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公开(公告)号:CN103772086A
公开(公告)日:2014-05-07
申请号:CN201410011435.6
申请日:2014-01-10
Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所 , 中国大洋矿产资源研究开发协会
IPC: C07B63/00 , B01J20/281
Abstract: 本发明所述一种海洋微生物小分子代谢产物馏分制备的前处理工艺,包括以下步骤:1)用物理方法直接对发酵液进行细胞破壁处理;2)破壁处理后的发酵液用管式离心机进行固液分离;或是破壁处理后的发酵液按比例添加入硫酸铝溶液,一定温度下搅拌后,对发酵液进行絮凝;3)采用碟片式膜过滤器过滤经离心固液分离的发酵液或是经硫酸铝絮凝的发酵液;4)滤过的发酵液用大孔树脂层析柱吸附富集小分子代谢产物;5)待滤过液过完柱后,用纯净水过柱;6)用含水有机溶剂洗脱吸附于大孔树脂载体上的小分子代谢产物。实现海洋微生物发酵液的快速过滤与浓缩,小分子代谢产物富集基本不损失,洗脱获得的小分子代谢产物浓缩后可直接用于色谱分离制备。
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公开(公告)号:CN102851351A
公开(公告)日:2013-01-02
申请号:CN201210346418.9
申请日:2012-09-18
Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所
Abstract: 本发明涉及一种快速筛选抗黑曲霉的活性物质的方法。包括将待筛选样品,刃天青,黑曲霉孢子菌悬液加入到96微孔板中,在37℃恒温培养箱中培养一定时间,其中设置阴性对照和阳性对照;优选培养12-36h;得到结果;然后根据结果筛选出抗黑曲霉的活性物质。当微孔板的颜色为蓝色或紫色,酶标仪测量荧光值低于15000,抑制率为40%以上时,所检测的样品为抗黑曲霉的活性物质。该方法简便,快速,准确。
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公开(公告)号:CN105506145B
公开(公告)日:2019-04-23
申请号:CN201610048293.X
申请日:2016-01-25
Applicant: 厦门大学 , 国家海洋局第三海洋研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/89
Abstract: 本发明公开了一种鉴定珊瑚共生光合藻类快速分裂型的引物、探针及鉴定方法。所述引物为SEQ ID NO:2‑3,探针为SEQ ID NO:4;或引物和探针分别为SEQ ID NO:5‑7;或引物和探针分别为SEQ ID NO:8‑10;或引物和探针分别为SEQ ID NO:11‑13;或引物和探针分别为SEQ ID NO:14‑16;或引物和探针分别为SEQ ID NO:17‑19;所述探针的5’端、3’端分别用FAM报导荧光染料和TAMRA淬灭基团标记。可进行珊瑚共生光合藻类快速分裂型的定性和定量鉴定。
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公开(公告)号:CN106831981B
公开(公告)日:2018-07-06
申请号:CN201611104480.1
申请日:2016-12-05
Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所
IPC: C07K16/00
Abstract: 本发明公开了一种单域抗体蛋白骨架及其制备方法。其单域抗体蛋白骨架序列组成依次为FR1,CDR1,FR2,CDR3和FR3区,其中FR1、FR2、FR3区为固定氨基酸序列,CDR1和CDR3区为抗体互补决定区,其氨基酸序列可变,CDR1和CDR3区决定与不同的抗原结合。所述单域抗体来源于条纹斑竹鲨。所述单域抗体蛋白骨架的分子量只有13kD左右,同时条纹斑竹鲨与人的物种亲缘差异更大,能产生更高亲和力的单域抗体。同时条纹斑竹鲨便于饲养。
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公开(公告)号:CN106566895A
公开(公告)日:2017-04-19
申请号:CN201610928347.1
申请日:2016-10-31
Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所
Abstract: 本发明公开了一种同时检测鲤科疱疹病毒Ι型、Ⅱ型和Ⅲ型的PCR引物、试剂盒及用途。所述引物为CyHV‑F和CyHV‑R,序列如SEQ ID NO:1和2所示。采用本发明的引物进行检测,不与其它病毒发生交叉反应,假阳性率低,可同时快速、准确、简便检测并区分三种类型鲤科疱疹病毒CyHV‑Ⅰ、CyHV‑Ⅱ和CyHV‑Ⅲ。为鲤科疱疹病毒病的早期诊断和预防防治提供分子生物学技术依据。具有广泛适用性和实用性。
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公开(公告)号:CN106086200A
