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公开(公告)号：CN113684186B
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202111060781.X
申请日：2021-09-10
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/12 , C12N15/867 , C12Q1/02 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供了一种可支持乙肝病毒复制和感染的细胞模型及建立方法。本发明的发明人在实验中发现BEL‑7404细胞具有较高的转染效率，在过表达人牛磺胆酸钠共转运体多肽(hNTCP)和肝细胞核因子(HNF4α)基因后可以较好的支持乙肝病毒的复制和感染，以此构建了可稳定表达hNTCP和HNF4α的7404NT‑HNF4α细胞模型，该培养系统可通过在培养基中添加强力霉素(Doxycycline，DOX)来调控HNF4α的表达进而调控HBV的复制和感染，为乙肝病毒的研究提供一种新的细胞模型。
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公开(公告)号：CN115029380B
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202210531625.5
申请日：2022-05-16
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明构建了一种新型冠状病毒SARS‑CoV‑2复制子及其细胞模型，其通过克隆SARS‑CoV‑2基因组的DNA编码序列，删除病毒棘突蛋白基因，并以荧光素酶报告基因置换病毒核衣壳蛋白基因部分序列，在病毒基因组5’和3’末端分别插入CMV启动子和HDVRZ序列，在NSP1基因特定位点插入外源嵌合序列，构建转录模件；在转录模件两侧分别插入绝缘子及转座元件序列。通过设计Cre/LoxP介导DNA重组以及内含子RNA拼接，实现外源基因序列在SARS‑CoV‑2基因组无缝插入；通过PiggyBac转座策略，将完整转录模件整合至宿主细胞染色质，筛选获得稳定的病毒复制子细胞模型，其能够诱导重组病毒RNA自主复制和报告基因表达，可广泛应用于抗SARS‑CoV‑2药物筛选及评价，也为深入的基础病毒学研究提供平台。
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公开(公告)号：CN113201051B
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202110460186.9
申请日：2021-04-27
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及一种乙肝病毒表面蛋白突变体，具体为S蛋白突变体，其能够抑制乙肝病毒(HBV)复制和/或抑制表面抗原(HBsAg)表达及分泌，本发明还涉及与上述S蛋白突变体相关的生物材料及其在抗HBV中的应用。本发明在体外试验中发现S‑L13R/E/D/K突变体可以在Huh7细胞中抑制HBV的复制，抑制HBsAg的表达和分泌；且在Adv/prcccDNA乙肝慢性化小鼠模型中，实现血液HBsAg转阴，在血液中可出现表面抗体HBsAb，HBeAg水平和血清中HBV DNA水平也实现转阴，并且在转阴过程中没有引起明显的ALT上升，证明了其安全性，S蛋白突变体对不同基因型HBV的HBsAg的分泌、不同基因型S蛋白突变体对同一基因型HBV的HBsAg的分泌均具有显著影响，这为临床治疗慢性化乙肝提供了新的方法。
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公开(公告)号：CN111481571A
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201910071666.9
申请日：2019-01-25
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及一种应用于慢性乙肝的体外细胞免疫疗法的组合物，以及一种应用于慢性乙肝的体外细胞免疫疗法的药物的制备方法，以及所述组合物和所述制备方法获得的药物在制备治疗慢性乙肝的体外细胞免疫疗法的药物中的应用；本发明采用HBV慢性化阳性小鼠模型证实了采用所述组合物对HBV慢性化阳性的小鼠模型的脾脏细胞进行体外刺激处理，将刺激后脾脏细胞作为慢性乙肝的体外细胞免疫疗法的药物，回输到HBV慢性化阳性的小鼠模型体内，发现能够显著降低小鼠体内的HBV病毒水平，甚至是清除HBV病毒；为未来慢性乙肝患者的体外细胞免疫疗法奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106148404B
公开(公告)日：2020-01-24
申请号：CN201510132238.4
申请日：2015-03-25
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物医药及基因工程领域，涉及一种基于人乙型肝炎病毒的重组载体，所涉及得病毒基因组相对于野生型人乙型肝炎病毒缺失了乙型肝炎病毒聚合酶的间隔区的部分或者全部及核心蛋白的部分，并在聚合酶起始密码子前插入有核糖体进入位点。本发明还提供了该重组载体的制备方法及其在靶向肝脏或者肝细胞的基因治疗方面的应用。本发明的人乙型肝炎病毒重组载体支持多种外源序列的插入和基因表达；重组乙肝病毒自身无基因组复制能力，但在提供核心蛋白的情况下重组乙肝病毒基因组可高效复制，并在同时提供核心蛋白和表面蛋白的情况下包装、分泌具有感染性的完整重组乙肝病毒颗粒，表明本发明的重组人乙肝病毒载体作为肝脏特异性的基因导入载体具有良好应用前景。
