一种大鼠腔静脉平滑肌细胞的培养方法

    公开(公告)号:CN101492653B

    公开(公告)日:2011-11-30

    申请号:CN200910037427.8

    申请日:2009-02-26

    Abstract: 本发明公开了一种大鼠腔静脉平滑肌细胞的培养方法,它包括以下步骤:步骤1:从腔静脉组织中分离出中膜组织进行消化得到平滑肌细胞,并进行培养,获取原代培养的大鼠腔静脉平滑肌细胞;步骤2:获取传代培养的大鼠腔静脉平滑肌细胞;其中,所述步骤1从腔静脉组织中分离出中膜组织的具体步骤为:从腔静脉组织中分离出中膜及内膜,放入含氯化钙的HBSS平衡盐溶液中4℃静置20~30min,再放入HBSS平衡溶液中,室温静置10~20min;然后取出翻转管壁,使内表面朝外,再密封管腔;放入消化液中35~37℃消化3-5min,使内膜被消化脱落,去除内膜,得到中膜组织。本发明提供的培养方法稳定性好,重复性好,培养的细胞纯度高,形态均一,生长良好,且具有典型的平滑肌细胞的形态及特点。

    一种大鼠远端肺动脉内皮细胞的培养方法

    公开(公告)号:CN101195815B

    公开(公告)日:2010-09-29

    申请号:CN200710032111.0

    申请日:2007-12-05

    Abstract: 本发明公开了一种大鼠远端肺动脉内皮细胞的培养方法,其包括以下步骤:(1)从健康大鼠心肺组织中获取远端肺动脉;(2)从该远端肺动脉中提取远端肺动脉内皮细胞,并进行原代细胞培养,获得原代培养的大鼠远端肺动脉内皮细胞;(3)将步骤(2)中得到的原代细胞用PBS溶液清洗后,加入0.3~0.5ml 0.1%~0.2%胰蛋白酶溶液20℃~37℃消化2~3分钟,当细胞出现回缩、细胞间隙增大时,吸除胰蛋白酶溶液,加入5ml混合培养液II,轻轻吹灯瓶壁上的细胞,使之形成细胞悬液,接种于新的培养瓶中,每2天换液一次,至细胞生长至对数生长期,即完成传代细胞培养。本发明方法为进一步深入研究肺循环相关疾病、小血管等相关疾病发病机制奠定了条件,提供了丰富的材料来源。

    肺癌组织蛋白印迹膜片及其制备方法

    公开(公告)号:CN101782585A

    公开(公告)日:2010-07-21

    申请号:CN201010114561.6

    申请日:2010-02-10

    Abstract: 本发明涉及一种肺癌组织蛋白印迹膜片及其制备方法,所述的膜片通过肺癌组织蛋白的抽提、电泳分离及转膜制备而成,其特征在于:包括活化聚偏二氟乙烯膜PVDF,在所述活化聚偏二氟乙烯膜PVDF上形成瞬时受体电位通道TRPC6,其分子量位于非预染蛋白分子量标准品120kda与85kda之间;或者在所述活化聚偏二氟乙烯膜PVDF上形成细胞骨架蛋白免疫印迹,其细胞骨架蛋白的位于非预染蛋白分子量标准品40kda之上。本发明保存与运输都十分方便快捷,而且可以多次使用,从而实现了肺癌标本资源与研究的搞笑整合与利用;研究者在得到肺癌免疫印迹膜后只需完成后续的免疫反应即可得到相关的数据,为科学研究节约了时间,也提高了效率。

    一种大鼠原代气道上皮细胞的培养方法

    公开(公告)号:CN102787095A

    公开(公告)日:2012-11-21

    申请号:CN201210233242.6

    申请日:2012-07-06

    Abstract: 本发明公开了一种大鼠原代气道上皮细胞的培养方法,包括以下步骤:(1)大鼠气道组织细胞消化;(2)收集大鼠气道上皮细胞:收集步骤(1)消化处理后的消化液以及清洗的大鼠气道内壁的基础培养基,经离心获得大鼠气道上皮细胞;(3)将步骤(2)中收集所得的大鼠气道组织细胞置于铺有胶原蛋白的培养皿中,在37℃、5%CO2常氧环境下静置培养至获得具有纤毛、功能更接近体内细胞生活状态的大鼠原代气道上皮细胞。本发明可以提高上皮细胞的纯度,细胞具有状态良好,活性强。

    一种大鼠腔静脉平滑肌细胞的培养方法

    公开(公告)号:CN101492653A

    公开(公告)日:2009-07-29

    申请号:CN200910037427.8

    申请日:2009-02-26

    Abstract: 本发明公开了一种大鼠腔静脉平滑肌细胞的培养方法,它包括以下步骤:步骤1:从腔静脉组织中分离出中膜组织进行消化得到平滑肌细胞,并进行培养,获取原代培养的大鼠腔静脉平滑肌细胞;步骤2:获取传代培养的大鼠腔静脉平滑肌细胞;其中,所述步骤1从腔静脉组织中分离出中膜组织的具体步骤为:从腔静脉组织中分离出中膜及内膜,放入含氯化钙的HBSS平衡盐溶液中4℃静置20~30min,再放入HBSS平衡溶液中,室温静置10~20min;然后取出翻转管壁,使内表面朝外,再密封管腔;放入消化液中35~37℃消化3-5min,使内膜被消化脱落,去除内膜,得到中膜组织。本发明提供的培养方法稳定性好,重复性好,培养的细胞纯度高,形态均一,生长良好,且具有典型的平滑肌细胞的形态及特点。

    一种大鼠远端肺动脉内皮细胞的培养方法

    公开(公告)号:CN101195815A

    公开(公告)日:2008-06-11

    申请号:CN200710032111.0

    申请日:2007-12-05

    Abstract: 本发明公开了一种大鼠远端肺动脉内皮细胞的培养方法,其包括以下步骤:(1)从健康大鼠心肺组织中获取远端肺动脉;(2)从该远端肺动脉中提取远端肺动脉内皮细胞,并进行原代细胞培养,获得原代培养的大鼠远端肺动脉内皮细胞;(3)将步骤(2)中得到的原代细胞用PBS溶液清洗后,加入0.3~0.5ml 0.1%~0.2%胰蛋白酶溶液20℃~37℃消化2~3分钟,当细胞出现回缩、细胞间隙增大时,吸除胰蛋白酶溶液,加入5ml混合培养液Ⅱ,轻轻吹灯瓶壁上的细胞,使之形成细胞悬液,接种于新的培养瓶中,每2天换液一次,至细胞生长至对数生长期,即完成传代细胞培养。本发明方法为进一步深入研究肺循环相关疾病、小血管等相关疾病发病机制奠定了条件,提供了丰富的材料来源。

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