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公开(公告)号：CN114164229A
公开(公告)日：2022-03-11
申请号：CN202111297086.5
申请日：2021-11-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用FvePILS5基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体获得再生效率高的草莓新种质的方法及应用，包括：根据草莓FvePILS5的DNA序列，设计并合成包含目的基因靶点的sgRNA序列；用Bsa I酶将合成的包含目的基因靶点的sgRNA序列连接到pYLCRISPR/Cas9Pubi‑H载体；并利用农杆菌转化森林草莓叶片外植体，测序验证再生植株突变序列，得到愈伤形成和离体芽再生频率较高的pils5‑1森林草莓突变体种质。本发明通过构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，并用农杆菌转化法，获得了再生效率较高的pils5‑1突变体，创造了新种质，为草莓再生苗的获得提供了一种高效的方法。
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公开(公告)号：CN111471691B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202010253412.1
申请日：2020-04-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种FveCHA1基因及RNAi载体在促进草莓愈伤形成及离体芽再生中的应用。本发明从森林草莓中筛选得到森林草莓FveCHA1基因，构建得到森林草莓FveCHA1基因的植物抑制表达载体GN2300‑FveCHA1，进而转染得到转基因工程菌，转入二倍体森林草莓‘Ruegen’中，获得FveCHA1基因的RNAi表达干扰株系。在离体叶片组织培养条件下，FveCHA1基因抑制表达株系的愈伤形成和芽点再生时间早于野生型，表明下调森林草莓FveCHA1基因可促进森林草莓草莓愈伤形成及离体芽再生。本发明对优化草莓再生体系和促进植物快繁具有重要意义。
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公开(公告)号：CN109706156B
公开(公告)日：2022-10-14
申请号：CN201910162508.4
申请日：2019-03-05
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体设计一种提早草莓的开花时间的基因、载体及其应用。从森林草莓中筛选得到森林草莓FveDDM1基因，构建得到森林草莓FveDDM1基因的植物抑制表达载体GN2300‑FveDDM1，进而转染转基因工程菌，转入二倍体森林草莓‘Ruegen’中，获得FveDDM1基因的RNAi表达干扰株系。在离体叶片组织培养条件下，FveDDM1基因抑制表达系的草莓的开花时间显著早于野生型，表明下调森林草莓FveDDM1基因可提早草莓植株的开花时间，遗传转化FveDDM1干扰载体的森林草莓转基因株系的开花时间显著提早。本发明对提早草莓的开花时间具有重要意义。
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公开(公告)号：CN109706156A
公开(公告)日：2019-05-03
申请号：CN201910162508.4
申请日：2019-03-05
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体设计一种提早草莓的开花时间的基因、载体及其应用。从森林草莓中筛选得到森林草莓FveDDM1基因，构建得到森林草莓FveDDM1基因的植物抑制表达载体GN2300-FveDDM1，进而转染转基因工程菌，转入二倍体森林草莓‘Ruegen’中，获得FveDDM1基因的RNAi表达干扰株系。在离体叶片组织培养条件下，FveDDM1基因抑制表达系的草莓的开花时间显著早于野生型，表明下调森林草莓FveDDM1基因可提早草莓植株的开花时间，遗传转化FveDDM1干扰载体的森林草莓转基因株系的开花时间显著提早。本发明对提早草莓的开花时间具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117286174A
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202311270793.4
申请日：2023-09-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本申请涉及一种获得粉色森林草莓果实的RNAi干扰载体FvDML‑RNAi的应用，为解决现有草莓果实颜色调节方法中存在的果实颜色的变化不可遗传且果实颜色一致性较低的问题，本发明提供沉默FvDML基因或FvDML基因的沉默载体在森林草莓粉果形成中的应用和在降低森林草莓果实花青素含量中的应用，且基因干扰手段从基因层面影响了花青素的形成，对果实颜色的干扰具有一致的效果。本发明构建的FvDML‑RNAi草莓具有可遗传、花青素干扰效率好的优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114164229B
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202111297086.5