公开(公告)日:2016-11-09
申请号:CN201610531787.3
申请日:2016-07-04
Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种用于建立珊瑚游离和内寄生共生藻丰度以及珊瑚白化警示系数H的技术指标的方法。方法为:珊瑚生长的海域海洋环境游离状态共生藻丰度指标建立、珊瑚体内寄生状态的共生藻丰度指标的建立、珊瑚白化警示系数H的建立。本发明所述方法可对各类海水野外样品和水族馆的实验样品采集的海水都可以准确测定,在时间和空间动态都能进行长期和短期的监测,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN105567875A
公开(公告)日:2016-05-11
申请号:CN201610119826.9
申请日:2016-03-03
Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明公开了一种同时检测对虾IMNV、YHV和TSV的多重PCR检测引物及试剂盒。所述引物分别为IMNV-F和IMNV-R、YHV-F和YHV-R、TSV-F和TSV-R,序列如SEQ ID NO:1和2,SEQ ID NO:3和4,SEQ ID NO:5和6所示。本发明的引物彼此间无交叉,且不与其它病毒产生交叉,假阳性率低,能够特异性的检测出分布于世界各地不同地区的3种病毒的病毒株,具有广泛适用性,具有非常高的特异性和敏感性,检测限低。同时对检测的病毒基因片段无需再进行克隆、测序和序列比对。一次实验即可检测出待测样品中是否含有这三种病毒中的一种、两种或三种。
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公开(公告)号:CN103238565B
公开(公告)日:2015-03-04
申请号:CN201210537815.4
申请日:2012-12-13
Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所 , 厦门大学
IPC: C12N15/12 , A01K67/033
Abstract: 本发明涉及一种筛选EphB4激酶活性抑制剂的转基因果蝇模型及其构建方法。将质粒注射到yw果蝇胚胎中,羽化的雌蝇与yw野生型雄蝇杂交后羽化的雄蝇与yw野生型雌蝇杂交,所得子代红眼雄性果蝇与雌性GMR-Gal4处女蝇杂交得子I代果蝇,挑子I代果蝇的处女蝇与yw/Y;+/Cyo雄蝇杂交,后代翘翅rougheye的雄蝇即为转基因果蝇模型中雄性果蝇;用所得雄性果蝇与+/FM7;+/Cyo雌性果蝇杂交,后代bar眼、翘翅、rougheye雌蝇再与模型中的雄性果蝇杂交,后代无bar眼、翘翅、rougheye的雌蝇即为转基因果蝇模型中雌性果蝇。本发明的果蝇模型可用于更快和方便的筛选有针对性的药物。
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公开(公告)号:CN103911394A
公开(公告)日:2014-07-09
申请号:CN201410093680.6
申请日:2014-03-14
Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所
Abstract: 本发明公开了一种从海洋微生物发酵液中筛选1-脱氧木酮糖-5磷酸消旋酶抑制剂的方法,具体为:1)海洋微生物发酵液样品的制备:接种真菌,发酵,提取代谢产物,浓缩,洗脱;2)以创伤弧菌全基因组为模板,设计引物PCR扩增后,克隆入载体,转化大肠杆菌后诱导目的蛋白表达,目的蛋白经洗脱,透析,超滤,除盐得到His-DXR;3)将菌悬液、刃天青溶液和1)所得进行反应后测定其荧光值并通过公式计数出抑制率,筛选出抑制率在80%以上的馏分;4)将步骤3)筛选的馏分与步骤2)所得His-DXR进行反应,计算抑制率;筛选出抑制率≥50%的馏分。本方法简单准确,为发现以Dxr为靶点的新型抗菌药物或先导化合物奠定基础。
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公开(公告)号:CN103238565A
公开(公告)日:2013-08-14
申请号:CN201210537815.4
申请日:2012-12-13
Applicant: 国家海洋局第三海洋研究所 , 厦门大学
IPC: A01K67/033
Abstract: 本发明涉及一种筛选EphB4激酶活性抑制剂的转基因果蝇模型及其构建方法。将质粒注射到yw果蝇胚胎中,羽化的雌蝇与yw野生型雄蝇杂交后羽化的雄蝇与yw野生型雌蝇杂交,所得子代红眼雄性果蝇与雌性GMR-Gal4处女蝇杂交得子I代果蝇,挑子I代果蝇的处女蝇与yw/Y;+/Cyo雄蝇杂交,后代翘翅rougheye的雄蝇即为转基因果蝇模型中雄性果蝇;用所得雄性果蝇与+/FM7;+/Cyo雌性果蝇杂交,后代bar眼、翘翅、rougheye雌蝇再与模型中的雄性果蝇杂交,后代无bar眼、翘翅、rougheye的雌蝇即为转基因果蝇模型中雌性果蝇。本发明的果蝇模型可用于更快和方便的筛选有针对性的药物。
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