300/1805 , B01L2400/0421 , C12N15/1096 , C12Q1/6874 , C12Q2539/10
Abstract: 为了对多个细胞中的多个基因进行基因表达,需要在分离细胞后提取基因,进行核酸扩增,通过序列分析进行基因表达分析。然而,细胞的分离对细胞造成损伤,需要使用昂贵的系统。将细胞捕获部和核酸捕获部的一对结构在上下方向上配置,提取细胞的各个基因,在核酸捕获部合成cDNA,扩增核酸,通过第二代测序进行序列分析,从而高精度地进行各个细胞中的基因表达分析。
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公开(公告)号:CN104508128A
公开(公告)日:2015-04-08
申请号:CN201280074958.4
申请日:2012-07-30
Applicant: 株式会社日立制作所
CPC classification number: C12Q1/6837 , C12N15/1096 , C12Q2525/155 , C12Q2565/537 , C12Q2565/601
Abstract: 本发明涉及用于解析细胞中的基因表达的方法、设备及装置。具体而言,本发明涉及一种基因表达解析用设备、以及使用该基因表达解析用设备的方法及装置;所述基因表达解析用设备的特征在于,具有在支撑体表面或表面附近2维地分布、固定有核酸探针的支撑体,所述核酸探针包含被检核酸捕捉用序列、具有已知序列且根据在支撑体表面或表面附近的位置的不同而不同的细胞识别用标签序列、和具有已知序列的通用引物序列。
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公开(公告)号:CN102639716A
公开(公告)日:2012-08-15
申请号:CN201080054749.4
申请日:2010-11-29
Applicant: 株式会社日立制作所
IPC: C12Q1/68 , C12N15/09 , G01N33/53 , G01N33/531 , G01N33/543 , G01N37/00
CPC classification number: C12N15/1093 , C12Q1/6809 , C12Q1/6837 , C40B40/08 , C40B50/06 , G01N33/54306 , G01N2458/10 , C12Q2531/125 , C12Q2533/107 , C12Q2565/537
Abstract: 本发明提供用于取出每1个细胞并解析、同时在保存组织的二维信息的形态下定量监视各种基因的表达量的方法和/或手段。具体而言,本发明提供在保持活体组织内的二维细胞分布信息的形态下,由mRNA制备cDNA文库、以1个细胞水平的位置分辨能力获得任意的或作为对象的所有位置的基因表达量的方法。更具体而言,在保持活体组织内的二维细胞分布信息的形态下,由mRNA制备薄片状的cDNA文库,将其重复,用于基因表达的检测步骤,从而能够高精度地对多个基因计测表达分布。
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公开(公告)号:CN106701739A
公开(公告)日:2017-05-24
申请号:CN201611067624.0
申请日:2010-11-29
Applicant: 株式会社日立制作所
IPC: C12N15/10 , C12Q1/68 , C40B40/08 , G01N33/543
CPC classification number: C12N15/1093 , C12Q1/6809 , C12Q1/6837 , C40B40/08 , C40B50/06 , G01N33/54306 , G01N2458/10 , C12Q2531/125 , C12Q2533/107 , C12Q2565/537
Abstract: 本发明提供一种基因表达解析用解析装置及设备,所述解析装置的特征在于,具备:支持体,其是二维地配置有待测核酸捕捉部的支持体,所述待测核酸捕捉部设置于所述支持体的表面和/或内部;供给液体的液体供给部;和进行所述待测核酸的解析的解析部,所述待测核酸为mRNA,所述待测核酸捕捉部具有被固定的核酸探针,利用由所述液体供给部供给的待测核酸提取试剂,将由在所述支持体上位置被固定的细胞提取的待测核酸捕捉到位于所述细胞的下方的所述核酸探针,在所述支持体上,利用由所述液体供给部供给的用于合成互补链的酶,合成被捕捉的所述待测核酸的互补链,来构建cDNA文库。
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公开(公告)号:CN101445828A
公开(公告)日:2009-06-03
申请号:CN200810181551.7
申请日:2008-11-27
Applicant: 株式会社日立制作所
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2545/101 , C12Q2525/161
Abstract: 本发明提供一种核酸的定量方法。本发明提供的方法是克服以往的方法的缺点、新型简便的DNA定量分析方法。本发明的方法中,制备在靶DNA中导入有单碱基置换的标准DNA试样,将一定量的该试样与靶DNA试样混合,用相同的引物扩增靶DNA和标准DNA,使其包含所述单碱基置换部位,使用结合于所述单碱基置换部位前一个部位的探针,将ddATP、ddGTP、ddCTP、ddTTP一种一种地顺次加入,进行互补链合成反应,通过荧光素酶反应检测来自生成的焦磷酸的发光,由检测的发光量和加入的标准DNA试样的量来对靶DNA进行定量。
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公开(公告)号:CN101082062A
公开(公告)日:2007-12-05
申请号:CN200710085091.3
申请日:2007-02-28
Applicant: 株式会社日立制作所
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6811 , C12N15/1096 , C12Q1/6809 , C12Q1/6834 , C12Q2565/537 , C12Q2525/173 , C12Q2521/301 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明的目的在于提供适合进行单个细胞的基因表达的定量解析的方法。本发明提供了一种核酸检测方法,该方法包括:从至少含有单个细胞的试样获取单个细胞的步骤、溶解获取的单个细胞的细胞膜,使该细胞中的核酸溶出的细胞溶解步骤、通过溶出的核酸中的DNA分解酶使DNA分解的DNA分解步骤、使该单个细胞中所含的RNA中的mRNA与固定在载体上的寡(dT)杂交的步骤、对与寡(dT)杂交了的mRNA进行逆转录反应,制作由来自单个细胞的cDNA固定在载体上得到的来自单个细胞的cDNA固定化载体文库的步骤、和边进行针对固定在载体上的cDNA的扩增反应,边进行扩增量的检测的步骤。
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