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公开(公告)号：CN102719465A
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN201110077001.2
申请日：2011-03-29
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N15/63 , A01K67/027
Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及可诱导性组织特异性表达载体及其用途。本可诱导性组织特异性表达载体，主要包括以下结构：EF1α启动子，EGFP荧光标记基因，两端连有同向LoxP序列的BGHpolyA加尾转录终止序列和内部引入酶切位点的内含子序列；所述载体为pEFGLPAL-MIR，其使用EF1alpha通用启动子驱动基因表达，EGFP荧光标记基因用于指示基因的表达，两段连有同向LoxP71和LoxP66的BDHpolyA加尾转录终止信号，可被Cre酶诱导；在所述的终止信号其后的是一段内含子序列，表达miRNA前体插入该内含子中。本发明中构建的microRNA表达载体可成功的表达特异的microRNA，并可通过多种方法确定microRNA的表达；所述的表达载体在ES细胞中，microRNA表达不容易被沉默，能成功的应用于转基因小鼠的制备。
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公开(公告)号：CN101423552A
公开(公告)日：2009-05-06
申请号：CN200810034154.7
申请日：2008-02-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及应用天然的人源抗体基因库筛选具有抗凝血功能的抗人组织因子Fab片段。本发明通过构建人源抗体基因库并经过ELISA、稀释凝血酶原时间、测序分析等从库中筛选到具有抗凝活性的人源抗人组织因子Fab，命名为hTFFab148，经大量的表达纯化及进一步的鉴定，证实本发明的人源抗组织因子Fab抗体具有抗凝活性且不会产生与传统的抗凝剂组合药物相关的不需要的副作用，并具有超出现有技术的TF抗体的特性。
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公开(公告)号：CN1746305A
公开(公告)日：2006-03-15
申请号：CN200510026232.5
申请日：2005-05-26
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生命科学领域。涉及斑马鱼组织因子途径抑制物－2(zTFPI－2)的基因和蛋白。本发明克隆并鉴定了斑马鱼组织因子途径抑制物－2(zTFPI－2)基因，其编码的蛋白质与人TFPI－2具有很高的同源性，原位杂交证实zTFPI－2基因在斑马鱼发育的特定阶段和特定部位表达。本发明对研究TFPI－2的生理功能，TFPI－2与肿瘤侵袭转移，胚胎发育和伤口愈合的关系提供了实验基础。
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公开(公告)号：CN102719465B
公开(公告)日：2014-01-08
申请号：CN201110077001.2
申请日：2011-03-29
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N15/63 , A01K67/027
Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及可诱导性组织特异性表达载体及其用途。本可诱导性组织特异性表达载体，主要包括以下结构：EF1α启动子，EGFP荧光标记基因，两端连有同向LoxP序列的BGHpolyA加尾转录终止序列和内部引入酶切位点的内含子序列；所述载体为pEFGLPAL-MIR，其使用EF1alpha通用启动子驱动基因表达，EGFP荧光标记基因用于指示基因的表达，两段连有同向LoxP71和LoxP66的BDHpolyA加尾转录终止信号，可被Cre酶诱导；在所述的终止信号其后的是一段内含子序列，表达miRNA前体插入该内含子中。本发明中构建的microRNA表达载体可成功的表达特异的microRNA，并可通过多种方法确定microRNA的表达；所述的表达载体在ES细胞中，microRNA表达不容易被沉默，能成功的应用于转基因小鼠的制备。
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公开(公告)号：CN103014141A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201110288927.6
申请日：2011-09-26
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及筛查多发畸形综合征的探针，尤其涉及用于筛查多发畸形综合征的多重连续探针扩增的组合探针。本发明选择1p36缺失综合征、Sotos综合征、18三体综合征、CHARGE综合征、Williams Beuren综合征、22q11缺失/重复综合征、21三体综合征、Smith Magenis综合征、13三体综合征、Cri du Chat综合征、Prader Willi综合征、WolfHirschhorn综合征和17q21.31缺失综合征的关键基因或关键区域内的基因、或重复/缺失片段内两端的基因，根据所述基因的序列，选择满足相应条件的作为探针序列；在所述的探针左半序列5’端和右半探针3’端加通用引物序列，并加磷酸化标记，合成多重连续探针扩增的组合探针；该探针可用于多发畸形综合征初步筛查。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1176943C