申请日：2021-11-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用FvePILS5基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体获得再生效率高的草莓新种质的方法及应用，包括：根据草莓FvePILS5的DNA序列，设计并合成包含目的基因靶点的sgRNA序列；用Bsa I酶将合成的包含目的基因靶点的sgRNA序列连接到pYLCRISPR/Cas9Pubi‑H载体；并利用农杆菌转化森林草莓叶片外植体，测序验证再生植株突变序列，得到愈伤形成和离体芽再生频率较高的pils5‑1森林草莓突变体种质。本发明通过构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，并用农杆菌转化法，获得了再生效率较高的pils5‑1突变体，创造了新种质，为草莓再生苗的获得提供了一种高效的方法。
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公开(公告)号：CN112326585B
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN202011174511.7
申请日：2020-10-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N21/3563 , G01N21/01
Abstract: 本发明公开了一种用于快速检测草莓白粉病的红外光谱装置及检测方法，本发明的红外光谱装置，包括具有一突出的枪头和垂直握把以及内有凹槽的外壳，枪头处装有放置测试样品的夹片，所述夹片上有用于闭合的弹簧装置，该弹簧上设有控制伸缩的开关。开关控制激发红外光的激发器，激发器打出的红外光束通过扩束器照入干涉器，通过摆动镜打到样品表面，之后通过狭缝经过透射、反射汇聚到三棱镜的另一侧，通过透镜到达检测器。本发明通过扫描1800‑1500cm‑1波段，在不超过5个波数的光谱狭窄区域内获得特征峰，准确的检测出肉眼无法观测到的草莓白粉病。得到的峰面积比值结合对应的计算公式，对白粉病发病期进行准确的预测。
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公开(公告)号：CN111471691A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010253412.1
申请日：2020-04-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种FveCHA1基因及RNAi载体在促进草莓愈伤形成及离体芽再生中的应用。本发明从森林草莓中筛选得到森林草莓FveCHA1基因，构建得到森林草莓FveCHA1基因的植物抑制表达载体GN2300-FveCHA1，进而转染得到转基因工程菌，转入二倍体森林草莓‘Ruegen’中，获得FveCHA1基因的RNAi表达干扰株系。在离体叶片组织培养条件下，FveCHA1基因抑制表达株系的愈伤形成和芽点再生时间早于野生型，表明下调森林草莓FveCHA1基因可促进森林草莓草莓愈伤形成及离体芽再生。本发明对优化草莓再生体系和促进植物快繁具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111109060A
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201911203621.9
申请日：2019-11-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高草莓脱毒苗室内驯化成活率的方法，包括以下步骤：(1)搭建栽培架，安装LED灯；(2)将育苗穴盘装好基质；(3)开盖驯化；(4)幼苗移栽；(5)加盖保湿：对穴盘覆盖保湿膜保湿；(6)驯化环境管理；(7)脱毒苗移栽：室内驯化后脱毒苗成活后，移栽至室外。本发明的驯化环境可控性强，不受时间、空间限制，周年可以驯化，重复使用效率高，有效利用空间，生产成本低，脱毒苗成活率高。
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公开(公告)号：CN116875670A
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202310765256.0
申请日：2023-06-27
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6869 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于突变育种技术领域，具体涉及一种基于高通量测序的突变体筛选方法。将待测突变群体划分为不超过250个杂合或500个纯合个体的检测池，利用野生型DNA对检测池DNA进行3倍以上稀释，获得对应稀释池DNA。对检测池和对应稀释池进行目标片段的相同引物PCR扩增及产物高通量测序，将测序所得序列拼接至野生型参考序列，计算每个位点在检测池和对应稀释池中的变异核苷酸频率(NVF)及两者间的比值。若一个位点处的NVF比值>1.5，且其检测池和稀释池中的NVF均大于对应理论NVF值的80％，则该位点存在突变，而该检测池中存在突变体。本发明准确灵敏、简便易行，且将杂合突变体筛选分辨率从现有约1/100至少提高至1/250，对于提高大突变群体的突变体筛选效率具有重要意义。
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