一种基于CRISPR-Cas12a的妥布霉素检测系统及检测方法

    公开(公告)号:CN113640268A

    公开(公告)日:2021-11-12

    申请号:CN202111006257.4

    申请日:2021-08-30

    Inventor: 李大为 凌燊 吕蓓

    Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12a的妥布霉素检测系统,其包括:适配体探针AP、CrRNA、AsCas12a蛋白、KF聚合酶和两端分别修饰了荧光基团和淬灭基团的报告探针;适配体探针AP的序列如SEQ ID NO:1所示;CrRNA的序列如SEQ ID NO:2所示。与现有技术相比,该检测系统中的适配体探针可以与妥布霉素进行特异性结合并改变构型,在KF聚合酶的作用下产生可被CRISPR‑Cas12a系统的识别的触发DNA,最后在CRISPR‑Cas12a系统切割荧光探针以产生荧光信号,通过蓝光照射及荧光强度分析,可实现对妥布霉素可视化及定量检测,并且检测灵敏度高。

    一种检测镉离子的生物传感器以及检测镉离子的方法

    公开(公告)号:CN113584130A

    公开(公告)日:2021-11-02

    申请号:CN202110807990.X

    申请日:2021-07-16

    Abstract: 本发明涉及一种检测镉离子的生物传感器,包括磁珠探针Cd‑MBs和Hg‑MBs,Cd‑MBs上修饰连接有镉离子脱氧核酸酶序列和与镉离子脱氧核酸酶序列互补配对连接的底物链序列;Hg‑MBs上修饰连接有一个带有Poly‑T区域的分裂G‑四链体片段AT11A。与现有以脱氧核酶为识别元件的生物传感器相比,该生物传感器可以准确检测Cd2+含量,并且能够消除样品中Hg2+对Cd2+检测结果的影响,提升了Cd2+检测的特异性,该传感器还能实现样品中Hg2+的准确检测。采用本发明的生物传感器可对最低1.9nM的Cd2+和19.5nM的Hg2+进行检测,为后续核酸类生物传感器的构建提供了一种新的途径。

    一种细菌I型拓扑异构酶抑制剂、抗菌药物和制备方法

    公开(公告)号:CN109182338B

    公开(公告)日:2020-06-19

    申请号:CN201811281636.2

    申请日:2018-10-23

    Inventor: 李大为 王强 吕蓓

    Abstract: 本发明公开了一种细菌I型拓扑异构酶抑制剂、抗菌药物和制备方法,涉及抗菌药物领域。本发明公开的细菌I型拓扑异构酶抑制剂为具有错配碱基的环状闭合双链核苷酸。该抑制剂可以靶向细菌I型拓扑异构酶,起到抑制细菌I型拓扑异构酶的作用,其该抑制剂具有高稳定性,在体内不易被降解,对细菌I型拓扑异构酶具有高度靶向性的特点,可以用于制备抗菌药物。

    一种转基因杨树可视化检测系统及检测方法

    公开(公告)号:CN119776566A

    公开(公告)日:2025-04-08

    申请号:CN202411826019.1

    申请日:2024-12-12

    Abstract: 本发明公开了一种基于转基因杨树可视化检测系统及检测方法,包括:扩增引物、Cas12a蛋白与crRNA、环区变构G‑四链体、抑制子、扫描基板。该方法利用LAMP反应扩增杨树转基因片段,CRISPR‑Cas12a响应LAMP产物并切割抑制子,环区变构G‑四链体在缺少抑制子情况下,可以结合血红素后催化底物TBM生成黄色产物,扫描仪对显色样品进行扫描后,采集RGB数值并分析图片颜色信息,可高通量、数字化保存检测结果。该检测方法无需热循环仪等复杂仪器,所有涉及的设备均可随身携带,并无需固定电源,能够实现野外采样过程中对转基因杨树的现场、即时检测。

