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公开(公告)号：CN106085963A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610259046.4
申请日：2016-04-25
Applicant: 同济大学苏州研究院
IPC: C12N5/10 , C12N15/867
CPC classification number: C12N5/0693 , C12N15/86 , C12N2510/00 , C12N2740/15043 , C12N2800/107
Abstract: 一种用于PD研究的HSP70干扰稳定细胞系及其建立方法本发明针对HSP70在PD疾病发生发展中的作用尚未完全清楚，需要多种研究方法进一步明确的情况，通过构建针对HSP70的RNA干扰慢病毒表达质粒载体，建立干扰质粒稳定转染的SH‑SY5Y细胞系。本发明采用的技术方法:设计并合成多个针对hsp70基因的RNA干扰序列,并将其插入真核表达慢病毒载体，通过与包装质粒共转染293T细胞后进行荧光定量PCR检测目的基因表达水平，筛选出有效干扰质粒；通过慢病毒感染法将该有效干扰质粒稳定转染至SH‑SY5Y细胞系，通过携带的GFP荧光筛选获得稳转细胞系，荧光定量PCR检测验证。该细胞系与亲本细胞系相比具有类似的生长曲线。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105925533A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610254095.9
申请日：2016-04-23
Applicant: 同济大学苏州研究院
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12Q1/02
CPC classification number: C07K14/43595 , C12N15/86 , C12N2740/15043 , G01N33/5011 , G01N33/5029
Abstract: 本发明涉及一种表达绿色荧光蛋白的哺乳动物肿瘤细胞系A549‑GFP的制备方法和应用，该细胞系与亲本细胞系相比具有类似的生长曲线，在细胞迁移实验中，HGF引起的细胞迁移效应显著，小分子特异性抑制剂对HGF引起的细胞迁移效应抑制效应显著，以上生物学活性与亲本细胞系一致。本发明制备的细胞模型，是将绿色荧光蛋白（GFP）基因通过慢病毒感染的方式插入哺乳动物肿瘤细胞系的基因组内，获得的稳定表达绿色荧光蛋白的细胞系，该细胞模型在细胞迁移实验中可以通过直接荧光显微镜观察的方式来显示实验结果，简化了该细胞模型应用于高通量药物筛选的步骤。
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公开(公告)号：CN105924524A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610254063.9
申请日：2016-04-23
Applicant: 同济大学苏州研究院
IPC: C07K16/28 , C12N15/13 , A61K39/395 , A61P35/00
CPC classification number: C07K16/2863 , A61K39/00 , C07K2317/24 , C07K2317/56
Abstract: 本发明公开了一种重组抗人c‑Met嵌合抗体，其重链可变区核酸序列如SEQ ID:1所示，轻链可变区核酸序列如SEQ ID NO:2所示；其重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID:3所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；其完整重链核酸序列如SEQ ID:5所示，完整轻链核酸序列如SEQ ID:6所示；其完整重链氨基酸序列如SEQ ID:7所示，完整轻链氨基酸序列如SEQ ID:8所示。本发明所公开的嵌合抗体能特异性与人c‑Met结合，在筛选阻断HGF/c‑Met信号转导通路进而抑制肿瘤生长的中和抗体药物研发方面具有重大作用。
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公开(公告)号：CN105924523A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610254061.X
申请日：2016-04-23
Applicant: 同济大学苏州研究院
IPC: C07K16/28 , C12N15/13 , A61K39/395 , A61P35/00 , G01N33/574
CPC classification number: C07K16/2863 , A61K39/00 , C07K2317/56 , C07K2317/622
Abstract: 本发明公开了一种重组抗人c‑Met单链抗体，其重链可变区核酸序列如SEQ ID:1所示，轻链可变区核酸序列如SEQ ID NO:2所示；其重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID:3所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；其完整单链抗体核酸序列如SEQ ID:5所示，完整单链抗体氨基酸序列如SEQ ID:6所示。本发明所公开的单链抗体能特异性与人c‑Met结合，在筛选阻断HGF/c‑Met信号转导通路进而抑制肿瘤生长的中和抗体药物研发方面具有重大作用。
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公开(公告)号：CN115073603B
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202210681591.8
申请日：2022-06-15
Applicant: 同济大学苏州研究院
IPC: C07K16/28 , C12N15/13 , C12N15/867 , C12N5/10 , A61K39/395 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种改良c‑Met中和抗体及其制备方法和应用。属于生物制药技术领域。本发明通过抗体的随机突变库和细胞展示技术，对具有中和活性的激动型c‑Met抗体进行结构和活性优化，获得高亲和低激动活性的抗体，并保持亲本抗体的中和及内化活性，提高c‑Met抗体的成药性。获得的突变抗体2G5纯化效果好，IC50为41.53ng/ml，与c‑Met胞外区结合能力强。阻断ELISA实验结果显示，突变抗体2G5具有显著的中和活性，在A549细胞中，抗体引起显著的内化效应。突变抗体2G5不能激活起A549细胞c‑Met信号通路，不能引起HUVEC细胞增殖和A549细胞迁移。获得了成药性更高的突变型抗体。
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公开(公告)号：CN115073603A
公开(公告)日：2022-09-20
申请号：CN202210681591.8
申请日：2022-06-15
Applicant: 同济大学苏州研究院
IPC: C07K16/28 , C12N15/13 , C12N15/867 , C12N5/10 , A61K39/395 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种改良c‑Met中和抗体及其制备方法和应用。属于生物制药技术领域。本发明通过抗体的随机突变库和细胞展示技术，对具有中和活性的激动型c‑Met抗体进行结构和活性优化，获得高亲和低激动活性的抗体，并保持亲本抗体的中和及内化活性，提高c‑Met抗体的成药性。获得的突变抗体2G5纯化效果好，IC50为41.53ng/ml，与c‑Met胞外区结合能力强。阻断ELISA实验结果显示，突变抗体2G5具有显著的中和活性，在A549细胞中，抗体引起显著的内化效应。突变抗体2G5不能激活起A549细胞c‑Met信号通路，不能引起HUVEC细胞增殖和A549细胞迁移。获得了成药性更高的突变型抗体。
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