人瞬时受体电位通道蛋白荧光定量PCR检测试剂盒及其制备方法和用途

    公开(公告)号:CN101948912A

    公开(公告)日:2011-01-19

    申请号:CN201010198815.7

    申请日:2010-06-10

    Abstract: 本发明涉及人瞬时受体电位通道蛋白荧光定量PCR检测试剂盒及其制备方法和用途,包括盒体,在盒体内设有反应板(1)和阳性对照品(2),其特征是:在反应板(1)中设有若干反应孔(3),反应板(1)包括荧光定量PCR标准曲线反应板(11)和荧光定量PCR待测样品反应板(12);在荧光定量PCR标准曲线反应板(11)、荧光定量PCR待测样品反应板(12)中设有目的基因TRPC1~TRPC7反应混合液和内参基因IP08反应混合液;所述目的基因TRPC1~TRPC7反应混合液和内参基因IP08反应混合液设置在反应孔(3)中。本发明具有制作、保存方便,操作性及重复性好的特点,可以根据TRPC基因研究重点的不同进行多样化设计,能够一次性完成多基因多样本的TRPC相对定量分析。

    一种大鼠原代气道上皮细胞的培养方法

    公开(公告)号:CN102787095A

    公开(公告)日:2012-11-21

    申请号:CN201210233242.6

    申请日:2012-07-06

    Abstract: 本发明公开了一种大鼠原代气道上皮细胞的培养方法,包括以下步骤:(1)大鼠气道组织细胞消化;(2)收集大鼠气道上皮细胞:收集步骤(1)消化处理后的消化液以及清洗的大鼠气道内壁的基础培养基,经离心获得大鼠气道上皮细胞;(3)将步骤(2)中收集所得的大鼠气道组织细胞置于铺有胶原蛋白的培养皿中,在37℃、5%CO2常氧环境下静置培养至获得具有纤毛、功能更接近体内细胞生活状态的大鼠原代气道上皮细胞。本发明可以提高上皮细胞的纯度,细胞具有状态良好,活性强。

    一种人气道上皮细胞的培养方法

    公开(公告)号:CN102433296A

    公开(公告)日:2012-05-02

    申请号:CN201110416809.9

    申请日:2011-12-13

    Abstract: 本发明公开了一种人气道上皮细胞的培养方法,包括以下步骤:(1)获取原代培养的人气道上皮细胞;(2)获取传代培养的人气道上皮细胞:当原代细胞达到70~90%融合密度后,用磷酸缓冲液溶液清洗,加入0.25%胰蛋白酶溶液,室温消化5~10分钟,当细胞出现回缩、悬浮时,收集细胞悬浮液,加入含有蛋白酶抑制剂的等量溶液,离心收集细胞,然后以1~6×106细胞/ml的浓度接种于新的含完全培养基的培养皿中进行培养,3~5天细胞生长至对数生长期,获得传代培养的人气道上皮细胞。本发明的培养方法技术稳定,重复性好,培养的细胞纯度高,形态均一,生长良好,且可以连续传代。

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