    一种基于AUW-SDA技术构建的双信号生物传感器及其在新冠病毒核酸检测中的应用

    公开(公告)号:CN119193921A

    公开(公告)日:2024-12-27

    申请号:CN202411321396.X

    申请日:2024-09-23

    Abstract: 本发明公开了一种基于AUW‑SDA技术构建的双信号生物传感器及其在新冠病毒核酸检测中的应用。相比于利用传统SDA技术构建的生物传感器,本发明中基于AUW‑SDA技术构建的双信号生物传感器,实现了直接检测无断点的长基因序列、靶标置换重利用、以及可编辑的多种信号序列输出。基于荧光信号,能够对最低0.679fM的新冠病毒靶标序列进行检测;基于化学显色信号,能够对最低13.5fM的新冠病毒靶标序列进行检测。该技术所用核苷酸探针无需修饰、成本低廉、仅更换置换引物序列即可适配多种信号输出类型的核酸检测生物传感器,在医学检测及生物学研究中具有广泛的应用前景。

    一种基于CRISPR-Cas12a的妥布霉素检测系统及检测方法

    公开(公告)号:CN113640268B

    公开(公告)日:2023-03-28

    申请号:CN202111006257.4

    申请日:2021-08-30

    Inventor: 李大为 凌燊 吕蓓

    Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12a的妥布霉素检测系统,其包括:适配体探针AP、CrRNA、AsCas12a蛋白、KF聚合酶和两端分别修饰了荧光基团和淬灭基团的报告探针;适配体探针AP的序列如SEQ ID NO:1所示;CrRNA的序列如SEQ ID NO:2所示。与现有技术相比,该检测系统中的适配体探针可以与妥布霉素进行特异性结合并改变构型,在KF聚合酶的作用下产生可被CRISPR‑Cas12a系统的识别的触发DNA,最后在CRISPR‑Cas12a系统切割荧光探针以产生荧光信号,通过蓝光照射及荧光强度分析,可实现对妥布霉素可视化及定量检测,并且检测灵敏度高。

    一种簸箕柳抗性苗的制备方法

    公开(公告)号:CN104988180B

    公开(公告)日:2018-05-01

    申请号:CN201510379029.X

    申请日:2015-07-01

    Abstract: 本发明公开了一种簸箕柳抗性苗的制备方法,包括外植体和制备和预培养、侵染菌液的制备、侵染、共培养、洗菌,分化筛选培养直至分化出可见卡那霉素抗性芽,转移到不定芽伸长筛选培养基上继续培养,待抗性芽伸长至1‑2cm,将每个抗性芽分离独立,移入生根筛选培养基中培养,经过一段时间的继代培养即可得到完整的抗性苗。该方法包括从外植体选择、培养基筛选、激素调配、抗生素敏感性、培养条件等方面建立出簸箕柳抗性苗的系统制备方法,为林木基因功能研究提供新途径。

    一种真核生物I型拓扑异构酶抑制剂及其应用

    公开(公告)号:CN115873857A

    公开(公告)日:2023-03-31

    申请号:CN202211022165.X

    申请日:2022-08-25

    Abstract: 本发明公开了一种真核生物I型拓扑异构酶抑制剂及其应用,涉及抗癌药物领域,所述抑制剂为具有G‑四链体和Topo I结合位点的G‑四链体‑双链复合体,所述G‑四链体‑双链复合体为闭合环状核苷酸复合体,所述G‑四链体‑双链复合体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的I型拓扑异构酶抑制剂,具有良好的热稳定性和核酸酶耐受性,细胞摄取率高并且对真核生物I型拓扑异构酶具有高度靶向性,对真核生物I型拓扑异构酶的活性具有较高的抑制效果,半抑制浓度IC50值为54.8nM。

    一种簸箕柳抗性苗的制备方法

    公开(公告)号:CN104988180A

    公开(公告)日:2015-10-21

    申请号:CN201510379029.X

    申请日:2015-07-01

    Abstract: 本发明公开了一种簸箕柳抗性苗的制备方法,包括外植体和制备和预培养、侵染菌液的制备、侵染、共培养、洗菌,分化筛选培养直至分化出可见卡那霉素抗性芽,转移到不定芽伸长筛选培养基上继续培养,待抗性芽伸长至1-2cm,将每个抗性芽分离独立,移入生根筛选培养基中培养,经过一段时间的继代培养即可得到完整的抗性苗。该方法包括从外植体选择、培养基筛选、激素调配、抗生素敏感性、培养条件等方面建立出簸箕柳抗性苗的系统制备方法,为林木基因功能研究提供新途径。

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