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公开(公告)号：CN107312835B
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN201710479590.4
申请日：2017-06-22
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明公开了一种一种肝组织FAM176A基因和/或其编码的FAM176A蛋白作为抗乙型肝炎病毒的靶点的应用或作为在制备抗乙型肝炎病毒药物中的应用，本发明发现肝组织FAM176A基因编码的跨膜蛋白FAM176A能抑制HBV的复制，在细胞体外实验及动物体内试验中均验证FAM176A能抑制HBV的复制，并且预测了FAM176A蛋白结构，同时发现FAM176A蛋白的跨膜区是其抑制HBV复制的关键功能域，这为进一步开发新的抗HBV药物提供了新的靶点，具有十分广泛的医疗应用前景。
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公开(公告)号：CN107655982A
公开(公告)日：2018-02-02
申请号：CN201610585146.6
申请日：2016-07-23
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明属医学检验领域，涉及用液相色谱串联质谱法检测血浆中替比夫定含量的方法。本方法中待测样品不需经氮气吹干，直接乙腈稀释/沉淀蛋白后取上清液进样，经流动相在色谱柱洗脱分离，用串联质谱检测器检测；本方法中采用氘3-替比夫定(D3-LdT)为内标，血样加入定量的乙腈沉淀蛋白，在血浆样品处理中灭活病毒后替比夫定无明显降解，保证方法的准确度同时提高操作者的安全性。本方法中采用串联质谱法测定替比夫定和内标的浓度，定量线性范围为10-10000ng/mL，能满足人体药代动力学研究的要求。本方法样品取样少，预处理简单、快速、灵敏，只需通用型的设备和试剂，分析周期短，成本低，适用于乙肝患者治疗方案的调整以及常规血药浓度的监测。
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公开(公告)号：CN103361314A
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201210103594.X
申请日：2012-04-10
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属生物技术、微生物动物细胞系领域，涉及一种稳定高复制rtN236T耐ADV HBV变异株细胞系及其用途。本发明采用HBV真核表达质粒pREP-HBV-WT，定点诱变为阿德福韦耐药基因型N236T后插入切除RSV启动子的pREP10构建成HBV真核表达质粒pREP-HBV-N236T，转染HepG2细胞后通过潮霉素筛选，建立耐药HBV细胞克隆株HepG2.HS236T。该细胞株的保藏编号：CGMCC No.5830，分类命名：人肝癌细胞株。该耐药HBV细胞克隆株pREP-HBV-N236T能持续表达HBsAg及HBeAg，胞内HBV复制较高，并可以产生感染性HBV颗粒。该细胞系表达HBsAg及HBeAg明显高于Hep2.2.15，细胞上清HBV颗粒水平高于HepG2.2.15；能用于筛选抗药物、研究HBV生物学特点及其与细胞间相互作用的HBV细胞模型的建立。
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公开(公告)号：CN102816737A
公开(公告)日：2012-12-12
申请号：CN201110153531.0
申请日：2011-06-09
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属微生物动物细胞系领域，涉及一种基于HepG2稳定表达HBV野生株细胞系，尤其涉及一种高表达野生型HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HSWT及其制备方法。本发明将HBV真核表达质粒pREP-HBV-WT转染HepG2细胞后，通过潮霉素筛选，检测细胞中HBV复制、特异性抗原的表达及病毒颗粒的产生，获得高表达野生型HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HSWT；所述的细胞株其表达HBsAg、HBeAg水平明显高于HepG2.2.15，表达水平稳定，受培养环境等因素影响少，整合的HBV基因型为B或C基因型，所述的细胞对LAM及ADV均敏感，HBV胞内复制水平随LAM及ADV浓度上升逐步下降。本发明的基于HepG2稳定表达HBV野生株细胞系，可用于中国人群HBV发病或耐药机制的研究和可用于筛选抗HBV药物。
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公开(公告)号：CN101004415B
公开(公告)日：2011-07-27
申请号：CN200710036511.9
申请日：2007-01-16
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: G01N33/48 , G01N27/447 , C12Q1/18
Abstract: 本发明属医学检验领域，涉及药物耐药基因的检测方法，具体涉及一种测定乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异的方法。本发明方法克服现有技术的缺陷，通过设计特定引物，采用套式PCR方法进行扩增，所获扩增产物使用BglI、BseDI进行酶切反应电泳后，进行限制性片断长度多态性分析。经检测20余例长期使用阿德福韦抗病毒治疗的患者，和已知发生ADV耐药的质粒，与现有技术进行比较，显示结果完全相符。本发明方法可以一次同时检测181位和236位核苷酸变异情况，具有灵敏、特异、简便的特点，适用于阿德福韦酯耐药变异的临床监测工作。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107312835A
