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公开(公告)号:CN102329858B
公开(公告)日:2013-02-13
申请号:CN201110218585.0
申请日:2011-08-02
Abstract: 本发明涉及甘蔗病原菌检测领域,提出甘蔗黑穗病菌巢式PCR快速检测方法,包括基因组DNA提取、第一轮PCR扩增、第二轮PCR扩增、PCR扩增产物检测步骤,其中第一轮PCR扩增中采用真菌核糖体基因转录间隔区ITS的通用引物ITS4和ITS5,第二轮PCR扩增中采用甘蔗黑粉菌核糖体基因转录间隔区ITS的特异引物Smut-L1和Smut-R2,本发明的实质性特点有:1、检测灵敏度极高,即使在甘蔗无黑穗病症状或者感染黑粉菌量极少时也能准确检测出黑穗病菌。2、特异性强,受其他菌类干扰小,准确率高。3、具有耗时短、检测速度快的特点,适用于甘蔗引种检疫、脱毒种苗质量检测及甘蔗黑穗病抗性鉴定早期无症状叶片检测等。
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公开(公告)号:CN102329858A
公开(公告)日:2012-01-25
申请号:CN201110218585.0
申请日:2011-08-02
Abstract: 本发明涉及甘蔗病原菌检测领域,提出甘蔗黑穗病菌巢式PCR快速检测方法,包括基因组DNA提取、第一轮PCR扩增、第二轮PCR扩增、PCR扩增产物检测步骤,其中第一轮PCR扩增中采用真菌核糖体基因转录间隔区ITS的通用引物ITS4和ITS5,第二轮PCR扩增中采用甘蔗黑粉菌核糖体基因转录间隔区ITS的特异引物Smut-L1和Smut-R2,本发明的实质性特点有:1、检测灵敏度极高,即使在甘蔗无黑穗病症状或者感染黑粉菌量极少时也能准确检测出黑穗病菌。2、特异性强,受其他菌类干扰小,准确率高。3、具有耗时短、检测速度快的特点,适用于甘蔗引种检疫、脱毒种苗质量检测及甘蔗黑穗病抗性鉴定早期无症状叶片检测等。
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公开(公告)号:CN101113977B
公开(公告)日:2010-08-18
申请号:CN200710027302.8
申请日:2007-03-27
IPC: G01N33/00
Abstract: 本发明涉及一种转Bt基因甘蔗对螟虫抗性的人工接虫快速鉴定方法,包括温室桶栽甘蔗、虫源选择、人工接虫和抗性评价步骤,其中对同一批待评价的转Bt基因甘蔗品系的试验虫源为同一头甘蔗条螟雌蛾所产卵的初孵幼虫,或将2~3头雌蛾产生的初孵幼虫分别平均分配到每株待测蔗株,对桶栽试验甘蔗进行人工接虫5天后调查结果,根据幼虫的成活率、甘蔗的受害程度综合评价参试甘蔗品系的抗虫性。本发明的最显著的特点是:1. 最大限度地保证试验虫源的一致性和接虫时间的统一性,确保鉴定结果的准确性;2. 抗虫性鉴定周期短,7~10天即可得到试验结果;3. 不存在田间条件下天敌和特殊的天气(如暴风雨)的影响,试验结果可靠;4. 本方法可操作性强。
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公开(公告)号:CN101603082A
公开(公告)日:2009-12-16
申请号:CN200910038727.8
申请日:2009-04-17
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明涉及甘蔗种苗的繁殖生产技术领域,提出一种甘蔗宿根矮化病菌的PCR快速检测方法,包括取甘蔗汁、蔗汁预处理、改良优化CTAB法提取RSD的基因组DNA、PCR扩增、电泳检测等步骤,其中电泳检测是将PCR扩增步骤的PCR产物经过5%聚丙烯酰胺凝胶电泳后于0.1%的硝酸银液中染色10分钟,用双蒸水清洗1-2次,然后再于显色液(1.5%NaOH,0.15%甲醛,)显色,后观测结果。本发明有如下突出特点和显著进步:1.检测快速、结果稳定,从大田取蔗汁起到得出检测结果只需8小时,且检测结果稳定。2.可以大批量检测,本发明仅需1~2mL甘蔗蔗汁,蔗汁采集方便不需要特殊设备,操作简单,可以进行批量化检测,一个熟练的技术人员每天可以检测800个以上样品。3.检测结果准确、灵敏度高,本发明在蔗汁前处理中能有效去除甘蔗蔗汁中蔗蜡等次生物质对RSD的DNA影响,获取DNA纯度高,PCR过程干扰较小,RSD的电泳结果准确可靠、灵敏度高。
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公开(公告)号:CN104341236A
公开(公告)日:2015-02-11
申请号:CN201410351654.9
申请日:2014-07-22
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
IPC: C05G3/00
Abstract: 本发明公开一种利用甘蔗渣作为平菇栽培的基质,按照干重百分比,所述栽培基质包括:甘蔗渣75%~80%,啤酒糟10%~20%,麸皮5%~10%,玉米粉2%~5%,糖0.5%~1%,石灰1%~2%,石膏0%~1%。进一步地,前述的利用甘蔗渣作为平菇栽培的基质的配制方法,其包括以下步骤:(1)将所述甘蔗渣用水充分浸透;(2)拌入所述啤酒糟、麸皮、玉米粉、糖、石灰和石膏,混合均匀,形成基质;(3)将所述基质装入栽培袋;(4)将所述装有基质的栽培袋进行灭菌,冷却待用。本发明的利用甘蔗渣作为平菇栽培基质的配制和使用方法高值化利用了甘蔗渣,降低了平菇生产成本,同时提高了平菇品质。
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公开(公告)号:CN101803574B
