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公开(公告)号：CN107312835B
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN201710479590.4
申请日：2017-06-22
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明公开了一种一种肝组织FAM176A基因和/或其编码的FAM176A蛋白作为抗乙型肝炎病毒的靶点的应用或作为在制备抗乙型肝炎病毒药物中的应用，本发明发现肝组织FAM176A基因编码的跨膜蛋白FAM176A能抑制HBV的复制，在细胞体外实验及动物体内试验中均验证FAM176A能抑制HBV的复制，并且预测了FAM176A蛋白结构，同时发现FAM176A蛋白的跨膜区是其抑制HBV复制的关键功能域，这为进一步开发新的抗HBV药物提供了新的靶点，具有十分广泛的医疗应用前景。
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公开(公告)号：CN107655982A
公开(公告)日：2018-02-02
申请号：CN201610585146.6
申请日：2016-07-23
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明属医学检验领域，涉及用液相色谱串联质谱法检测血浆中替比夫定含量的方法。本方法中待测样品不需经氮气吹干，直接乙腈稀释/沉淀蛋白后取上清液进样，经流动相在色谱柱洗脱分离，用串联质谱检测器检测；本方法中采用氘3-替比夫定(D3-LdT)为内标，血样加入定量的乙腈沉淀蛋白，在血浆样品处理中灭活病毒后替比夫定无明显降解，保证方法的准确度同时提高操作者的安全性。本方法中采用串联质谱法测定替比夫定和内标的浓度，定量线性范围为10-10000ng/mL，能满足人体药代动力学研究的要求。本方法样品取样少，预处理简单、快速、灵敏，只需通用型的设备和试剂，分析周期短，成本低，适用于乙肝患者治疗方案的调整以及常规血药浓度的监测。
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公开(公告)号：CN103361314A
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201210103594.X
申请日：2012-04-10
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属生物技术、微生物动物细胞系领域，涉及一种稳定高复制rtN236T耐ADV HBV变异株细胞系及其用途。本发明采用HBV真核表达质粒pREP-HBV-WT，定点诱变为阿德福韦耐药基因型N236T后插入切除RSV启动子的pREP10构建成HBV真核表达质粒pREP-HBV-N236T，转染HepG2细胞后通过潮霉素筛选，建立耐药HBV细胞克隆株HepG2.HS236T。该细胞株的保藏编号：CGMCC No.5830，分类命名：人肝癌细胞株。该耐药HBV细胞克隆株pREP-HBV-N236T能持续表达HBsAg及HBeAg，胞内HBV复制较高，并可以产生感染性HBV颗粒。该细胞系表达HBsAg及HBeAg明显高于Hep2.2.15，细胞上清HBV颗粒水平高于HepG2.2.15；能用于筛选抗药物、研究HBV生物学特点及其与细胞间相互作用的HBV细胞模型的建立。
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公开(公告)号：CN102816737A
公开(公告)日：2012-12-12
申请号：CN201110153531.0
申请日：2011-06-09
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属微生物动物细胞系领域，涉及一种基于HepG2稳定表达HBV野生株细胞系，尤其涉及一种高表达野生型HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HSWT及其制备方法。本发明将HBV真核表达质粒pREP-HBV-WT转染HepG2细胞后，通过潮霉素筛选，检测细胞中HBV复制、特异性抗原的表达及病毒颗粒的产生，获得高表达野生型HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HSWT；所述的细胞株其表达HBsAg、HBeAg水平明显高于HepG2.2.15，表达水平稳定，受培养环境等因素影响少，整合的HBV基因型为B或C基因型，所述的细胞对LAM及ADV均敏感，HBV胞内复制水平随LAM及ADV浓度上升逐步下降。本发明的基于HepG2稳定表达HBV野生株细胞系，可用于中国人群HBV发病或耐药机制的研究和可用于筛选抗HBV药物。
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公开(公告)号：CN102643858A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201110039085.0
申请日：2011-02-16
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于医药及基因工程领域，涉及一种基于人乙型肝炎病毒的重组载体，该病毒基因组相对于野生型乙型肝炎病毒载体，缺失乙型肝炎病毒聚合酶的间隔区的部分或者全部。本发明还提供了该重组载体的制备方法及其在靶向肝脏或者肝细胞的基因治疗方面的应用。本发明的人乙肝病毒重组载体能使插入的外源基因表达，重组乙肝病毒可高效复制，并在提供表面蛋白的情况下形成完整的重组乙肝病毒颗粒，表明本发明的重组人乙肝病毒载体作为肝脏特异性的基因导入载体的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101004415B
