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公开(公告)号：CN104531609A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410752404.6
申请日：2014-12-10
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种悬浮-贴壁法制备饲养层细胞的方法，包括CF-1 MEFs原代获取、CF-1 MEFs传代培养和CF-1 MEF Feeder制备三个步骤；制备CF-1 MEF Feeder时采用悬浮-贴壁法，即CF-1 MEFs第3代细胞经消化形成单细胞悬液，然后以细胞贴壁后铺满培养瓶/皿的密度加至培养瓶/皿，并于培养箱中进行贴壁处理后加入MMC；MMC处理0.5小时~3.5小时后，迅速吸弃培养皿中含MMC的培养液及未贴壁细胞，只回收贴壁细胞作为Feeder。本发明方法既能充分抑制细胞有丝分裂，又能筛选出状态良好的细胞作为Feeder，提高Feeder的质量，同时可克服由于MEFs增殖速度过快，最佳处理时间不易掌握的缺点，使CF-1 MEF Feeder制备时间更灵活方便。
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公开(公告)号：CN104388382B
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201410673462.X
申请日：2014-11-21
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种利用搅拌式细胞培养转瓶机快速制备Feeder细胞的方法，包括CF‑1 MEFs原代获取、CF‑1 MEFs传代培养和CF‑1 MEF Feeder制备等三个步骤；制备CF‑1 MEF Feeder时以搅拌式细胞培养转瓶机作为细胞处理设备，转瓶机的搅拌锤可在电磁场作用下不断旋转，使细胞在悬浮状态下与培养液中的MMC充分接触，可提高MMC抑制细胞增殖的效率，缩短处理时间；转瓶机专用培养瓶的容积是普通培养瓶皿的几倍甚至上百倍，培养瓶能重复使用，可节省大量细胞培养瓶皿，降低Feeder的制备成本，提高Feeder制备效率，节约大量实验时间；另外本方法是在悬浮状态下处理细胞，回收细胞时无需消化液处理，可减少消化对细胞带来的损伤，最大限度地保持细胞的良好状态。
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公开(公告)号：CN104388382A
公开(公告)日：2015-03-04
申请号：CN201410673462.X
申请日：2014-11-21
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种利用搅拌式细胞培养转瓶机快速制备Feeder细胞的方法，包括CF-1MEFs原代获取、CF-1MEFs传代培养和CF-1MEFFeeder制备等三个步骤；制备CF-1MEFFeeder时以搅拌式细胞培养转瓶机作为细胞处理设备，转瓶机的搅拌锤可在电磁场作用下不断旋转，使细胞在悬浮状态下与培养液中的MMC充分接触，可提高MMC抑制细胞增殖的效率，缩短处理时间；转瓶机专用培养瓶的容积是普通培养瓶/皿的几倍甚至上百倍，培养瓶能重复使用，可节省大量细胞培养瓶/皿，降低Feeder的制备成本，提高Feeder制备效率，节约大量实验时间；另外本方法是在悬浮状态下处理细胞，回收细胞时无需消化液处理，可减少消化对细胞带来的损伤，最大限度地保持细胞的良好状态。
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公开(公告)号：CN104531609B
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201410752404.6
申请日：2014-12-10
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种悬浮‑贴壁法制备饲养层细胞的方法，包括CF‑1 MEFs原代获取、CF‑1 MEFs传代培养和CF‑1 MEF Feeder制备三个步骤；制备CF‑1 MEF Feeder时采用悬浮‑贴壁法，即CF‑1 MEFs第3代细胞经消化形成单细胞悬液，然后以细胞贴壁后铺满培养瓶/皿的密度加至培养瓶/皿，并于培养箱中进行贴壁处理后加入MMC；MMC处理0.5小时~3.5小时后，迅速吸弃培养皿中含MMC的培养液及未贴壁细胞，只回收贴壁细胞作为Feeder。本发明方法既能充分抑制细胞有丝分裂，又能筛选出状态良好的细胞作为Feeder，提高Feeder的质量，同时可克服由于MEFs增殖速度过快，最佳处理时间不易掌握的缺点，使CF‑1 MEF Feeder制备时间更灵活方便。
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