包含5’端特定种子碱基序列的miR的应用、改良的雪旺细胞及其应用

    公开(公告)号:CN109694882B

    公开(公告)日:2020-10-16

    申请号:CN201811610192.2

    申请日:2018-12-27

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供包含5’端特定种子碱基序列的miR的应用、改良的雪旺细胞及其应用,涉及中枢神经系统损伤修复技术领域。包含5’端特定种子碱基序列的miR在促进雪旺细胞与星形胶质细胞相容整合中的应用,所述5’端特定种子碱基序列为UAAGGCAC或AAGGCAC。实验表明,雪旺细胞中人为提高包含5’端特定种子碱基序列的成熟体miR表达水平后,改良的雪旺细胞中胶质细胞相关基因表达显著降低,NT‑3和BDNF神经营养因子基因表达显著提高,且改良的雪旺细胞与星形胶质细胞相容整合。所述改良的雪旺细胞能够抑制星形胶质细胞的细胞,促进雪旺细胞和星形胶质细胞间相互整合,进而降低星形胶质细胞导致的胶质瘢痕形成。

    包含5’端特定种子碱基序列的miR的应用、改良的雪旺细胞及其应用

    公开(公告)号:CN109694882A

    公开(公告)日:2019-04-30

    申请号:CN201811610192.2

    申请日:2018-12-27

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供包含5’端特定种子碱基序列的miR的应用、改良的雪旺细胞及其应用,涉及中枢神经系统损伤修复技术领域。包含5’端特定种子碱基序列的miR在促进雪旺细胞与星形胶质细胞相容整合中的应用,所述5’端特定种子碱基序列为UAAGGCAC或AAGGCAC。实验表明,雪旺细胞中人为提高包含5’端特定种子碱基序列的成熟体miR表达水平后,改良的雪旺细胞中胶质细胞相关基因表达显著降低,NT-3和BDNF神经营养因子基因表达显著提高,且改良的雪旺细胞与星形胶质细胞相容整合。所述改良的雪旺细胞能够抑制星形胶质细胞的细胞,促进雪旺细胞和星形胶质细胞间相互整合,进而降低星形胶质细胞导致的胶质瘢痕形成。

    一种悬浮-贴壁法制备饲养层细胞的方法

    公开(公告)号:CN104531609A

    公开(公告)日:2015-04-22

    申请号:CN201410752404.6

    申请日:2014-12-10

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种悬浮-贴壁法制备饲养层细胞的方法,包括CF-1 MEFs原代获取、CF-1 MEFs传代培养和CF-1 MEF Feeder制备三个步骤;制备CF-1 MEF Feeder时采用悬浮-贴壁法,即CF-1 MEFs第3代细胞经消化形成单细胞悬液,然后以细胞贴壁后铺满培养瓶/皿的密度加至培养瓶/皿,并于培养箱中进行贴壁处理后加入MMC;MMC处理0.5小时~3.5小时后,迅速吸弃培养皿中含MMC的培养液及未贴壁细胞,只回收贴壁细胞作为Feeder。本发明方法既能充分抑制细胞有丝分裂,又能筛选出状态良好的细胞作为Feeder,提高Feeder的质量,同时可克服由于MEFs增殖速度过快,最佳处理时间不易掌握的缺点,使CF-1 MEF Feeder制备时间更灵活方便。

    一种诱导促炎星形胶质细胞向抗炎表型转型的间充质干细胞外泌体试剂、诱导方法和应用

    公开(公告)号:CN117357561A

    公开(公告)日:2024-01-09

    申请号:CN202311309104.6

    申请日:2023-10-11

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种诱导促炎星形胶质细胞向抗炎表型转型的间充质干细胞外泌体试剂、诱导方法和应用,属于生物医药技术领域。本发明提供了一种诱导促炎A1型星形胶质细胞向抗炎A2表型转型的间充质干细胞外泌体试剂,通过将过表达miR‑124或miR‑124mimic的间充质干细胞外泌体与星形胶质细胞共孵育,改变星形胶质细胞的极化表型和细胞学特性,减轻星形胶质细胞A1型所带来的相关促炎反应,诱导星形胶质细胞向A2型极化并发挥抗炎作用,促进炎症性损伤的再生修复。本发明制备过程简单,表达稳定,制备体系易于质量控制,易于产业化。