公开(公告)日:2012-02-01
申请号:CN201010160577.0
申请日:2010-04-23
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及甘蔗脱毒组培技术领域。提出一种果蔗脱毒组培快繁的方法,其特征在于包括如下步骤:1)植体的选取与灭菌;2)腋芽诱导培养;3)分化培养;4)增殖培养;5)生根培养;6)移栽;7)病毒(菌)检测。其特征在于步骤3)中的分化培养基配方为:MS+TDZ(0.001~0.01)mg/L+IBA(0.02~0.05)mg/L+蔗糖(30~40)g/L+精氨酸(100~150)mg/L+肌醇(100~150)mg/L。本发明以果蔗腋芽为外植体,接种操作容易,成活率高达90%以上。所采用的分化培养基配方,在分化培养过程中能快速使诱导芽分化出丛芽,采用本发明繁殖果蔗脱毒苗速度快,月繁殖系数达5~10倍,适合于大规模工厂化生产。
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公开(公告)号:CN103503775A
公开(公告)日:2014-01-15
申请号:CN201310467648.5
申请日:2013-10-09
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明公开一种甘蔗组培苗钾营养研究方法,包括:配置4种不同钾水平的培养基K1、K2、K3和K4;将不同甘蔗品种ROC22、YT55和YT60的未促根组培苗移植到试管的培养基中,每个试管一株,每一品种对应K1、K2、K3和K4进行4次处理,每一处理重复6次;将用透气封口膜封口且培养基部位包裹有黑色薄膜的试管置于光照培养室,设定温度为26℃,光照度为4000lx,光照时间为12h/天,湿度为80%,培养30-45天;将培养后的组培苗进行生长指标和钾含量测定;对测定结果进行数据的差异显著性分析。通过上述方法,本发明能够得出不同甘蔗品种的组培苗对钾元素的需求量,为培育健壮的甘蔗种苗提供依据。
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公开(公告)号:CN101113977A
公开(公告)日:2008-01-30
申请号:CN200710027302.8
申请日:2007-03-27
IPC: G01N33/00
Abstract: 本发明涉及一种转Bt基因甘蔗对螟虫抗性的人工接虫快速鉴定方法,包括温室桶栽甘蔗、虫源选择、人工接虫和抗性评价步骤,其中对同一批待评价的转Bt基因甘蔗品系的试验虫源为同一头甘蔗条螟雌蛾所产卵的初孵幼虫,或将2~3头雌蛾产生的初孵幼虫分别平均分配到每株待测蔗株,对桶栽试验甘蔗进行人工接虫5天后调查结果,根据幼虫的成活率、甘蔗的受害程度综合评价参试甘蔗品系的抗虫性。本发明的最显著的特点是:1.最大限度地保证试验虫源的一致性和接虫时间的统一性,确保鉴定结果的准确性;2.抗虫性鉴定周期短,7~10天即可得到试验结果;3.不存在田间条件下天敌和特殊的天气(如暴风雨)的影响,试验结果可靠;4.本方法可操作性强。
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公开(公告)号:CN101603082B
公开(公告)日:2012-06-06
申请号:CN200910038727.8
申请日:2009-04-17
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明涉及甘蔗种苗的繁殖生产技术领域,提出一种甘蔗宿根矮化病菌的PCR快速检测方法,包括取甘蔗汁、蔗汁预处理、改良优化CTAB法提取RSD的基因组DNA、PCR扩增、电泳检测等步骤,其中电泳检测是将PCR扩增步骤的PCR产物经过5%聚丙烯酰胺凝胶电泳后于0.1%的硝酸银液中染色10分钟,用双蒸水清洗1-2次,然后再于显色液(1.5%NaOH,0.15%甲醛,)显色,后观测结果。本发明有如下突出特点和显著进步:1.检测快速、结果稳定,从大田取蔗汁起到得出检测结果只需8小时,且检测结果稳定。2.可以大批量检测,本发明仅需1~2mL甘蔗蔗汁,蔗汁采集方便不需要特殊设备,操作简单,可以进行批量化检测,一个熟练的技术人员每天可以检测800个以上样品。3.检测结果准确、灵敏度高,本发明在蔗汁前处理中能有效去除甘蔗蔗汁中蔗蜡等次生物质对RSD的DNA影响,获取DNA纯度高,PCR过程干扰较小,RSD的电泳结果准确可靠、灵敏度高。
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公开(公告)号:CN101361459B
公开(公告)日:2012-03-07
申请号:CN200810198634.7
申请日:2008-09-19
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及甘蔗种苗的繁殖生产,提供一种去除甘蔗宿根矮化病菌、快速繁殖健康甘蔗种苗的方法,包括如下步骤:热水处理少量原种并生产、以其再生植株经斑点酶标免疫试验(DB-EIA)检测为阴性的茎尖为外植体,经诱导培养、继代增殖培养、促根培养、假植及二级或三级苗圃扩繁生产健康种苗,并在苗圃扩繁中注意砍种工具(蔗刀)的消毒,在种苗出圃用于大田生产用种前,抽样取蔗茎汁用DB-EIA检测RSD病菌,确保提供合格种苗。本发明的优点是:能彻底去除甘蔗种苗宿根矮病病原菌,年繁殖系数高达1万倍以上,且种苗无变异,具有快速、高效、安全的优点,适合工厂化、规模化、标准化生产甘蔗健康种苗。
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