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201710479590.4
申请日：2017-06-22
Applicant: 复旦大学附属华山医院
CPC classification number: C12Q1/6883 , A61K38/1709 , A61K48/005 , C12Q2600/106 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种肝组织FAM176A基因和/或其编码的FAM176A蛋白作为抗乙型肝炎病毒的靶点的应用或作为在制备抗乙型肝炎病毒药物中的应用，本发明发现肝组织FAM176A基因编码的跨膜蛋白FAM176A能抑制HBV的复制，在细胞体外实验及动物体内试验中均验证FAM176A能抑制HBV的复制，并且预测了FAM176A蛋白结构，同时发现FAM176A蛋白的跨膜区是其抑制HBV复制的关键功能域，这为进一步开发新的抗HBV药物提供了新的靶点，具有十分广泛的医疗应用前景。
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公开(公告)号：CN102807971A
公开(公告)日：2012-12-05
申请号：CN201210175021.8
申请日：2012-05-31
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属微生物动物细胞系领域，涉及基于HepG2稳定高表达HBV YVDD变异株细胞系，具体涉及基于HepG2稳定高表达耐拉米夫定HBV病毒肝癌细胞株，尤其涉及高表达耐拉米夫定HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HS204V及其制备方法。该细胞株能持续表达HBsAg及HBeAg且高于Hep2.2.15，胞内有HBV复制，并产生HBV颗粒，细胞上清HBV颗粒水平与Hep2.2.15基本持平，该细胞对LAM不敏感而对ADV敏感；HBV胞内复制水平随LAM浓度上升无明显下降，随ADV浓度上升逐步下降。本发明的细胞株可用于筛选抗HBV药物、研究HBV生物学特点及其与细胞间相互作用的HBV细胞模型。
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公开(公告)号：CN102329888A
公开(公告)日：2012-01-25
申请号：CN201010533880.0
申请日：2010-11-05
Applicant: 上海复星医学科技发展有限公司 , 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明涉及一种乙型肝炎病毒cccDNA荧光定量PCR检测方法及其试剂盒组成，首先，检索到人体乙型肝炎病毒基因组全序列，针对其保守序列设计出一对引物和一条TaqMvan荧光染料标记的探针，采用实时荧光定量PCR方法扩增目的基因。本发明采用Plasmid-Safe ATP-dependent DNase(PSBD)酶进行酶切处理样本DNA，提高检测的特异性和灵敏性。
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公开(公告)号：CN101988129A
公开(公告)日：2011-03-23
申请号：CN200910055836.0
申请日：2009-08-03
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属医学领域，涉及乙肝病毒阿德福韦耐药变异株的检测探针及其应用方法。本发明的乙肝病毒阿德福韦耐药变异株的检测探针，是SEQ ID NO 6、SEQ ID NO 7、SEQ ID NO 8、SEQ ID NO 9、SEQ ID NO 10、SEQ ID NO 11、SEQID NO 12、SEQ ID NO 13、SEQ ID NO 14、SEQ ID NO 15、SEQ ID NO 16、SEQ IDNO 17、SEQ ID NO 18或者SEQID NO 19中的一种或者几种。将本发明的检测探针与液相芯片技术结合，可以快速、准确确定样本的乙肝病毒拉米夫定耐药性，特异性高、灵敏度好、检测通量大，大大节约了确定耐药变异株种类所需的成本。
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公开(公告)号：CN102807971B
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201210175021.8
申请日：2012-05-31
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属微生物动物细胞系领域，涉及基于HepG2稳定高表达HBV YVDD变异株细胞系，具体涉及基于HepG2稳定高表达耐拉米夫定HBV病毒肝癌细胞株，尤其涉及高表达耐拉米夫定HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HS204V及其制备方法。该细胞株能持续表达HBsAg及HBeAg且高于Hep2.2.15，胞内有HBV复制，并产生HBV颗粒，细胞上清HBV颗粒水平与Hep2.2.15基本持平，该细胞对LAM不敏感而对ADV敏感；HBV胞内复制水平随LAM浓度上升无明显下降，随ADV浓度上升逐步下降。本发明的细胞株可用于筛选抗HBV药物、研究HBV生物学特点及其与细胞间相互作用的HBV细胞模型。
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