公开(公告)号：CN113549041A

公开(公告)日：2021-10-26

申请号：CN202110840573.5

申请日：2021-07-24

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陈芬儿 ,  竺科杰 ,  黄则度

IPC: C07D307/935 ,  B01J31/22

Abstract: 本发明属于有机化学技术领域，具体为一种一步法制备取代苯甲酰科立内酯的方法。本方法是以科立内酯二醇为原料，将其加入至预先搅拌的金属铜盐与N，O‑配体的催化反应体系中，再向反应混合体系中加入反应所需要的碱，最后加入取代苯甲酰氯进行仲羟基位置的酰化反应，一步法高效的制备出取代苯甲酰科立内酯。此方法高效便捷，操作简单，反应条件温和，金属与配体廉价易得，反应的区域选择性高，避免伯醇保护剂的使用，降低成本，适合工业化制备。

公开(公告)号：CN111575326A

公开(公告)日：2020-08-25

申请号：CN202010409629.7

申请日：2020-05-14

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陈芬儿 ,  竺科杰 ,  黄则度 ,  程荡 ,  王佳琦 ,  陶媛

IPC: C12P17/04 ,  C12N15/70 ,  C12N9/02 ,  C12N9/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物制药技术领域，具体为酶催化的（1S，5R）-双环内酯的合成方法。本方法包括：制备含拜尔-维立格单氧化酶的工程菌；制备工程菌的静息细胞悬浊液，并经过超声破碎或者加压破碎后得含拜尔-维立格单氧化酶细胞上清液，再与底物消旋取代双环[3.2.0]-庚-2-烯-6-酮、氢供体、辅因子混合，进行不对称拜尔-维立格氧化，制得（1S，5R）-双环内酯；拜尔-维立格单氧化酶的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示；该方法可催化外消旋的取代双环[3.2.0]-庚-2-烯-6-酮(II)生成手性的（1S，5R）-双环内酯，所用工程菌方便易得，产物便于分离且对映选择性高。

公开(公告)号：CN112795602B

公开(公告)日：2022-08-19

申请号：CN202110112747.6

申请日：2021-01-27

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陈芬儿 ,  黄则度 ,  竺科杰 ,  孟歌 ,  程荡 ,  梁观峰

IPC: C12P17/04 ,  C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物制药技术领域，具体为一种前列腺素中间体15α‑羟基内酯的不对称还原合成方法。本发明包括：制备羰基还原酶的工程菌；制备工程菌的静息细胞悬浊液，并经过超声破碎或者加压破碎后得到含羰基还原酶的细胞上清液；经过蛋白纯化得到羰基还原酶的纯蛋白酶液；再与底物15‑羰基前列腺素中间体（II）、葡萄糖脱氢酶、助溶剂、葡萄糖、辅因子混合，进行不对称羰基还原反应,制得15α‑羟基前列腺素中间体（I）。所用羰基还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明可催化还原15‑羰基前列腺素中间体（II）生成手性15α‑羟基前列腺素中间体（I），所用生物催化剂方便易得，产物分离收率高、对映选择性优异。

公开(公告)号：CN112795602A

公开(公告)日：2021-05-14

申请号：CN202110112747.6

申请日：2021-01-27

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陈芬儿 ,  黄则度 ,  竺科杰 ,  孟歌 ,  程荡 ,  梁观峰

IPC: C12P17/04 ,  C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物制药技术领域，具体为一种前列腺素中间体15α‑羟基内酯的不对称还原合成方法。本发明包括：制备羰基还原酶的工程菌；制备工程菌的静息细胞悬浊液，并经过超声破碎或者加压破碎后得到含羰基还原酶的细胞上清液；经过蛋白纯化得到羰基还原酶的纯蛋白酶液；再与底物15‑羰基前列腺素中间体（II）、葡萄糖脱氢酶、助溶剂、葡萄糖、辅因子混合，进行不对称羰基还原反应,制得15α‑羟基前列腺素中间体（I）。所用羰基还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明可催化还原15‑羰基前列腺素中间体（II）生成手性15α‑羟基前列腺素中间体（I），所用生物催化剂方便易得，产物分离收率高、对映选择性优异。