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公开(公告)号:CN101294164A
公开(公告)日:2008-10-29
申请号:CN200710021657.6
申请日:2007-04-23
Applicant: 南京大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/12 , C12N1/21 , C12P21/02 , C07K19/00 , C07K16/18 , C12N5/18 , A61K39/395 , G01N33/577 , G01N33/574 , G01N33/49 , G01N33/493 , A61P35/00
Abstract: 本发明属于生物医药领域,公开了一种重组人中期因子(rh-Midkine)的表达及其单克隆抗体的制备和应用。特征是通过大肠杆菌进行人中期因子(Midkine,MK)的原核表达,得到的重组蛋白30P-MK具有促进细胞增殖的生物活性,为MK在肿瘤、细胞生物学和神经系统等方面的研究提供基础;30P-MK蛋白纯化后免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合、筛选得到抗人MK单克隆抗体杂交瘤,所分泌的单抗为IgG1,通过对人肿瘤组织样品中中期因子Western-blotting和免疫组化的检测实验验证表明得到的单抗特异性强,背景低,可发展成为诊断试剂盒用于临床和实验室检测肿瘤组织和血清中MK的表达水平,为通过MK单抗靶向治疗肿瘤奠定了基础。
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公开(公告)号:CN101294164B
公开(公告)日:2013-01-16
申请号:CN200710021657.6
申请日:2007-04-23
Applicant: 南京大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/12 , C12N1/21 , C12P21/02 , C07K19/00 , C07K16/18 , C12N5/18 , A61K39/395 , G01N33/577 , G01N33/574 , G01N33/49 , G01N33/493 , A61P35/00
Abstract: 本发明属于生物医药领域,公开了一种重组人中期因子(rh-Midkine)的表达及其单克隆抗体的制备和应用。特征是通过大肠杆菌进行人中期因子(Midkine,MK)的原核表达,得到的重组蛋白30P-MK具有促进细胞增殖的生物活性,为MK在肿瘤、细胞生物学和神经系统等方面的研究提供基础;30P-MK蛋白纯化后免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合、筛选得到抗人MK单克隆抗体杂交瘤,所分泌的单抗为IgG1,通过对人肿瘤组织样品中中期因子Western-blotting和免疫组化的检测实验验证表明得到的单抗特异性强,背景低,可发展成为诊断试剂盒用于临床和实验室检测肿瘤组织和血清中MK的表达水平,为通过MK单抗靶向治疗肿瘤奠定了基础。
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公开(公告)号:CN101363058A
公开(公告)日:2009-02-11
申请号:CN200810123709.5
申请日:2008-05-30
Applicant: 南京大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种可以鉴定肝素粗成品成分来源的检测方法。引物及其反应体系。特征是根据Genbank公布的猪、牛、羊线粒体DNA序列,经同源性比对后,利用Primer 5.0与Oligo 6软件辅助设计得到引物,并建立了具体的稳定的巢式聚合酶链式反应(PCR)体系。经过具体实例验证,经巢式PCR反应,本发明可以用来鉴定肝素粗品成分的猪、牛、羊来源,其基因含量灵敏度达到0.01pg,可以广泛的运用到肝素粗成品检验中。本发明还可用于其它产品中猪、牛、羊的成分鉴定。
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