    一种炎症条件下诱导巨噬细胞体外转型的试剂、诱导方法和应用

    公开(公告)号:CN116240169A

    公开(公告)日:2023-06-09

    申请号:CN202310243645.7

    申请日:2023-03-15

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种炎症条件下诱导巨噬细胞体外转型的试剂、诱导方法和应用,属于生物医药技术领域。本发明提供了一种炎症条件下诱导巨噬细胞体外转型的试剂,所述试剂对PTBP1具有抑制作用。本发明提供了一种炎症条件下M1型巨噬细胞诱导为M2型巨噬细胞的新方法,通过抑制PTBP1的基因表达和/或蛋白表达,改变巨噬细胞的极化表型和细胞学特性,减轻巨噬细胞M1型所带来的相关促炎反应,诱导巨噬细胞向M2型极化并发挥抗炎作用,促进炎症性损伤的再生修复。本发明所述试剂以及M2型巨噬细胞的制备过程简单,表达稳定,制备体系易于质量控制,易于产业化。

    含miR-124的胶质瘤细胞外泌体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN113082216B

    公开(公告)日:2022-07-01

    申请号:CN202110446548.9

    申请日:2021-04-25

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了含miR‑124的胶质瘤细胞外泌体及其制备方法和应用,属于中枢神经系统损伤修复药物技术领域。含miR‑124的胶质瘤细胞外泌体的制备方法,将胶质瘤细胞系培养得到的上清液经固液分离;将分离的外泌体和miR‑124混合,共同孵育,得到含miR‑124的胶质瘤细胞外泌体。上述制备的外泌体可有效与胆固醇修饰的miR‑124相结合并被反应性星形胶质细胞吸收,显著提升反应性星形胶质细胞中miR‑124表达,具有抑制星形胶质细胞活化及瘢痕形成的作用。因此,本发明还提供了含miR‑124的胶质瘤细胞外泌体在制备抑制星形胶质细胞活化和/或胶质瘢痕形成的药物中的应用,进而治疗中枢神经损伤疾病。

    含miR-124的胶质瘤细胞外泌体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN113082216A

    公开(公告)日:2021-07-09

    申请号:CN202110446548.9

    申请日:2021-04-25

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了含miR‑124的胶质瘤细胞外泌体及其制备方法和应用,属于中枢神经系统损伤修复药物技术领域。含miR‑124的胶质瘤细胞外泌体的制备方法,将胶质瘤细胞系培养得到的上清液经固液分离;将分离的外泌体和miR‑124混合,共同孵育,得到含miR‑124的胶质瘤细胞外泌体。上述制备的外泌体可有效与胆固醇修饰的miR‑124相结合并被反应性星形胶质细胞吸收,显著提升反应性星形胶质细胞中miR‑124表达,具有抑制星形胶质细胞活化及瘢痕形成的作用。因此,本发明还提供了含miR‑124的胶质瘤细胞外泌体在制备抑制星形胶质细胞活化和/或胶质瘢痕形成的药物中的应用,进而治疗中枢神经损伤疾病。

    一种将人成纤维细胞高效大量重编程为成熟神经元的方法

    公开(公告)号:CN110408594A

    公开(公告)日:2019-11-05

    申请号:CN201910701425.8

    申请日:2019-07-31

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开的属于生物细胞技术领域,具体为一种将人成纤维细胞高效大量重编程为成熟神经元的方法,S1:培养人包皮成纤维细胞(HFFs):①将儿童术后包皮置于F12完全培养基(95%DMEM/F12和5%PS);②在超净工作台中将包皮剪开铺展,1%PS的PBS洗两遍,用眼科剪除去皮下脂肪组织,剪成3mmˉ3mm大小,0.2%中性蛋白酶覆盖4℃过夜;S2:将HFFs重编程为神经细胞,本方法~1KPa的I型胶原基质(Collagen type I,Col)可以促进人成纤维重编程为成熟神经细胞;可以获得接近100%Tuj1+的神经细胞,效率高;10天即可获得表达SYN的成熟神经细胞,时间短。

    一种悬浮-贴壁法制备饲养层细胞的方法

    公开(公告)号:CN104531609B

    公开(公告)日:2017-11-03

    申请号:CN201410752404.6

    申请日:2014-12-10

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种悬浮‑贴壁法制备饲养层细胞的方法,包括CF‑1 MEFs原代获取、CF‑1 MEFs传代培养和CF‑1 MEF Feeder制备三个步骤;制备CF‑1 MEF Feeder时采用悬浮‑贴壁法,即CF‑1 MEFs第3代细胞经消化形成单细胞悬液,然后以细胞贴壁后铺满培养瓶/皿的密度加至培养瓶/皿,并于培养箱中进行贴壁处理后加入MMC;MMC处理0.5小时~3.5小时后,迅速吸弃培养皿中含MMC的培养液及未贴壁细胞,只回收贴壁细胞作为Feeder。本发明方法既能充分抑制细胞有丝分裂,又能筛选出状态良好的细胞作为Feeder,提高Feeder的质量,同时可克服由于MEFs增殖速度过快,最佳处理时间不易掌握的缺点,使CF‑1 MEF Feeder制备时间更灵活方便。

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