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公开(公告)号：CN104313111B
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201410551558.9
申请日：2014-10-17
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
IPC: C12Q1/04
Abstract: 本发明涉及甘蔗病害检验技术领域，提出一种用于甘蔗叶部真菌病害菌株致病性评价的感染方法，包括步骤有：菌株的准备、叶片的采集及预处理、感染叶片的准备、感染、培养、菌株的致病性评价，其特征在于：感染叶片的准备步骤是：把叶片剪成4～8 cm的长段，用纸巾包住叶片的两端，放入灭过菌的培养皿内，并往叶片两端的纸巾滴加灭过菌的清水；感染步骤是：用扎孔器对培养皿中的叶片沿叶中脉两侧扎孔，用灭过菌的镊子夹菌丝块放到叶片扎有孔的位置上作为试验培养皿；本发明具有以下突出的实质性特点和显著进步：（1）感染需要的甘蔗叶片和菌丝块少；（2）感染后蔗叶可以控温及双重控湿，保证了病原菌发病对高温高湿的要求；（3）感染后有致病性的菌株发病显著、灵敏度高。
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公开(公告)号：CN101603082A
公开(公告)日：2009-12-16
申请号：CN200910038727.8
申请日：2009-04-17
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明涉及甘蔗种苗的繁殖生产技术领域，提出一种甘蔗宿根矮化病菌的PCR快速检测方法，包括取甘蔗汁、蔗汁预处理、改良优化CTAB法提取RSD的基因组DNA、PCR扩增、电泳检测等步骤，其中电泳检测是将PCR扩增步骤的PCR产物经过5％聚丙烯酰胺凝胶电泳后于0.1％的硝酸银液中染色10分钟，用双蒸水清洗1－2次，然后再于显色液(1.5％NaOH，0.15％甲醛，)显色，后观测结果。本发明有如下突出特点和显著进步：1.检测快速、结果稳定，从大田取蔗汁起到得出检测结果只需8小时，且检测结果稳定。2.可以大批量检测，本发明仅需1～2mL甘蔗蔗汁，蔗汁采集方便不需要特殊设备，操作简单，可以进行批量化检测，一个熟练的技术人员每天可以检测800个以上样品。3.检测结果准确、灵敏度高，本发明在蔗汁前处理中能有效去除甘蔗蔗汁中蔗蜡等次生物质对RSD的DNA影响，获取DNA纯度高，PCR过程干扰较小，RSD的电泳结果准确可靠、灵敏度高。
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公开(公告)号：CN102618648B
公开(公告)日：2013-10-09
申请号：CN201210094927.7
申请日：2012-04-01
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明公开了一种转BT基因甘蔗的检测引物组、检测试剂盒和利用根尖快速鉴定转Bt基因甘蔗的方法。该方法以甘蔗根尖为材料，操作简便，不用提取基因组DNA即可直接进行PCR检测，3小时可以得到检测结果，特异性与灵敏度高，省时省力，而且材料用量极少，不会伤害、影响被取材植株的生长。
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公开(公告)号：CN102204465B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201110099531.7
申请日：2011-04-20
Abstract: 本发明涉及植物抗病性鉴定技术领域，提出一种甘蔗黑穗病抗性鉴定方法，首先用微量新鲜甘蔗黑粉菌冬孢子分离培养出甘蔗黑粉菌异型交配型（+、-）单倍体担孢子，然后经过菌株扩大培养、接种、发病率调查、抗性评价等步骤，本发明具有以下突出的实质性特点和显著的进步：1、只需极少量甘蔗黑粉菌冬孢子经分离培养，即可满足接种需要，工作量小；2、异型交配型菌株能够超低温保存，经活化、扩大培养后可作接种源，无需每次鉴定都重新采取菌种并分离培养；3、本发明抗性鉴定历期短、灵敏性高；4、还可利用本发明的方法，鉴别出参试品种所抗感的黑穗病生理小种类型，有效指导甘蔗抗黑穗病育种及蔗区品种合理配置。
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公开(公告)号：CN102329858A
公开(公告)日：2012-01-25
申请号：CN201110218585.0
申请日：2011-08-02
Abstract: 本发明涉及甘蔗病原菌检测领域，提出甘蔗黑穗病菌巢式PCR快速检测方法，包括基因组DNA提取、第一轮PCR扩增、第二轮PCR扩增、PCR扩增产物检测步骤，其中第一轮PCR扩增中采用真菌核糖体基因转录间隔区ITS的通用引物ITS4和ITS5，第二轮PCR扩增中采用甘蔗黑粉菌核糖体基因转录间隔区ITS的特异引物Smut-L1和Smut-R2，本发明的实质性特点有：1、检测灵敏度极高，即使在甘蔗无黑穗病症状或者感染黑粉菌量极少时也能准确检测出黑穗病菌。2、特异性强，受其他菌类干扰小，准确率高。3、具有耗时短、检测速度快的特点，适用于甘蔗引种检疫、脱毒种苗质量检测及甘蔗黑穗病抗性鉴定早期无症状叶片检测等。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102230018A
