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公开(公告)号：CN1800404A
公开(公告)日：2006-07-12
申请号：CN200510123112.7
申请日：2005-12-15
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了用于T－A克隆的T载体制备方法，选择一个高拷贝数的常用质粒，以此质粒为模板设计四对引物，通过定点突变构建两种在特定序列有差异的突变质粒；在两种突变质粒的多克隆位点处分别构建TTTTAAA及TTTAAAA序列盒，并分别引入两个不同的酶切位点BamHI和HindIII；将突变质粒分别导入细菌扩增，并将扩增的等量质粒用可识别TTTAAA序列的内切酶切割，混合、变性、复性，反应后的混合物酶切，去除亲本分子，即可分离出T载体。本发明采用独特的生物合成技术生产T载体，这种由生物合成的天然T载体，具有合成方便，生产成本低，克隆效率高，质量稳定等特点，用本方法构建的T载体完成了多个基因的克隆，结果表明其重组效率达到了90％以上。
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公开(公告)号：CN104817473A
公开(公告)日：2015-08-05
申请号：CN201510142027.9
申请日：2015-03-27
Applicant: 南京大学
Inventor： 张远莉
IPC: C07C251/30 , C07C249/02 , C07D213/61
Abstract: 本发明涉及1-二甲氨基-3-二甲亚胺基-2-氯丙烯高氯酸盐(4)的制备方法，以及由化合物4制备得到依托考昔的方法。
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公开(公告)号：CN104402738A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410606755.6
申请日：2014-10-31
Applicant: 南京大学
Inventor： 张远莉
IPC: C07C211/52 , C07C209/36 , C07C233/43 , C07C231/02 , C07D235/16
Abstract: 本发明涉及使用选择性还原多硝基化合物得到盐酸苯达莫斯汀的中间体化合物。该方法使用钯碳催化下的活性氢供体逐步加入还原氨基邻位的硝基得到相应的化合物。该化合物可以通过公开的方法方便的合成盐酸苯达莫斯汀。
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公开(公告)号：CN100383248C
公开(公告)日：2008-04-23
申请号：CN200510123112.7
申请日：2005-12-15
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了用于T-A克隆的T载体制备方法，选择一个高拷贝数的常用质粒，以此质粒为模板设计四对引物，通过定点突变构建两种在特定序列有差异的突变质粒；在两种突变质粒的多克隆位点处分别构建TTTTAAA及TTTAAAA序列盒，并分别引入两个不同的酶切位点BamHI和HindIII；将突变质粒分别导入细菌扩增，并将扩增的等量质粒用可识别TTTAAA序列的内切酶切割，混合、变性、复性，反应后的混合物酶切，去除亲本分子，即可分离出T载体。本发明采用独特的生物合成技术生产T载体，这种由生物合成的天然T载体，具有合成方便，生产成本低，克隆效率高，质量稳定等特点，用本方法构建的T载体完成了多个基因的克隆，结果表明其重组效率达到了90%以上。
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