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公开(公告)号：CN113249417A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110425390.7
申请日：2021-04-20
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物制药技术领域，具体为一种手性顺式‑β‑芳基‑β‑羟基‑α‑氨基酯类化合物的制备方法。本发明采用羰基还原酶催化不对称还原β‑芳基‑β‑氧代‑α‑氨基丙酸酯类化合物（II）生成化合物（I），具体步骤包括：制备含羰基还原酶基因的工程菌和含葡萄糖脱氢酶基因的工程菌；制备两种工程菌的静息细胞悬浊液；制备含羰基还原酶的细胞上清液和含葡萄糖脱氢酶基因的细胞上清液；将上述两种细胞上清液混合，然后再与化合物（II）、溶剂、氢供体和辅因子混合，进行不对称还原反应，制得化合物（I）。本发明方法环境友好、操作简便、易于工业放大，并且底物普适性广，产物收率高，具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN115948356A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202111167493.4
申请日：2021-10-07
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种羰基还原酶突变体及其在制备(R)‑8‑氯‑6‑羟基辛酸酯类化合物中的应用。本发明涉及羰基还原酶经过理性分子改造后催化性能和立体选择性提高的突变体，含有该酶突变体基因的重组表达质粒和重组表达转化体，重组酶的制备方法，以及该重组酶或重组细胞作为催化剂不对称还原8‑氯‑6‑羰基辛酸酯类化合物（I）制备(R)‑8‑氯‑6‑羟基辛酸酯类化合物（II），特别是在硫辛酸中间体(R)‑8‑氯‑6‑羟基辛酸甲酯方面的应用。本发明公开的羰基还原酶SsCR突变体具有反应效率高、催化活力高的优点，在催化制备化合物（II）的过程中展现出底物浓度高、催化剂用量低、反应耗时短等显著优势。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113249417B
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202110425390.7
申请日：2021-04-20
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物制药技术领域，具体为一种手性顺式‑β‑芳基‑β‑羟基‑α‑氨基酯类化合物的制备方法。本发明采用羰基还原酶催化不对称还原β‑芳基‑β‑氧代‑α‑氨基丙酸酯类化合物（II）生成化合物（I），具体步骤包括：制备含羰基还原酶基因的工程菌和含葡萄糖脱氢酶基因的工程菌；制备两种工程菌的静息细胞悬浊液；制备含羰基还原酶的细胞上清液和含葡萄糖脱氢酶基因的细胞上清液；将上述两种细胞上清液混合，然后再与化合物（II）、溶剂、氢供体和辅因子混合，进行不对称还原反应，制得化合物（I）。本发明方法环境友好、操作简便、易于工业放大，并且底物普适性广，产物收率高，具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN116355971A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202111629660.2
申请日：2021-12-28
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种利用羰基还原酶合成泛酸或泛酸酯类化合物的方法。本发明方法步骤为：制备含羰基还原酶基因的质粒与含葡萄糖脱氢酶基因GDH的质粒共表达的转化体；制备含羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶GDH的全细胞的制备方法；将所得共表达的全细胞与底物羰基泛酸酯类化合物、溶剂、氢供体、辅酶因子混合，进行不对称还原反应，得到泛酸或泛酸酯类化合物。本发明方法制备所得的含羰基还原酶SsCR与葡萄糖脱氢酶GDH的全细胞对环境友好、操作简便、易于工业放大，且底物普适性广、高底物浓度、高效、高立体选择性、高收率得到目标化合物（收率高达98%，ee大于99%）；具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN113789353A
公开(公告)日：2021-12-14
申请号：CN202111125131.9
申请日：2021-09-25
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为(2S,3S)‑2‑氯‑3‑羟基酯类化合物的制备方法。本发明采用来源于发酵乳酸杆菌的羰基还原酶催化不对称还原2‑氯‑β‑酮酯类化合物生成化合物(2S,3S)‑2‑氯‑3‑羟基酯类化合物；包括：制备含羰基还原酶的工程菌；制备工程菌的静息细胞悬浊液，并经过超声破碎或者加压破碎后得含羰基还原酶细胞上清液，再与底物2‑氯‑β‑酮酯类化合物、葡萄糖脱氢酶、氢供体、辅因子混合，进行不对称还原反应，制得化合物(I)。本发明方法环境友好、操作简便、易于工业放大，并且底物浓度高、底物普适性广、产物收率高，具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN111686809A
公开(公告)日：2020-09-22
申请号：CN202010570195.9
申请日：2020-06-21
Applicant: 复旦大学
IPC: B01J31/06 , C07C67/31 , C07C69/732
Abstract: 本发明属于生物制药技术领域，具体公开一种羰基还原酶/异丙醇脱氢酶共固载催化剂及其制备方法和应用。本发明将羰基还原酶和异丙醇脱氢酶共包埋于由聚乙烯醇和聚乙二醇所得的固相载体中，所得共固载酶催化剂通过羰基还原酶的催化以及异丙醇脱氢酶对于辅酶NADPH的循环，可实现3-羰基-5-己烯酸酯的高效、高立体选择性还原生成（R）-3-羟基-5-己烯酸酯。该催化剂可用于以3-羰基-5-己烯酸酯为底物制备（R）-3-羟基-5-己烯酸酯中，本发明方法制备的共固载催化剂催化效率高、稳定性好、可重复使用、工艺简洁、成本低廉，具有优良的实际工业应用价值。
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公开(公告)号：CN112375801A
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN202011136206.9
申请日：2020-10-22
Applicant: 复旦大学
IPC: C12P41/00 , C12P7/62 , C12N11/089 , C12N11/084 , C12M1/40 , C12M1/38 , C12M1/24 , C12M1/00
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体为一种微反应系统及使用其连续制备(R)‑3‑羟基‑5‑己烯酸酯的方法。本发明先将羰基还原酶和异丙醇脱氢酶同时负载于惰性固体介质上制成羰基还原酶/异丙醇脱氢酶的共固载催化剂，然后将其填充于微通道反应器内，继而将含3‑羰基‑5‑己烯酸酯的底物液泵入其中进行连续酶催化不对称还原反应即得(R)‑3‑羟基‑5‑己烯酸酯。与现有技术相比，本发明方法的反应时间仅几分钟，产物(R)‑3‑羟基‑5‑己烯酸酯的收率大于95%，工艺过程连续，自动化程度高，时空产率高，且操作简便，无需反应液与催化剂的分离步骤，成本低，易于工业化生产。
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