-
公开(公告)号：CN100383248C
公开(公告)日：2008-04-23
申请号：CN200510123112.7
申请日：2005-12-15
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了用于T-A克隆的T载体制备方法，选择一个高拷贝数的常用质粒，以此质粒为模板设计四对引物，通过定点突变构建两种在特定序列有差异的突变质粒；在两种突变质粒的多克隆位点处分别构建TTTTAAA及TTTAAAA序列盒，并分别引入两个不同的酶切位点BamHI和HindIII；将突变质粒分别导入细菌扩增，并将扩增的等量质粒用可识别TTTAAA序列的内切酶切割，混合、变性、复性，反应后的混合物酶切，去除亲本分子，即可分离出T载体。本发明采用独特的生物合成技术生产T载体，这种由生物合成的天然T载体，具有合成方便，生产成本低，克隆效率高，质量稳定等特点，用本方法构建的T载体完成了多个基因的克隆，结果表明其重组效率达到了90%以上。
-
公开(公告)号：CN100429306C
公开(公告)日：2008-10-29
申请号：CN200510134977.3
申请日：2005-12-31
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域。运用组织培养方法，通过室内扩繁获得大量的索尔邦百合无菌组培苗。选取索尔邦百合鳞片叶为外植体，经消毒后切块接入含不同植物激素的培养基中，诱导培养基诱导出愈伤及芽丛，经继代培养基增殖后，当苗高5cm以上并且基部鳞茎球形成时移入生根培养基，经练苗7天后移栽入基质中。诱导培养基为MS+2，4-D 1.0～2.0mg/L和MS+BA 1.5mg/L+NAA 0.2mg/L；增殖培养基为MS+2，4-D 1.0～1.5mg/L和MS+BA 0.5mg/L+NAA0.2mg/L；生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L和NAA0.2mg/L。培养条件是，培养温度22～26℃，光照度2000～2200lx，光照12h.d-1，pH 5.8。
-
公开(公告)号：CN1810097A
公开(公告)日：2006-08-02
申请号：CN200510134977.3
申请日：2005-12-31
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域。运用组织培养方法，通过室内扩繁获得大量的索尔邦百合无菌组培苗。选取索尔邦百合鳞片叶为外植体，经消毒后切块接入含不同植物激素的培养基中，诱导培养基诱导出愈伤及芽丛，经继代培养基增殖后，当苗高5cm以上并且基部鳞茎球形成时移入生根培养基，经炼苗7天后移栽入基质中。诱导培养基为MS+2，4－D1.0～2.0mg/L和MS+BA1.5mg/L+NAA 0.2mg/L；增殖培养基为MS+2，4－D 1.0～1.5mg/L和MS+BA 0.5mg/L+NAA0.2mg/L；生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L和NAA0.2mg/L。培养条件是，培养温度22～26℃，光照度2000～2200lx，光照12h.d－1，pH5.8。
-
公开(公告)号：CN1800404A
公开(公告)日：2006-07-12
申请号：CN200510123112.7
申请日：2005-12-15
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了用于T－A克隆的T载体制备方法，选择一个高拷贝数的常用质粒，以此质粒为模板设计四对引物，通过定点突变构建两种在特定序列有差异的突变质粒；在两种突变质粒的多克隆位点处分别构建TTTTAAA及TTTAAAA序列盒，并分别引入两个不同的酶切位点BamHI和HindIII；将突变质粒分别导入细菌扩增，并将扩增的等量质粒用可识别TTTAAA序列的内切酶切割，混合、变性、复性，反应后的混合物酶切，去除亲本分子，即可分离出T载体。本发明采用独特的生物合成技术生产T载体，这种由生物合成的天然T载体，具有合成方便，生产成本低，克隆效率高，质量稳定等特点，用本方法构建的T载体完成了多个基因的克隆，结果表明其重组效率达到了90％以上。
-
-
-
Search Results
4
records
(took 0.013 seconds)
