公开(公告)号：CN101004415B

公开(公告)日：2011-07-27

申请号：CN200710036511.9

申请日：2007-01-16

Applicant: 复旦大学附属华山医院

Inventor： 张继明 ,  毛日成 ,  尹有宽 ,  王新宇

IPC: G01N33/48 ,  G01N27/447 ,  C12Q1/18

Abstract: 本发明属医学检验领域，涉及药物耐药基因的检测方法，具体涉及一种测定乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异的方法。本发明方法克服现有技术的缺陷，通过设计特定引物，采用套式PCR方法进行扩增，所获扩增产物使用BglI、BseDI进行酶切反应电泳后，进行限制性片断长度多态性分析。经检测20余例长期使用阿德福韦抗病毒治疗的患者，和已知发生ADV耐药的质粒，与现有技术进行比较，显示结果完全相符。本发明方法可以一次同时检测181位和236位核苷酸变异情况，具有灵敏、特异、简便的特点，适用于阿德福韦酯耐药变异的临床监测工作。

公开(公告)号：CN101988129A

公开(公告)日：2011-03-23

申请号：CN200910055836.0

申请日：2009-08-03

Applicant: 复旦大学附属华山医院

Inventor： 张继明 ,  刘红艳 ,  李义良 ,  毛日成 ,  尹永喜 ,  夏佳慧 ,  范丽丽 ,  李新艳

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属医学领域，涉及乙肝病毒阿德福韦耐药变异株的检测探针及其应用方法。本发明的乙肝病毒阿德福韦耐药变异株的检测探针，是SEQ ID NO 6、SEQ ID NO 7、SEQ ID NO 8、SEQ ID NO 9、SEQ ID NO 10、SEQ ID NO 11、SEQID NO 12、SEQ ID NO 13、SEQ ID NO 14、SEQ ID NO 15、SEQ ID NO 16、SEQ IDNO 17、SEQ ID NO 18或者SEQID NO 19中的一种或者几种。将本发明的检测探针与液相芯片技术结合，可以快速、准确确定样本的乙肝病毒拉米夫定耐药性，特异性高、灵敏度好、检测通量大，大大节约了确定耐药变异株种类所需的成本。

公开(公告)号：CN108441578A

公开(公告)日：2018-08-24

申请号：CN201710080657.7

申请日：2017-02-15

Applicant: 复旦大学附属华山医院

Inventor： 张继明 ,  江培学 ,  毛日成

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/706 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2563/159 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2545/114

Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及一种检测乙型肝炎病毒共价闭合环状脱氧核糖核酸的方法以及试剂盒。本发明采用专用组织DNA提取试剂盒提取HBV DNA，并采用选择性荧光定量PCR技术对乙型肝炎病毒cccDNA进行检测，核酸提取后，采用PSAD酶处理，及采用数字微滴PCR方法扩增目的基因并直接定量，提高检测灵敏性和特异性，检测结果表明，能对HBVcccDNA进行准确定量分析，明显优于一般方法，具有特异性好，灵敏度高，定量准确，快速简便，重复性好的特点，本发明的方法及试剂盒可用于HBVcccDNA检测，也可作为临床实验室对HBV感染的辅助诊断方法和临床治疗效果的监测手段。

公开(公告)号：CN101988130A

公开(公告)日：2011-03-23

申请号：CN200910055837.5

申请日：2009-08-03

Applicant: 复旦大学附属华山医院

Inventor： 张继明 ,  刘红艳 ,  李义良 ,  毛日成 ,  尹永喜 ,  夏佳慧 ,  范丽丽 ,  李新艳

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属医学领域，涉及乙肝病毒拉米夫定耐药变异株的检测探针及其应用方法。本发明的乙肝病毒拉米夫定耐药变异株的检测探针，是SEQ ID NO12、SEQ ID NO 13、SEQ ID NO 14、SEQ ID NO 15、SEQ ID NO 16、SEQIDNO 17、SEQ ID NO 18或者SEQ ID NO 19中的一种或者几种。将本发明的检测探针与液相芯片技术结合，可以快速、准确确定样本的乙肝病毒拉米夫定耐药性，特异性高、灵敏度好、检测通量大，大大节约了确定耐药变异株种类所需的成本。

公开(公告)号：CN101004415A

公开(公告)日：2007-07-25

申请号：CN200710036511.9

申请日：2007-01-16

Applicant: 复旦大学附属华山医院

Inventor： 张继明 ,  毛日成 ,  尹有宽 ,  王新宇

IPC: G01N33/48 ,  G01N27/447 ,  C12Q1/18

Abstract: 本发明属医学检验领域，涉及药物耐药基因的检测方法，具体涉及一种测定乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异的方法。本发明方法克服现有技术的缺陷，通过设计特定引物，采用套式PCR方法进行扩增，所获扩增产物使用BglI、BseDI进行酶切反应电泳后，进行限制性片断长度多态性分析。经检测20余例长期使用阿德福韦抗病毒治疗的患者，和已知发生ADV耐药的质粒，与现有技术进行比较，显示结果完全相符。本发明方法可以一次同时检测181位和236位核苷酸变异情况，具有灵敏、特异、简便的特点，适用于阿德福韦酯耐药变异的临床监测工作。