公开(公告)日：2011-07-27
申请号：CN200710036511.9
申请日：2007-01-16
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: G01N33/48 , G01N27/447 , C12Q1/18
Abstract: 本发明属医学检验领域，涉及药物耐药基因的检测方法，具体涉及一种测定乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异的方法。本发明方法克服现有技术的缺陷，通过设计特定引物，采用套式PCR方法进行扩增，所获扩增产物使用BglI、BseDI进行酶切反应电泳后，进行限制性片断长度多态性分析。经检测20余例长期使用阿德福韦抗病毒治疗的患者，和已知发生ADV耐药的质粒，与现有技术进行比较，显示结果完全相符。本发明方法可以一次同时检测181位和236位核苷酸变异情况，具有灵敏、特异、简便的特点，适用于阿德福韦酯耐药变异的临床监测工作。
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公开(公告)号：CN117599182A
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202311595341.3
申请日：2023-11-27
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及肌节同源盒基因1(MSX1)的一种新药用用途，其为乙型肝炎病毒的一种新的宿主限制因子。MSX1与HNF4α竞争结合MRE，具体为通过HO结构域与MRE结合导致MRE上的HNF4α富集减少，从而抑制EnII/Cp活性和病毒cccDNA转录；MSX1表达与患者HBV基因表达和复制呈负相关；体内实验表明：人MSX1能够在病毒亚基因组和/或全基因组水平上抑制Cp活性，AAV介导的人MSX1过表达降低了HBV基因表达和病毒基因组复制，且肝脏中rcccDNA或BPS的消失反映了近40％‑50％的小鼠HBV治愈。上述MSX1可作为治疗乙型肝炎病毒感染的药物靶点，用于开发新类型的抗乙型肝炎病毒药物。
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公开(公告)号：CN107312835A
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201710479590.4
申请日：2017-06-22
Applicant: 复旦大学附属华山医院
CPC classification number: C12Q1/6883 , A61K38/1709 , A61K48/005 , C12Q2600/106 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种肝组织FAM176A基因和/或其编码的FAM176A蛋白作为抗乙型肝炎病毒的靶点的应用或作为在制备抗乙型肝炎病毒药物中的应用，本发明发现肝组织FAM176A基因编码的跨膜蛋白FAM176A能抑制HBV的复制，在细胞体外实验及动物体内试验中均验证FAM176A能抑制HBV的复制，并且预测了FAM176A蛋白结构，同时发现FAM176A蛋白的跨膜区是其抑制HBV复制的关键功能域，这为进一步开发新的抗HBV药物提供了新的靶点，具有十分广泛的医疗应用前景。
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公开(公告)号：CN102643858B
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201110039085.0
申请日：2011-02-16
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于医药及基因工程领域，涉及一种基于人乙型肝炎病毒的重组载体，该病毒基因组相对于野生型乙型肝炎病毒载体，缺失乙型肝炎病毒聚合酶的间隔区的部分或者全部。本发明还提供了该重组载体的制备方法及其在靶向肝脏或者肝细胞的基因治疗方面的应用。本发明的人乙肝病毒重组载体能使插入的外源基因表达，重组乙肝病毒可高效复制，并在提供表面蛋白的情况下形成完整的重组乙肝病毒颗粒，表明本发明的重组人乙肝病毒载体作为肝脏特异性的基因导入载体的应用前景。
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公开(公告)号：CN102807971A
公开(公告)日：2012-12-05
申请号：CN201210175021.8
申请日：2012-05-31
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属微生物动物细胞系领域，涉及基于HepG2稳定高表达HBV YVDD变异株细胞系，具体涉及基于HepG2稳定高表达耐拉米夫定HBV病毒肝癌细胞株，尤其涉及高表达耐拉米夫定HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HS204V及其制备方法。该细胞株能持续表达HBsAg及HBeAg且高于Hep2.2.15，胞内有HBV复制，并产生HBV颗粒，细胞上清HBV颗粒水平与Hep2.2.15基本持平，该细胞对LAM不敏感而对ADV敏感；HBV胞内复制水平随LAM浓度上升无明显下降，随ADV浓度上升逐步下降。本发明的细胞株可用于筛选抗HBV药物、研究HBV生物学特点及其与细胞间相互作用的HBV细胞模型。
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