公开(公告)日：2011-11-02
申请号：CN201110172722.1
申请日：2011-06-24
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明公开了一种甘蔗宿根矮化病菌巢式PCR快速检测方法。通过提取样品DNA，设计引物进行巢式PCR，可以快速、准确的鉴定甘蔗宿根矮化病菌的存在与否。本发明检测灵敏度为100fg病菌基因组DNA，较同一引物常规PCR灵敏度提高100-1000倍。本发明适用于甘蔗引种检疫、脱毒（菌）种苗生产及蔗区甘蔗宿根矮化病普查等。
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公开(公告)号：CN101401549B
公开(公告)日：2011-10-26
申请号：CN200810218883.8
申请日：2008-11-04
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明涉及一种甘蔗组培一次成苗的方法。以健壮甘蔗的幼嫩心叶或茎尖生长锥作为外植体，一次成苗培养40～50天左右获得带少量蔗根的小苗后，将其转入生根培养基中经10～20天的促根处理后，然后进入炼苗和假植阶段。或在一次性成苗培养基中培养50～70天左右，获得根系长势较好的甘蔗完整小苗后直接进入炼苗和假植阶段。本发明不更换、或只更换一次培养基，有效减少了常规甘蔗侧芽或嫩叶诱导愈伤组织及分化过程中多次转接造成的污染，简化了甘蔗组培苗生产的程序，节约成本，成苗率高，显著缩短了甘蔗组培苗的生产周期，适用于甘蔗种苗工厂化快速繁殖。
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公开(公告)号：CN104313111A
公开(公告)日：2015-01-28
申请号：CN201410551558.9
申请日：2014-10-17
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
IPC: C12Q1/04
Abstract: 本发明涉及甘蔗病害检验技术领域，提出一种用于甘蔗叶部真菌病害菌株致病性评价的感染方法，包括步骤有：菌株的准备、叶片的采集及预处理、感染叶片的准备、感染、培养、菌株的致病性评价，其特征在于：感染叶片的准备步骤是：把叶片剪成4～8cm的长段，用纸巾包住叶片的两端，放入灭过菌的培养皿内，并往叶片两端的纸巾滴加灭过菌的清水；感染步骤是：用扎孔器对培养皿中的叶片沿叶中脉两侧扎孔，用灭过菌的镊子夹菌丝块放到叶片扎有孔的位置上作为试验培养皿；本发明具有以下突出的实质性特点和显著进步：（1）感染需要的甘蔗叶片和菌丝块少；（2）感染后蔗叶可以控温及双重控湿，保证了病原菌发病对高温高湿的要求；（3）感染后有致病性的菌株发病显著、灵敏度高。
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公开(公告)号：CN102329858B
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201110218585.0
申请日：2011-08-02
Abstract: 本发明涉及甘蔗病原菌检测领域，提出甘蔗黑穗病菌巢式PCR快速检测方法，包括基因组DNA提取、第一轮PCR扩增、第二轮PCR扩增、PCR扩增产物检测步骤，其中第一轮PCR扩增中采用真菌核糖体基因转录间隔区ITS的通用引物ITS4和ITS5，第二轮PCR扩增中采用甘蔗黑粉菌核糖体基因转录间隔区ITS的特异引物Smut-L1和Smut-R2，本发明的实质性特点有：1、检测灵敏度极高，即使在甘蔗无黑穗病症状或者感染黑粉菌量极少时也能准确检测出黑穗病菌。2、特异性强，受其他菌类干扰小，准确率高。3、具有耗时短、检测速度快的特点，适用于甘蔗引种检疫、脱毒种苗质量检测及甘蔗黑穗病抗性鉴定早期无症状叶片检测等。
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公开(公告)号：CN102618648A
公开(公告)日：2012-08-01
申请号：CN201210094927.7
申请日：2012-04-01
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明公开了一种转BT基因甘蔗的检测引物组、检测试剂盒和利用根尖快速鉴定转Bt基因甘蔗的方法。该方法以甘蔗根尖为材料，操作简便，不用提取基因组DNA即可直接进行PCR检测，3小时可以得到检测结果，特异性与灵敏度高，省时省力，而且材料用量极少，不会伤害、影响被取材植株的生长。
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