一种筛选EphB4激酶活性抑制剂的转基因果蝇模型及其构建方法

    公开(公告)号:CN103238565A

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN201210537815.4

    申请日:2012-12-13

    Abstract: 本发明涉及一种筛选EphB4激酶活性抑制剂的转基因果蝇模型及其构建方法。将质粒注射到yw果蝇胚胎中,羽化的雌蝇与yw野生型雄蝇杂交后羽化的雄蝇与yw野生型雌蝇杂交,所得子代红眼雄性果蝇与雌性GMR-Gal4处女蝇杂交得子I代果蝇,挑子I代果蝇的处女蝇与yw/Y;+/Cyo雄蝇杂交,后代翘翅rougheye的雄蝇即为转基因果蝇模型中雄性果蝇;用所得雄性果蝇与+/FM7;+/Cyo雌性果蝇杂交,后代bar眼、翘翅、rougheye雌蝇再与模型中的雄性果蝇杂交,后代无bar眼、翘翅、rougheye的雌蝇即为转基因果蝇模型中雌性果蝇。本发明的果蝇模型可用于更快和方便的筛选有针对性的药物。

    一种从海洋微生物发酵液中筛选1-脱氧木酮糖-5磷酸消旋酶抑制剂的方法

    公开(公告)号:CN103911394A

    公开(公告)日:2014-07-09

    申请号:CN201410093680.6

    申请日:2014-03-14

    Abstract: 本发明公开了一种从海洋微生物发酵液中筛选1-脱氧木酮糖-5磷酸消旋酶抑制剂的方法,具体为:1)海洋微生物发酵液样品的制备:接种真菌,发酵,提取代谢产物,浓缩,洗脱;2)以创伤弧菌全基因组为模板,设计引物PCR扩增后,克隆入载体,转化大肠杆菌后诱导目的蛋白表达,目的蛋白经洗脱,透析,超滤,除盐得到His-DXR;3)将菌悬液、刃天青溶液和1)所得进行反应后测定其荧光值并通过公式计数出抑制率,筛选出抑制率在80%以上的馏分;4)将步骤3)筛选的馏分与步骤2)所得His-DXR进行反应,计算抑制率;筛选出抑制率≥50%的馏分。本方法简单准确,为发现以Dxr为靶点的新型抗菌药物或先导化合物奠定基础。

    一种快速筛选抗黑曲霉的活性物质的方法

    公开(公告)号:CN102851351A

    公开(公告)日:2013-01-02

    申请号:CN201210346418.9

    申请日:2012-09-18

    Abstract: 本发明涉及一种快速筛选抗黑曲霉的活性物质的方法。包括将待筛选样品,刃天青,黑曲霉孢子菌悬液加入到96微孔板中,在37℃恒温培养箱中培养一定时间,其中设置阴性对照和阳性对照;优选培养12-36h;得到结果;然后根据结果筛选出抗黑曲霉的活性物质。当微孔板的颜色为蓝色或紫色,酶标仪测量荧光值低于15000,抑制率为40%以上时,所检测的样品为抗黑曲霉的活性物质。该方法简便,快速,准确。

    一种从海洋微生物发酵液中筛选1-脱氧木酮糖-5磷酸消旋酶抑制剂的方法

    公开(公告)号:CN103911394B

    公开(公告)日:2018-06-19

    申请号:CN201410093680.6

    申请日:2014-03-14

    Abstract: 本发明公开了一种从海洋微生物发酵液中筛选1‑脱氧木酮糖‑5磷酸消旋酶抑制剂的方法,具体为,1)海洋微生物发酵液样品的制备:接种真菌,发酵,提取代谢产物,浓缩,洗脱;2)以创伤弧菌全基因组为模板,设计引物PCR扩增后,克隆入载体,转化大肠杆菌后诱导目的蛋白表达,目的蛋白经洗脱,透析,超滤,除盐得到His‑DXR;3)将菌悬液、刃天青溶液和1)所得进行反应后测定其荧光值并通过公式计数出抑制率,筛选出抑制率在80%以上的馏分;4)将步骤3)筛选的馏分与步骤2)所得His‑DXR进行反应,计算抑制率;筛选出抑制率≥50%的馏分。本方法简单准确,为发现以Dxr为靶点的新型抗菌药物或先导化合物奠定基础。

    一种从钙化组织中提取RNA的方法

    公开(公告)号:CN103667258A

    公开(公告)日:2014-03-26

    申请号:CN201310648321.8

    申请日:2013-12-06

    Abstract: 本发明公开了一种从钙化组织中提取RNA的方法。其方法步骤为:将钙化组织在液氮中进行研磨直到块状直径小于0.5cm的颗粒时,加入Trizol,再加液氮继续研磨成粉末状,直至直径约1mm或小于1mm为止;再将所得粉末转移到RNase-Free的小管中,加入Trizol消化裂解细胞;将上述小管离心后将上清转移到新的小管;上清加入氯仿处理后离心,将最上层的水相转移到另一新的小管,加入75%乙醇溶液,轻轻混匀沉淀核酸;然后转移到试剂盒的吸附柱上,静置后离心,RNA结合到吸附柱上;用试剂盒溶液洗涤;再进行洗脱即得到钙化组织总RNA。得到的钙化组织总RNA的收率高,纯度高、质量、完整性好。

    一种同时检测对虾HPV、MBV和IHHNV的多重PCR检测引物、试剂盒及用途

    公开(公告)号:CN105316330B

    公开(公告)日:2019-03-05

    申请号:CN201510833901.3

    申请日:2015-11-26

    Abstract: 本发明公开了一种同时检测对虾HPV、MBV和IHHNV的多重PCR检测引物、试剂盒及用途。所述引物分别为HPV‑F和HPV‑R、MBV‑F和MBV‑R、IHHNV‑F和IHHNV‑R,序列如SEQ ID NO:1和2,SEQ ID NO:3和4,SEQ ID NO:5和6所示。本发明的引物彼此间无交叉,且不与其它病毒产生交叉,假阳性率低,能够特异性的检测出分布于世界各地不同地区的3种病毒的病毒株,具有广泛适用性,具有非常高的特异性和敏感性,检测限低。同时对检测的病毒基因片段无需再进行克隆、测序和序列比对。一次实验即可检测出待测样品中是否含有这三种病毒中的一种、两种或三种。

    一种同时检测对虾HPV、MBV和IHHNV的多重PCR检测引物、试剂盒及用途

    公开(公告)号:CN105316330A

    公开(公告)日:2016-02-10

    申请号:CN201510833901.3

    申请日:2015-11-26

    Abstract: 本发明公开了一种同时检测对虾HPV、MBV和IHHNV的多重PCR检测引物、试剂盒及用途。所述引物分别为HPV-F和HPV-R、 MBV-F和MBV-R、IHHNV-F和IHHNV-R,序列如SEQ ID NO:1和 2,SEQ ID NO:3和 4,SEQ ID NO:5和 6所示。本发明的引物彼此间无交叉,且不与其它病毒产生交叉,假阳性率低,能够特异性的检测出分布于世界各地不同地区的3种病毒的病毒株,具有广泛适用性,具有非常高的特异性和敏感性,检测限低。同时对检测的病毒基因片段无需再进行克隆、测序和序列比对。一次实验即可检测出待测样品中是否含有这三种病毒中的一种、两种或三种。

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