公开(公告)日：2004-11-24
申请号：CN01126949.9
申请日：2001-10-08
Applicant: 复旦大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/09 , C12P21/02 , A61K38/17 , A61P7/02
Abstract: 本发明属生物技术领域，具体涉及具有抗凝和抗栓活性的重组人组织因子途径抑制物活性肽的制备方法及其应用。本发明根据对全长组织因子途径抑制物的结构及其生化特性的分析，设计了新型rhTFPI-AP1和rhTFPI-AP2结构。将突变后组织因子途径抑制物结构域1和结构域2基因与真核表达载体pPIC9K重组，转化甲醇营养型酵母GS115，筛选高表达工程菌。工程菌经发酵扩增，离心收集上清液，经三步法纯化rhTFPI-AP1和rhTFPI-AP2。所得产品冻干后，具有抗凝和抗栓活性，对于预防血栓性疾病的发生有明显的作用。
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公开(公告)号：CN1528894A
公开(公告)日：2004-09-15
申请号：CN03151203.8
申请日：2003-09-25
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术领域，具体涉及长效组织因子途径抑制物(LTFPI)及其制备方法和应用。本发明对组织因子途径抑制物(TFPI)及其受体低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的生物信息学和结构分子生物学分析和实验，确定了TFPI羧基末端与LRP结合并被清除的部位。设计了TFPI羧基末端突变体，通过PCR定点突变构建LTFPI基因后，与原核或真核表达载体重组，转化大肠杆菌或毕赤酵母，筛选高表达工程菌。原核工程菌经发酵扩增，破碎细菌，离心收集包涵体，复性后经分子筛和离子交换二步法纯化LTFPI；真核工程菌直接将上清进行二步纯化。获得的LTFPI半衰期明显延长，具有良好的抗凝功能。
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公开(公告)号：CN117530238A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202210940917.4
申请日：2022-08-07
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及基于同源重组基因编辑技术构建人源化GBA基因F213I突变戈谢氏病小鼠模型的方法及用途。本发明利用构建的人源化GBA基因F213I突变戈谢氏病小鼠模型完成了F213I小鼠胚胎成纤维干细胞的体外同源重组基因编辑修复实验，本发明还构建了GBA基因野生型、部分人源化型以及部分人源化基础上引入F213I突变的过表达载体，并将其转入敲除GBA基因的人293A细胞中使其表达葡萄糖脑苷酶(GCase)，结果显示部分人源化对GCase酶活性影响有限，而引入F213I能够显著降低GCase酶活性。本发明为基因编辑治疗F213I突变戈谢氏病提供了体外实验数据。有助于为戈谢氏病提供一种治疗费用低、疗程短以及具有其他副作用少的新的基因治疗方法。
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公开(公告)号：CN108524952A
公开(公告)日：2018-09-14
申请号：CN201710126646.8
申请日：2017-03-06
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，涉及一种腺相关病毒AAV9及其在制备治疗戈谢氏病的制剂中的用途，本发明中，构建了pAAV-CMV-Gba-MCS-3flag重组质粒表达载体，其中整合入了Gba基因，包装了腺相关病毒AAV9，建立了成年小鼠全身性诱导型戈谢氏病模型，通过腺相关病毒AAV9对戈谢氏实验模型进行干预，能表达野生型β-葡糖脑苷脂酶基因（GBA），补充患者有缺陷的GBA，本发明的干预治疗周期短，治疗效果明显，所需费用仅为酶替代疗法高昂的治疗费用的几百分之一，且本发明对I型、II型和III型戈谢氏病均适用。本发明相较于骨髓移植风险小、治疗所需腺相关病毒相较于骨髓供体更加易获得。本发明的重组质粒包装的腺相关病毒AAV9适用于制备治疗戈谢氏病的制剂。进一步为戈谢氏病提供一种新的干预治疗手段。
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公开(公告)号：CN102719518B
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201110077002.7
申请日：2011-03-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及一种基因诱导DNA去甲基化的检测方法。本发明利用筛选的已确定甲基化状态的细胞株为基础，收集基因与细胞株的混合克隆并测定其DNA甲基化的状态，对比未转基因的细胞株甲基化状态，得到检测结果。本发明还通过构建人工CpG岛报告基因载体PCBS-luc，体外使用甲基转移酶M.SssI对载体进行甲基化处理，并与anti-hygromycin基因表达载体共转HEK293细胞，使用潮酶素B筛选出完全甲基化、部分甲基化和非甲基化的PCBS稳定整合细胞株。本发明可用于观察目标蛋白去甲基化的功能、检测DNA甲基化或去甲基化的功能、观察组蛋白修饰与DNA甲基化之间的关系，还可用于研究环境因子对于细胞DNA甲基化的影响。
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