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公开(公告)号：CN108324930A
公开(公告)日：2018-07-27
申请号：CN201710034888.4
申请日：2017-01-18
Applicant: 复旦大学 , 上海科垣生物医药科技有限公司
Abstract: 本发明属基因工程和生物医药领域，涉及白介素21新的药用用途，具体涉及白介素21在制备抗乙型肝炎病毒制剂中的用途。本发明经实验证实，通过使用白介素21对乙型肝炎病毒慢性化感染小鼠模型进行干预，可以显著提高乙肝表面抗原（HBsAg）和乙肝e抗原（HBeAg）的转换率，同时能显著降低血清中乙型肝炎病毒DNA载量。白介素21可作为药物前体用于开发新类型抗乙型肝炎病毒药物。
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公开(公告)号：CN107880117A
公开(公告)日：2018-04-06
申请号：CN201610877014.0
申请日：2016-09-30
Applicant: 复旦大学
CPC classification number: C07K16/082 , A61K39/00 , C07K2317/24 , C07K2317/565 , C07K2317/622
Abstract: 本发明涉及生物医药和基因工程领域，公开了一种针对乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBx)的单克隆抗体(命名为KY02)及其轻链可变区和重链可变区氨基酸序列，本发明还公开了制备HBx单克隆抗体KY02的方法和可生产KY02抗体的杂交瘤细胞系。KY02抗体能够特异性识别乙型肝炎病毒编码的X蛋白，并与其中第81-104位氨基酸区段特异结合，与HBx蛋白其它部位、HBV其它蛋白、FLAG标签和人蛋白组无特异性反应。KY02抗体可用于针对HBx蛋白的免疫检测和特异性细胞靶向，为研发HBV感染及其它相关疾病的诊断和治疗方法提供支持。
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公开(公告)号：CN103468826A
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201210185329.0
申请日：2012-06-06
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及抗体工程和抗病毒医药领域，涉及一种快速有效的测定重组人抗乙型肝炎病毒抗体抗病毒功能的方法。本发明利用沉降性病毒复合物技术，建立了一种检测和评估分子抗病毒能力的新方法。该方法是通过检测受试分子在血清中诱导产生沉降性病原体复合物的能力，检测分子的抗病毒和抗感染能力；所述的病原体是病毒。利用该方法可以快速检测抗体和其它抗感染药物清除病毒和控制病毒感染的能力。本方法操作过程简单，结果重复性好，是对现有抗病毒药物功能性检测和评估方法的补充，该方法的建立为目前还没有有效的细胞和动物感染模型病毒的药物研发，提供了一种新的选择。本发明还涉及抗病毒感染活性的检测试剂、检测过程中出现的沉降性病原体复合物和上述检测方法的应用。
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公开(公告)号：CN102775470A
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201110122517.4
申请日：2011-05-12
Applicant: 复旦大学
IPC: C07K7/06 , C07K7/08 , C07K14/02 , C12N15/51 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12N5/10 , A61K39/29 , A61P31/20 , A61P1/16
Abstract: 本发明属于生物医药领域，涉及一种能抑制人乙型肝炎病毒感染细胞的短肽，该短肽包含以下氨基酸序列中的任意一种：1）N-亮氨酸-精氨酸-天冬酰胺-异亮氨酸-精氨酸-C；2)1）中所示氨基酸序列中有1-2个氨基酸缺失且能抑制人乙型肝炎病毒感染的氨基酸序列；3）1）中所示氨基酸序列中有1-2个氨基酸被替代且能抑制人乙型肝炎病毒感染的氨基酸序列；4）1）中所示氨基酸序列中有1个或多个氨基酸插入且能抑制人乙型肝炎病毒感染的氨基酸序列；5）1）－4）中所示氨基酸序列重复拼接且能抑制人乙型肝炎病毒感染的氨基酸序列。本发明还提供了包括该短肽的氨基酸序列或者核酸编码序列的构建物和细胞及其应用。
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公开(公告)号：CN113862326B
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202111033444.1
申请日：2021-09-03
Applicant: 复旦大学 , 中国科学院分子细胞科学卓越创新中心
Abstract: 本发明公开了KREMEN1和/或ASGR1作为药物靶点在治疗SARS‑CoV‑2感染中的应用。研究发现ASGR1和/或KREMEN1的瞬时表达可导致SARS‑CoV‑2入侵，通过抑制SARS‑CoV‑2的S蛋白与ASGR1和/或KREMEN1的结合可以有效的预防或者治疗SARS‑CoV‑2感染，因此本发明为SARS‑CoV‑2感染的治疗提供新的思路。
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